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小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的克隆与表达
1
作者
方娅琼
冯以勒
+8 位作者
马玉婷
冯春辉
赵猛
陆文凯
许文豪
李生强
马凯茹
冈林环树
张红见
《青海畜牧兽医杂志》
2025年第3期14-18,共5页
Irp2基因参与编码合成铁载体-耶尔森杆菌素(Ybt),是小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的重要标志基因。为了探索小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的功能、免疫原性及强毒力岛的致病机制,本研究基于GenBank数据库中小肠结肠炎耶尔森菌的irp2基因序列...
Irp2基因参与编码合成铁载体-耶尔森杆菌素(Ybt),是小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的重要标志基因。为了探索小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的功能、免疫原性及强毒力岛的致病机制,本研究基于GenBank数据库中小肠结肠炎耶尔森菌的irp2基因序列,设计合成了一对特异性引物,以小肠结肠炎耶尔森菌ZDN6菌株为研究对象,通过PCR技术扩增获得413 bp的irp2基因片段,并进行了测序分析;随后将其克隆至pET28a(+)载体,转化入TOP10感受态细胞,通过限制性酶切和测序对重组质粒进行验证;然后将鉴定正确的重组质粒pET28a(+)-irp2导入BL21(DE)3菌株中,通过IPTG促使融合蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析其表达水平。结果表明,pET28a(+)-irp2原核表达载体构建成功,并在大肠埃希菌BL21(DE)3中成功表达出irp2基因,该融合蛋白的大小约为15 kDa。研究结果可为后期高致病性小肠结肠炎耶尔森菌的筛选、鉴定以及强毒力岛的致病机制等研究奠定基础。
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关键词
小肠结肠炎耶尔森菌
irp2基因
克隆
原核表达
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题名
小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的克隆与表达
1
作者
方娅琼
冯以勒
马玉婷
冯春辉
赵猛
陆文凯
许文豪
李生强
马凯茹
冈林环树
张红见
机构
青海大学农牧学院
日本国立宫崎大学
出处
《青海畜牧兽医杂志》
2025年第3期14-18,共5页
基金
青海省科学技术厅项目(2021-HZ-803)
青海省农业农村厅项目(NMSY-2020-02
NMSY-2020-03)。
文摘
Irp2基因参与编码合成铁载体-耶尔森杆菌素(Ybt),是小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的重要标志基因。为了探索小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的功能、免疫原性及强毒力岛的致病机制,本研究基于GenBank数据库中小肠结肠炎耶尔森菌的irp2基因序列,设计合成了一对特异性引物,以小肠结肠炎耶尔森菌ZDN6菌株为研究对象,通过PCR技术扩增获得413 bp的irp2基因片段,并进行了测序分析;随后将其克隆至pET28a(+)载体,转化入TOP10感受态细胞,通过限制性酶切和测序对重组质粒进行验证;然后将鉴定正确的重组质粒pET28a(+)-irp2导入BL21(DE)3菌株中,通过IPTG促使融合蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析其表达水平。结果表明,pET28a(+)-irp2原核表达载体构建成功,并在大肠埃希菌BL21(DE)3中成功表达出irp2基因,该融合蛋白的大小约为15 kDa。研究结果可为后期高致病性小肠结肠炎耶尔森菌的筛选、鉴定以及强毒力岛的致病机制等研究奠定基础。
关键词
小肠结肠炎耶尔森菌
irp2基因
克隆
原核表达
Keywords
Yersinia enterocolitica
Irp2 gene
Cloning
Prokaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的克隆与表达
方娅琼
冯以勒
马玉婷
冯春辉
赵猛
陆文凯
许文豪
李生强
马凯茹
冈林环树
张红见
《青海畜牧兽医杂志》
2025
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