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甘草酸体外抗人巨细胞病毒AD169的作用 被引量:22
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作者 王永洪 兰婉莹 陈恬 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期2121-2127,共7页
目的探讨甘草酸体外抗人巨细胞病毒AD169的作用。方法人胚肺成纤维细胞感染人巨细胞病毒后,用细胞病变法(CPE)评价甘草酸的抗病毒作用。并计算甘草酸的半数中毒浓度(TC_(50)),病毒半数抑制浓度(IC_(50))以及治疗指数(TI),并与更昔洛韦... 目的探讨甘草酸体外抗人巨细胞病毒AD169的作用。方法人胚肺成纤维细胞感染人巨细胞病毒后,用细胞病变法(CPE)评价甘草酸的抗病毒作用。并计算甘草酸的半数中毒浓度(TC_(50)),病毒半数抑制浓度(IC_(50))以及治疗指数(TI),并与更昔洛韦抗病毒作用相比较。结果甘草酸的TC_(50)为7.65 mg/m L,IC_(50)为311.55 mg/L,TI为24.55;更昔洛韦的TC_(50)为0.98 mg/m L,IC_(50)为44.15 mg/L,TI为22.20。结论甘草酸的TC_(50)比更昔洛韦的TC_(50)高出将近8倍,其治疗指数也优于更昔洛韦,故甘草酸具有较好的抗人巨细胞病毒应用前景。 展开更多
关键词 甘草酸 人巨细胞病毒AD169 抗病毒活性
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HSV-1碱性脱氧核糖核酸酶AN在毕赤酵母中的表达、纯化和活性鉴定
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作者 胡金 陈恬 +3 位作者 张文秋 张燕 王永洪 兰婉莹 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期261-266,共6页
目的在毕赤酵母中表达HSV-1复制的关键酶——碱性脱氧核糖核酸酶(alkaline deoxyribonuclease,AN),检测其核酸外切酶活性,从而进一步研究AN的抑制剂。方法以Gen Bank发表的HSV-1的17株UL12基因为模板,在不改变UL12氨基酸序列的情况下选... 目的在毕赤酵母中表达HSV-1复制的关键酶——碱性脱氧核糖核酸酶(alkaline deoxyribonuclease,AN),检测其核酸外切酶活性,从而进一步研究AN的抑制剂。方法以Gen Bank发表的HSV-1的17株UL12基因为模板,在不改变UL12氨基酸序列的情况下选择毕赤酵母偏好密码子,设计合成新的基因UL12-2,定向克隆进毕赤酵母表达载体p PIC9K中,经酶切和测序鉴定证明重组载体构建成功。线性化的重组载体p PIC9K-UL12-2,电转化至毕赤酵母菌GS115,用组氨酸缺陷平板选择His+转化子,并进行表型测定,筛选出高抗性转化子。采取甲醇诱导表达,对诱导表达96h的上清进行离子交换层析,SDS-PAGE检测经纯化的AN,并对AN进行核酸外切酶活性检测。结果重组质粒p PIC9K-UL12-2在GS115中成功分泌表达,表达产物纯化后经SDS-PAGE检测可见目的蛋白条带,目的蛋白显示出核酸外切酶活性。结论毕赤酵母成功表达了具有核酸外切酶活性的碱性核酸酶AN,为抗HSV-1新药的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 HSV-1 UL12基因 AN 毕赤酵母 酶活性
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