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我国沿海5个地区冬季养殖仿刺参体表微生物多样性比较分析 被引量:1
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作者 潘美利 党慧凤 +3 位作者 黄宇希 王晓航 黎睿君 丁君 《水产科技情报》 2024年第3期159-168,共10页
为探究仿刺参(Apostichopus japonicus)体表微生物在仿刺参疾病发生与环境交互中的作用,采用Illumina HiSeq高通量测序技术对来自大连、营口、唐山、威海、宁德等5个沿海地区的养殖仿刺参体表微生物进行了多样性分析。结果显示,地域差... 为探究仿刺参(Apostichopus japonicus)体表微生物在仿刺参疾病发生与环境交互中的作用,采用Illumina HiSeq高通量测序技术对来自大连、营口、唐山、威海、宁德等5个沿海地区的养殖仿刺参体表微生物进行了多样性分析。结果显示,地域差异对仿刺参体表微生物组成影响明显,其中福建省宁德市霞浦县(ND)养殖仿刺参的体表微生物组成与其他4个地区差异最明显。在门水平上,各地区的最优势菌门均为变形菌门(Proteobacteria),其中ND组相对丰富度(76.16%)最低;在目和科水平上,ND组的最优势微生物分别属于柄杆菌目(Caulobacterales)和生丝单胞菌科(Hyphomonadaceae),所占比例分别为14.48%、14.34%;在属水平上,ND组仿刺参体表微生物中不动杆菌属(Acinetobacter)、副球菌属(Paracoccus)、毛螺菌属(Lachnospira)等所占的比例与其他各组存在显著差异(P<0.05);山东省威海市乳山市(WH)养殖仿刺参体表微生物多样性在属水平上的相对丰富度最高,该组副球菌属所占比例与其他地区均存在显著差异(P<0.05)。研究结果可为进一步开展仿刺参体表微生物多样性与环境适应进化研究以及养殖仿刺参病害防治提供参考。 展开更多
关键词 仿刺参 冬季 体表微生物 多样性差异
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哈维氏弧菌溶血素的包涵体纯化、多抗制备及活性验证 被引量:1
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作者 赵小然 郭羿 +3 位作者 党慧凤 邢震宇 何哲 叶仕根 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期496-501,共6页
为进一步研究哈维氏弧菌溶血素(Vibrio harveyi hemolysin,VHH)的生物学功能,构建了vhh原核表达载体,并利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,采用DOT-ELISA和Western-blot方法检测抗体的效价及特异性,并通过溶血试验评估抗体对哈维氏弧菌... 为进一步研究哈维氏弧菌溶血素(Vibrio harveyi hemolysin,VHH)的生物学功能,构建了vhh原核表达载体,并利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,采用DOT-ELISA和Western-blot方法检测抗体的效价及特异性,并通过溶血试验评估抗体对哈维氏弧菌培养物上清溶血活性的影响。结果表明:在构建得到的表达菌株pET28a-vhh-BL21(DE3)中,重组蛋白以包涵体形式大量表达;对该重组蛋白进行纯化并复性后,利用纯化的蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体效价为1∶163840,可特异性识别VHH蛋白,且稀释倍数小于1000时,可显著抑制哈维氏弧菌培养物上清的溶血活性。本研究结果对VHH单抗的制备、哈维氏弧菌检测手段的完善及哈维氏弧菌的疫苗研发具有一定参考作用。 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 溶血素 包涵体纯化 多抗
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3种宿主源盾纤毛虫的分离鉴定及体外培养研究 被引量:4
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作者 高延奇 王森 +2 位作者 刘娟 党慧凤 黎睿君 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期260-267,共8页
为进一步鉴定和体外培养引起养殖海水鱼类和棘皮动物体表溃烂的致病性盾纤毛虫,分别从辽宁地区养殖的患病刺参Apostichopus japonicus、红鳍东方鲀Takifugu rubripes和大菱鲆Scophthalmus maximus的体表分离出3种盾纤毛虫,采用活体观察... 为进一步鉴定和体外培养引起养殖海水鱼类和棘皮动物体表溃烂的致病性盾纤毛虫,分别从辽宁地区养殖的患病刺参Apostichopus japonicus、红鳍东方鲀Takifugu rubripes和大菱鲆Scophthalmus maximus的体表分离出3种盾纤毛虫,采用活体观察、甲醛固定观察、扫描电镜观察、醋酸洋红染色及甲基绿派洛宁染色的方法,对3种盾纤毛虫的形态特征进行分析;采用PCR技术获得其18S rDNA基因序列,并与同源序列进行比对及构建系统发育树;选用L-15、MEM和RPMI1640培养基,在相同培养条件下培养7 d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小;采用盾纤毛虫最适培养基,在不同的温度(10、15、20、30℃)、盐度(13、20、30、40)、pH(4.2、5.2、7.2、9.2)条件下培养7 d,比较3种盾纤毛虫种群密度的大小。结果表明:从刺参和红鳍东方鲀体表分离出的盾纤毛虫形态均与尾丝虫Uronema sp.相似,且18S rDNA序列与尾丝虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与尾丝虫聚为一支;从大菱鲆体表分离出的盾纤毛虫形态与伪康纤虫Pseudocohnilembus sp.相似,且18S rDNA序列与伪康纤虫的一致性高达99%,在系统发育树上以100%的最高置信度值与伪康纤虫聚为一支;体外最适培养基筛选结果显示,L-15培养基培养的盾纤毛虫种群密度高于MEM和RPMI1640培养基;体外培养条件试验结果显示,推荐体外培养条件为温度20℃、盐度30、pH 7.2。本研究结果可为海水养殖动物体表溃烂病原盾纤毛虫的分离鉴定及基于盾纤毛虫全虫疫苗研制的体外培养条件优化提供参考。 展开更多
关键词 盾纤毛虫 不同宿主源 分离鉴定 体外培养
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一例沃氏葡萄球菌引起的银龙鱼细菌性疾病诊治 被引量:1
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作者 黄宇希 党慧凤 黎睿君 《科学养鱼》 2019年第12期49-49,共1页
银龙鱼(Osteoglossum bicirrhosum),又称双须骨舌鱼,隶属于辐鳍鱼纲、骨舌鱼目、骨舌鱼科。由于其体态优美,形似神话中的“龙”,故大受东亚文化圈内观赏鱼养殖者的追捧,成为极其名贵的观赏鱼之一。辽宁省某观赏鱼养殖场从马来西亚引进鱼... 银龙鱼(Osteoglossum bicirrhosum),又称双须骨舌鱼,隶属于辐鳍鱼纲、骨舌鱼目、骨舌鱼科。由于其体态优美,形似神话中的“龙”,故大受东亚文化圈内观赏鱼养殖者的追捧,成为极其名贵的观赏鱼之一。辽宁省某观赏鱼养殖场从马来西亚引进鱼种1000尾于当地养殖,在31℃循环流水系统中养殖20天,投喂冰冻杂鱼,每日饲喂两次,于2019年4月下旬开始发病,濒死鱼被送至大连市海珍品疾病防控重点实验室进行诊断,通过药敏试验及药物治疗后该病得到了有效控制。 展开更多
关键词 东亚文化圈 观赏鱼养殖 疾病防控 重点实验室 细菌性疾病 海珍品 马来西亚
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一例草鱼鳃霉病的诊治
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作者 倪萍 叶仕根 +3 位作者 党慧凤 侯玉林 田城城 黎睿君 《科学养鱼》 2017年第12期71-71,共1页
草鱼是我国重要的淡水养殖经济鱼类。2013年我国草鱼产量已达到480万吨,占经济鱼类年产量的20%。目前报道对草鱼危害较大的疾病主要有病毒性的草鱼出血病,细菌性疾病有细菌性烂鳃病、肠炎病、赤皮病等草鱼“老三病”,以及寄生虫性... 草鱼是我国重要的淡水养殖经济鱼类。2013年我国草鱼产量已达到480万吨,占经济鱼类年产量的20%。目前报道对草鱼危害较大的疾病主要有病毒性的草鱼出血病,细菌性疾病有细菌性烂鳃病、肠炎病、赤皮病等草鱼“老三病”,以及寄生虫性疾病九江头槽绦虫、球虫、中华鳋等。草鱼的真菌感染性疾病少有报道。2017年8月,大连市海珍品疾病防控重点实验室接诊了一例鳃丝肿胀、严重充血、出血使得鳃呈现花斑样, 展开更多
关键词 草鱼出血病 鳃霉病 细菌性疾病 诊治 细菌性烂鳃病 寄生虫性疾病 经济鱼类 感染性疾病
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