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蜂蜜中转基因成分启动子和终止子的多重实时荧光PCR法检测
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作者 林碧莲 张雅薇 +8 位作者 高宇 何孟杭 邱秀玉 韩涛 张芳 傅德江 陈思琪 宋帆 柯振华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期69-77,共9页
为能高效率定位蜂蜜中的转基因可疑阳性样品,以10种转基因启动子和终止子(花椰菜花叶病毒35S启动子(pCaMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(tNOS)、玄参花叶病毒的35S启动子(p FMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因启动子(pNOS)、玉... 为能高效率定位蜂蜜中的转基因可疑阳性样品,以10种转基因启动子和终止子(花椰菜花叶病毒35S启动子(pCaMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(tNOS)、玄参花叶病毒的35S启动子(p FMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因启动子(pNOS)、玉米泛素基因的启动子(pUbi)、烟草的花蕊特异性TA29的基因发育调节启动子(pTA29)、豌豆二磷酸核酮糖羧化酶基因的终止子(tE9)、章鱼碱合成酶终止子(t OCS)、谷氨酰胺转移酶7终止子(tg7)、花椰菜花叶病毒终止子(tCaMV35S))为研究靶标,进行10种启动子和终止子的引物和探针组合筛选、反应条件优化、灵敏度测定、质控品测试比对等实验,建立3组多重实时荧光PCR反应体系,并将其应用于市售蜂蜜的检测。结果表明:建立的3组多重实时荧光PCR反应体系能精准检出目的基因,其灵敏度分别为0.01、0.04、0.04 ng/μL;14种转基因质控品的测试显示多重实时荧光PCR和单重实时荧光PCR的检测结果一致;40份市售蜂蜜的筛查中,有两份蜂蜜检出pCaMV35S和tNOS,其余未检出,该方法大大提高了检测效率。该方法为蜂蜜中转基因成分的检测提供了快筛快检技术,同时也适用其它产品转基因成分的检测。 展开更多
关键词 蜂蜜 转基因 启动子 终止子 多重实时荧光PCR
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饮料中霉菌和酵母计数检验结果不确定度的评定 被引量:2
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作者 傅德江 《食品安全导刊》 2020年第18期120-121,共2页
为了真实反应饮料中霉菌和酵母计数检验结果的精确度,评定霉菌和酵母计数的不确定度,探讨并建立了简单易行的饮料中霉菌和酵母计数检验的不确定度评定方法,确定了样品中霉菌和酵母计数检测的置信区间。
关键词 饮料 霉菌和酵母计数 不确定度
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乳粉中肺炎克雷伯氏菌核酸提取方法比较
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作者 傅德江 宋帆 +3 位作者 韩涛 林碧莲 张芳 张雅薇 《中国食品工业》 2021年第8期4-7,共4页
研究以牛奶中的致病性肺炎克雷伯氏菌作为研究对象,通过阳性菌株加标提取细菌核酸,用异硫氰酸 胍法、改良SDS-CTAB法、高温裂解法和试剂盒法分析比较,选用紫外分光光度计法和实时荧光PCR法对各方 法进行系统评估。目的是建立稳定高效的... 研究以牛奶中的致病性肺炎克雷伯氏菌作为研究对象,通过阳性菌株加标提取细菌核酸,用异硫氰酸 胍法、改良SDS-CTAB法、高温裂解法和试剂盒法分析比较,选用紫外分光光度计法和实时荧光PCR法对各方 法进行系统评估。目的是建立稳定高效的婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯氏菌核酸(DNA)的提取方法。四种方法均 能有效从人工污染肺炎克雷伯氏菌的乳粉中提取到肺炎克雷伯氏菌的DNA,异硫氰酸胍法提取效率较高,但费时 费力。高温裂解法操作简单、提取时间短,但DNA提取效率较低,试剂盒法提取的DNA效率和产量相对较高、质 量稳定、易标准化、方法重现性较好。 展开更多
关键词 核酸 检测 乳品 肺炎克雷伯氏菌
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护手霜中菌落总数测定用培养基的探讨
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作者 傅德江 《福建轻纺》 2017年第6期43-45,共3页
检测化妆品菌落总数时,为使菌落在培养基中清晰可辨,允许在卵磷脂、吐温80一营养琼脂培养基中添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(以下简称TTC)。文章以护手霜为样品基质,分别加入适当菌含量的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、酵... 检测化妆品菌落总数时,为使菌落在培养基中清晰可辨,允许在卵磷脂、吐温80一营养琼脂培养基中添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(以下简称TTC)。文章以护手霜为样品基质,分别加入适当菌含量的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、酵母工作菌悬液,制备5mg/100mL浓度的TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂,同时以不添加TTC卵磷脂、吐温80一营养琼脂平板进行验证,以营养琼脂培养基作为对照,对菌落计数结果进行对比。结论:添加了5mg/100mLTTC的培养基用于化妆品菌落总数检测时对G+有明显的抑制作用,建议在日常检测过程中需慎重选择。 展开更多
关键词 化妆品 菌落计数 TTC
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双歧杆菌的生理功能和检测技术的进展 被引量:3
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作者 韩涛 刘雅婷 +3 位作者 张芳 傅德江 林碧莲 张雅薇 《福建分析测试》 CAS 2019年第5期22-26,共5页
双歧杆菌(Bifidobacterium)是人体肠道主要的优势菌群之一,因其具有改善胃肠道、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多方面作用,而受到广泛关注。因此双歧杆菌的检测和鉴定也成为国内外学者研究和开发的一个热点,多种检测技术方法相继... 双歧杆菌(Bifidobacterium)是人体肠道主要的优势菌群之一,因其具有改善胃肠道、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等多方面作用,而受到广泛关注。因此双歧杆菌的检测和鉴定也成为国内外学者研究和开发的一个热点,多种检测技术方法相继被报导。本文双歧杆菌的微生态学和生理生化功能,以及双歧杆菌传统和现代检测技术进行综述,并对将来研究方向前景进行展望。 展开更多
关键词 双歧杆菌 生理功能 检测技术 分子生物学
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海产品中副溶血性弧菌检测能力验证分析报告 被引量:2
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作者 张芳 韩涛 +1 位作者 林碧莲 傅德江 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第5期1580-1584,共5页
目的通过参加英国FAPAS分析实验室组织的海产品中副溶血性弧菌检测能力验证,对其实验结果出现的异常现象进行分析,找出导致本次能力验证组织失效的原因。方法按照GB 4789.7-2013、SN/T1870-2016及相关作业指导书等进行实验,通过采用本... 目的通过参加英国FAPAS分析实验室组织的海产品中副溶血性弧菌检测能力验证,对其实验结果出现的异常现象进行分析,找出导致本次能力验证组织失效的原因。方法按照GB 4789.7-2013、SN/T1870-2016及相关作业指导书等进行实验,通过采用本实验室经常采用的检测方法进行检验,对实验出现的异常结果进行分析。结果发现M224d21A和M224d21B这2个冷藏运输箱包装的冻干样品由于储藏和运输等问题,导致未检出副溶血性弧菌。结论此次能力验证分析对于我院在海产品中副溶血性弧菌检测方面技术水平的提高和品牌形象的确立起到了积极作用,同时也为检验工作者对于能力验证出现异常现象提供一种解决问题的新思路、新方法。 展开更多
关键词 海产品 副溶血性弧菌 检测水平 能力验证
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饲料微生物添加剂中地衣芽孢杆菌实时荧光PCR检测 被引量:2
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作者 宋帆 傅德江 +3 位作者 黄姝玲 邱希斌 许任伟 林钊 《福建分析测试》 CAS 2020年第1期54-58,共5页
建立饲料添加剂中地衣芽孢杆菌实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并经实际样品检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到103 CFU/mL,可用于饲料添加剂中地衣芽孢... 建立饲料添加剂中地衣芽孢杆菌实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并经实际样品检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到103 CFU/mL,可用于饲料添加剂中地衣芽孢杆菌的快速检测。 展开更多
关键词 多重实时荧光聚合酶链式反应(PCR) 地衣芽孢杆菌 饲料添加剂
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