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题名TRIML1对肝癌细胞恶性生长的影响
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作者
吴宪
徐哲
偏丽丽
赵敏
李涛
张纪岩
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机构
安徽医科大学第一附属医院检验科
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期1206-1211,共6页
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基金
国家自然科学基金(81201488,81571572)
卫生部应用研究项目(28-1-50)资助。
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文摘
目的:探讨TRIML1对肝癌细胞恶性生长的影响。方法:在HepG2肝癌细胞中筛选鉴定过表达TRIML1稳定株。利用CCK8法检测过表达TRIML1稳定株的生长增殖活性;软琼脂克隆形成实验分析过表达TRIML1稳定株的克隆形成能力。裸鼠成瘤实验分析过表达TRIML1稳定株的动物体内成瘤能力。使用炎症细胞因子TNF-α刺激过表达TRIML1稳定株和阴性对照8 h,收取细胞上清,ELISA检测IL-6分泌情况。在Huh7肝癌细胞中用小干扰RNA(siRNA)敲低TRIML1,spheres形成实验检测敲低TRIML1对Huh7生长状况的影响,并且收取上清检测IL-6的分泌。结果:成功筛选出过表达TRIML1的稳定株;过表达TRIML1稳定株细胞增殖活性明显高于对照组(P<0.01);过表达TRIML1稳定株的软琼脂集落数明显高于对照组(P<0.01);过表达TRIML1稳定株组的裸鼠瘤体体积和重量明显高于对照组(P<0.01);过表达TRIML1稳定株的IL-6本底水平的分泌和TNF-α诱导的分泌均高于对照组(P<0.01)。TRIML1敲低后,Huh7细胞spheres形成能力显著下降,IL-6的分泌量也降低,反向验证上述效应。结论:TRIML1能明显促进肝癌细胞体内和体外的恶性增长,效应可能与IL-6的表达上升有关。
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关键词
TRIML1
肝癌细胞
细胞增殖
克隆形成
裸鼠成瘤
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Keywords
TRIML1
Hepatocellular carcinoma
Cell proliferation
Colony formation
Tumor formation in nude mice
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分类号
R329.2
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名MIB2对HepG2肝癌细胞恶性生长的影响
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作者
徐哲刘健
沈少灵
偏丽丽
黄晓峰
林周
修冰水
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机构
安徽医科大学
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
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出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期1289-1292,1297,共5页
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基金
本文受北京市自然科学基金(7174329、5174042)资助。
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文摘
目的:探讨Mindbomb E3泛素蛋白连接酶2(MIB2)对HepG2肝癌细胞恶性生长的影响,并分析其可能机制。方法:以HepG2肝癌细胞为研究对象,首先筛选过表达MIB2稳定株,利用细胞软琼脂克隆实验观察集落形成情况;使用炎性细胞因子TNF-α和RNA病毒SEV处理MIB2过表达稳定株和阴性对照4 h,免疫印迹法检测Notch1的表达水平;同时收取细胞培养上清,ELISA检测IL-6及TNF-α的分泌情况。其次通过小干扰RNA(siRNA)转染HepG2细胞,48 h后通过免疫印迹法验证MIB2敲低情况;同样使用TNF-α和SEV处理4 h,收取细胞培养上清,ELISA检测IL-6及TNF-α的分泌情况。结果:过表达MIB2对HepG2细胞的克隆形成有明显的抑制作用;过表达MIB2导致HepG2细胞IL-6本底水平的分泌和TNF-α及SEV诱导的分泌均下降,在上述各条件下均未检测到TNF-α的分泌,Notch1表达水平无显著变化。MIB2敲低后,HepG2细胞IL-6本底水平的分泌和TNF-α及SEV诱导的分泌均增强,反向验证上述效应。结论:MIB2能够明显抑制肝癌细胞的恶性生长,该效应可能和IL-6的表达下降有关。
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关键词
MIB2
肝癌细胞
IL-6
TNF-Α
克隆形成
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Keywords
MIB2
Hepatocellular carcinoma
IL-6
TNF-α
Clone formation
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分类号
R329.2
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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