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新生小鼠皮肤成纤维细胞的分离培养与鉴定
被引量：
6
1
作者
胡素贤
倪晓妍
+1 位作者
王嘉逊
高丰光
《中国医药导报》
CAS
2011年第29期5-7,26,F0003,共5页
目的:建立一种简单易行的自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞的方法,并对分离细胞进行鉴定。方法:无菌取新生Balb/c小鼠背部皮肤,剪碎呈1 mm2大小,组织块均匀放置于培养皿并以DMEM(含10%胎牛血清)培养基对组织块进行培养;以胰蛋白酶消化...
目的:建立一种简单易行的自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞的方法,并对分离细胞进行鉴定。方法:无菌取新生Balb/c小鼠背部皮肤,剪碎呈1 mm2大小,组织块均匀放置于培养皿并以DMEM(含10%胎牛血清)培养基对组织块进行培养;以胰蛋白酶消化分离细胞-重新贴壁法对分离培养细胞进行纯化;以NIH3T3细胞为对照,免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测波形蛋白表达情况以对培养的成纤维细胞进行鉴定。结果:新生小鼠背部皮肤组织培养3 d时可见细胞呈细长梭形或呈多角形,组织培养5 d后可见大量细胞自组织块游离生长,组织培养7 d后可见细胞呈单层漩涡状排列或纵横交错,贴壁细胞团呈放射状生长。免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测发现分离细胞和NIH3T3细胞均表达波形蛋白;流式细胞术证实分离的成纤维细胞波形蛋白表达阳性率和平均荧光密度分别为13.33%和9.89,而NIH3T3细胞波形蛋白阳性率和平均荧光密度分别为28.11%和14.16。结论:分离培养的细胞具有成纤维细胞的形态学特征,并表达成纤维细胞的特征分子波形蛋白。以组织块直接培养法成功自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞,为建立肿瘤体外模拟微环境提供实验材料和研究基础。
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关键词
新生小鼠
成纤维细胞
体外培养
波形蛋白
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职称材料
二氯化钴浓度对急性早幼粒白血病细胞系NB4增殖的影响
2
作者
周国忠
吴云路
+2 位作者
倪晓妍
董学君
陶志华
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2015年第12期913-915,共3页
目的观察体外低氧环境对人急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4的细胞增殖及低氧诱导因子(HIF-1α)基因表达水平的影响。方法体外培养NB4细胞,分别用0、50、100、200、400、800μmol/L二氯化钴(Co Cl2)处理24、48、72 h,收集细胞观察Co Cl2对...
目的观察体外低氧环境对人急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4的细胞增殖及低氧诱导因子(HIF-1α)基因表达水平的影响。方法体外培养NB4细胞,分别用0、50、100、200、400、800μmol/L二氯化钴(Co Cl2)处理24、48、72 h,收集细胞观察Co Cl2对NB4细胞增殖的影响,CCK-8法检测细胞增殖率;RT-PCR检测HIF-1α基因的表达水平。结果 CCK-8法结果表明,Co Cl2终浓度为0、50、100、200μmol/L时的吸光度(A)值依次升高,400、800μmol/L的A值依次降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);RT-PCR结果显示,Co Cl2终浓度在50、100、200、400、800μmol/L时的HIF-1α表达水平差异均有统计学意义(P均<0.05);显微镜下可观察到低浓度Co Cl2促进细胞增殖,高浓度Co Cl2致使细胞增殖受抑制。结论低浓度的Co Cl2可以促进NB4细胞增殖,HIF-1α基因可能参与该过程。
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关键词
低氧诱导因子
NB4细胞
急性早幼粒细胞白血病
二氯化钴
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职称材料
题名
新生小鼠皮肤成纤维细胞的分离培养与鉴定
被引量：
6
1
作者
胡素贤
倪晓妍
王嘉逊
高丰光
机构
厦门大学附属第一医院呼吸内科
厦门大学医学院基础医学部免疫学实验室
出处
《中国医药导报》
CAS
2011年第29期5-7,26,F0003,共5页
基金
福建省自然科学基金计划资助项目(编号:2008J0112)
福建省厦门市自然科学基金(编号:3502Z20104002)
文摘
目的:建立一种简单易行的自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞的方法,并对分离细胞进行鉴定。方法:无菌取新生Balb/c小鼠背部皮肤,剪碎呈1 mm2大小,组织块均匀放置于培养皿并以DMEM(含10%胎牛血清)培养基对组织块进行培养;以胰蛋白酶消化分离细胞-重新贴壁法对分离培养细胞进行纯化;以NIH3T3细胞为对照,免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测波形蛋白表达情况以对培养的成纤维细胞进行鉴定。结果:新生小鼠背部皮肤组织培养3 d时可见细胞呈细长梭形或呈多角形,组织培养5 d后可见大量细胞自组织块游离生长,组织培养7 d后可见细胞呈单层漩涡状排列或纵横交错,贴壁细胞团呈放射状生长。免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测发现分离细胞和NIH3T3细胞均表达波形蛋白;流式细胞术证实分离的成纤维细胞波形蛋白表达阳性率和平均荧光密度分别为13.33%和9.89,而NIH3T3细胞波形蛋白阳性率和平均荧光密度分别为28.11%和14.16。结论:分离培养的细胞具有成纤维细胞的形态学特征,并表达成纤维细胞的特征分子波形蛋白。以组织块直接培养法成功自新生小鼠皮肤分离培养成纤维细胞,为建立肿瘤体外模拟微环境提供实验材料和研究基础。
关键词
新生小鼠
成纤维细胞
体外培养
波形蛋白
Keywords
Newborn mice
Fibroblasts
In vitro culture
Vimentin
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
二氯化钴浓度对急性早幼粒白血病细胞系NB4增殖的影响
2
作者
周国忠
吴云路
倪晓妍
董学君
陶志华
机构
浙江大学医学院附属第二医院检验科
绍兴市人民医院检验科
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2015年第12期913-915,共3页
基金
绍兴市科技计划项目(2012B70051)
文摘
目的观察体外低氧环境对人急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4的细胞增殖及低氧诱导因子(HIF-1α)基因表达水平的影响。方法体外培养NB4细胞,分别用0、50、100、200、400、800μmol/L二氯化钴(Co Cl2)处理24、48、72 h,收集细胞观察Co Cl2对NB4细胞增殖的影响,CCK-8法检测细胞增殖率;RT-PCR检测HIF-1α基因的表达水平。结果 CCK-8法结果表明,Co Cl2终浓度为0、50、100、200μmol/L时的吸光度(A)值依次升高,400、800μmol/L的A值依次降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);RT-PCR结果显示,Co Cl2终浓度在50、100、200、400、800μmol/L时的HIF-1α表达水平差异均有统计学意义(P均<0.05);显微镜下可观察到低浓度Co Cl2促进细胞增殖,高浓度Co Cl2致使细胞增殖受抑制。结论低浓度的Co Cl2可以促进NB4细胞增殖,HIF-1α基因可能参与该过程。
关键词
低氧诱导因子
NB4细胞
急性早幼粒细胞白血病
二氯化钴
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新生小鼠皮肤成纤维细胞的分离培养与鉴定
胡素贤
倪晓妍
王嘉逊
高丰光
《中国医药导报》
CAS
2011
6
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职称材料
2
二氯化钴浓度对急性早幼粒白血病细胞系NB4增殖的影响
周国忠
吴云路
倪晓妍
董学君
陶志华
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
2015
0
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