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蔗糖磷酸化酶制备及应用的研究进展
被引量：
8
1
作者
侯顾伟
马江锋
+2 位作者
隋姗姗
姜岷
韦萍
《中国酿造》
CAS
北大核心
2010年第6期17-20,共4页
蔗糖磷酸化酶作为一种葡萄糖基转移酶,具有广泛的底物特异性,能够催化合成α型熊果苷、低聚糖等多种物质,在食品、化妆品、医药行业具有广泛的应用。该文综述了蔗糖磷酸化酶的结构等生化特性及其催化特性,并介绍了目前高产蔗糖磷酸化酶...
蔗糖磷酸化酶作为一种葡萄糖基转移酶,具有广泛的底物特异性,能够催化合成α型熊果苷、低聚糖等多种物质,在食品、化妆品、医药行业具有广泛的应用。该文综述了蔗糖磷酸化酶的结构等生化特性及其催化特性,并介绍了目前高产蔗糖磷酸化酶的主要生产菌株,以及该酶的应用及市场前景,并结合国外研究的热点及其研究进展,提出了国内开展课题研究方向。
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关键词
蔗糖磷酸化酶
糖苷酶
糖基转移酶
熊果苷
低聚糖
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职称材料
蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成α-熊果苷的研究
被引量：
2
2
作者
侯顾伟
马江锋
+3 位作者
隋姗姗
徐冰
刘嵘明
姜岷
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期182-186,共5页
考察了肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)G123厌氧发酵产蔗糖磷酸化酶下游的分离纯化工艺。收集的菌体经超声破碎得到粗酶液,通过硫酸铵沉淀、透析、阴离子交换层析分离后获得了电泳纯的蔗糖磷酸化酶,酶活回收率为31.7%,酶的分...
考察了肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)G123厌氧发酵产蔗糖磷酸化酶下游的分离纯化工艺。收集的菌体经超声破碎得到粗酶液,通过硫酸铵沉淀、透析、阴离子交换层析分离后获得了电泳纯的蔗糖磷酸化酶,酶活回收率为31.7%,酶的分子量约为55.7 kD,纯化后的蔗糖磷酸化酶比活为115.3 U/mg。该酶在中性及偏酸性(pH5.5-8.0)情况下,酶稳定性较好,较报道的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)B-1149的pH稳定范围宽。同时该酶在37℃保存2 h,酶活几乎没有下降。利用获得的纯酶以氢醌和蔗糖为底物催化合成α-熊果苷,在23 U/mL的酶反应体系中,60%蔗糖、5%氢醌、pH7.5,37℃,反应12 h,氢醌转化率达到16.3%,α-熊果苷的产量为20g/L。
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关键词
蔗糖磷酸化酶
α-熊果苷
转葡萄糖基
糖基转移酶
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职称材料
肠膜明串珠菌蔗糖磷酸化酶基因在大肠杆菌中的表达
被引量：
3
3
作者
隋姗姗
马江锋
+2 位作者
侯顾伟
奚永兰
姜岷
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期157-161,共5页
以肠膜明串珠菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到1 581 bp的蔗糖磷酸化酶(SPase)DNA片段。将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)上,构建获得重组质粒pET-SPase。测序结果与GenBank上已公布的基因序列比较,有1个碱基发生变化,但该碱基的改...
以肠膜明串珠菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到1 581 bp的蔗糖磷酸化酶(SPase)DNA片段。将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)上,构建获得重组质粒pET-SPase。测序结果与GenBank上已公布的基因序列比较,有1个碱基发生变化,但该碱基的改变未引起氨基酸序列的改变。将pET-SPase转化到Escherichia coli Rosetta(DE3)感受态中,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析,目的蛋白条带约为55 kD,与预期大小一致,结果表明SPase基因在大肠杆菌中进行了表达。酶活分析,产物的比活为1.8 U/mg,证明了表达产物具有预期的酶活性。进一步考察了IPTG浓度、诱导温度和时间等因素对重组菌表达的蔗糖磷酸化酶的影响。在优化条件下,该蔗糖磷酸化酶的比活可以达到16.6 U/mg,比优化表达条件前的酶比活提高了9.2倍,比已报道的肠膜明串珠菌粗酶液比活(7.1 U/mg)提高了2.34倍。
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关键词
蔗糖磷酸化酶
肠膜明串珠菌
基因克隆
原核表达
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职称材料
题名
蔗糖磷酸化酶制备及应用的研究进展
被引量：
8
1
作者
侯顾伟
马江锋
隋姗姗
姜岷
韦萍
机构
南京工业大学生物与制药工程科学学院材料与化学工程国家重点实验室
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2010年第6期17-20,共4页
基金
国家自然科学基金(20606017)
"十一五"国家科技支撑计划重大项目(2008BAI63B07)
文摘
蔗糖磷酸化酶作为一种葡萄糖基转移酶,具有广泛的底物特异性,能够催化合成α型熊果苷、低聚糖等多种物质,在食品、化妆品、医药行业具有广泛的应用。该文综述了蔗糖磷酸化酶的结构等生化特性及其催化特性,并介绍了目前高产蔗糖磷酸化酶的主要生产菌株,以及该酶的应用及市场前景,并结合国外研究的热点及其研究进展,提出了国内开展课题研究方向。
关键词
蔗糖磷酸化酶
糖苷酶
糖基转移酶
熊果苷
低聚糖
Keywords
sucrose phosphorylase
glycosidase
glycosyltransferase
arbutin
oligosaccharide
分类号
TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成α-熊果苷的研究
被引量：
2
2
作者
侯顾伟
马江锋
隋姗姗
徐冰
刘嵘明
姜岷
机构
南京工业大学生物与制药工程学院材料与化学工程国家重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期182-186,共5页
基金
国家自然科学基金项目(21076105)
"十一五"国家科技支撑计划重大项目(2008BAl63B07)
国家"973"计划项目(2009CB724701)
文摘
考察了肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)G123厌氧发酵产蔗糖磷酸化酶下游的分离纯化工艺。收集的菌体经超声破碎得到粗酶液,通过硫酸铵沉淀、透析、阴离子交换层析分离后获得了电泳纯的蔗糖磷酸化酶,酶活回收率为31.7%,酶的分子量约为55.7 kD,纯化后的蔗糖磷酸化酶比活为115.3 U/mg。该酶在中性及偏酸性(pH5.5-8.0)情况下,酶稳定性较好,较报道的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)B-1149的pH稳定范围宽。同时该酶在37℃保存2 h,酶活几乎没有下降。利用获得的纯酶以氢醌和蔗糖为底物催化合成α-熊果苷,在23 U/mL的酶反应体系中,60%蔗糖、5%氢醌、pH7.5,37℃,反应12 h,氢醌转化率达到16.3%,α-熊果苷的产量为20g/L。
关键词
蔗糖磷酸化酶
α-熊果苷
转葡萄糖基
糖基转移酶
Keywords
Sucrose phosphorylase α-arbutin Transglucosylation Transglucosidase
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
肠膜明串珠菌蔗糖磷酸化酶基因在大肠杆菌中的表达
被引量：
3
3
作者
隋姗姗
马江锋
侯顾伟
奚永兰
姜岷
机构
南京工业大学生物与制药工程学院材料与化学工程国家重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期157-161,共5页
基金
国家自然科学基金项目(21076105)
"十一五"国家科技支撑计划重大项目(2008BAI63B07)
文摘
以肠膜明串珠菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到1 581 bp的蔗糖磷酸化酶(SPase)DNA片段。将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)上,构建获得重组质粒pET-SPase。测序结果与GenBank上已公布的基因序列比较,有1个碱基发生变化,但该碱基的改变未引起氨基酸序列的改变。将pET-SPase转化到Escherichia coli Rosetta(DE3)感受态中,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析,目的蛋白条带约为55 kD,与预期大小一致,结果表明SPase基因在大肠杆菌中进行了表达。酶活分析,产物的比活为1.8 U/mg,证明了表达产物具有预期的酶活性。进一步考察了IPTG浓度、诱导温度和时间等因素对重组菌表达的蔗糖磷酸化酶的影响。在优化条件下,该蔗糖磷酸化酶的比活可以达到16.6 U/mg,比优化表达条件前的酶比活提高了9.2倍,比已报道的肠膜明串珠菌粗酶液比活(7.1 U/mg)提高了2.34倍。
关键词
蔗糖磷酸化酶
肠膜明串珠菌
基因克隆
原核表达
Keywords
Sucrose phosphorylase Leuconostoc mesenteroides Gene cloning Prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蔗糖磷酸化酶制备及应用的研究进展
侯顾伟
马江锋
隋姗姗
姜岷
韦萍
《中国酿造》
CAS
北大核心
2010
8
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下载PDF
职称材料
2
蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成α-熊果苷的研究
侯顾伟
马江锋
隋姗姗
徐冰
刘嵘明
姜岷
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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下载PDF
职称材料
3
肠膜明串珠菌蔗糖磷酸化酶基因在大肠杆菌中的表达
隋姗姗
马江锋
侯顾伟
奚永兰
姜岷
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
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