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狂犬病病毒脑内感染MyD88^(-/-)小鼠对肺脏病理变化的影响 被引量:3
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作者 凌小清 蔡宗伶 +6 位作者 谭深根 刘俊丹 侯华琳 张银 梁晶晶 李晓宁 罗廷荣 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2135-2145,共11页
【目的】明确狂犬病病毒(RABV)脑内感染MyD88基因敲除(MyD88^(-/-))小鼠对肺脏病理变化的影响,探索MyD88基因缺失对狂犬病发病进程的延迟作用,为进一步揭示RABV的致病机理打下基础。【方法】以RABV的弱毒株rRC-HL和标准强毒株CVS-24分... 【目的】明确狂犬病病毒(RABV)脑内感染MyD88基因敲除(MyD88^(-/-))小鼠对肺脏病理变化的影响,探索MyD88基因缺失对狂犬病发病进程的延迟作用,为进一步揭示RABV的致病机理打下基础。【方法】以RABV的弱毒株rRC-HL和标准强毒株CVS-24分别脑内感染MyD88^(-/-)和野生型(MyD88^(+/+))小鼠,攻毒剂量1000 FFU/只,以相同方式和剂量接种DMEM作为对照。观察脑内感染后小鼠的临床症状及体质量变化,采集脑内感染后第4和7 d的脑组织和肺脏,通过实时荧光定量PCR检测小鼠脑组织及肺脏内病毒基因和细胞因子的表达情况,并制作肺脏组织切片观察其病理变化。【结果】MyD88^(+/+)和MyD88^(-/-)小鼠脑内感染弱毒株rRC-HL后出现轻微的临床症状,而标准强毒株CVS-24对MyD88^(+/+)和MyD88^(-/-)小鼠均具有致死性。与MyD88^(+/+)小鼠相比,MyD88^(-/-)小鼠的发病时间和死亡时间均延迟1~2 d,弱毒株rRC-HL脑内感染2种小鼠均从第10 d开始恢复体质量,且临床症状逐渐消失,但MyD88^(-/-)小鼠较MyD88^(+/+)小鼠恢复得更快。脑内感染RABV后,小鼠脑组织相关细胞因子(IFN-α、IFN-γ、IL-1β、MCP-1和TNF-α)的表达发生明显变化,而在肺脏中的表达差异倍数只有少部分超过2.00倍,且随感染时间的推移其变化呈现不规律性。濒死期小鼠肺脏组织切片观察发现,MyD88^(+/+)小鼠肺脏组织切片的细胞核染着色深,肺泡壁稍微增厚,有轻微炎症变化,有巨噬细胞出现;MyD88^(-/-)小鼠肺脏组织切片的细胞核着色浅,肺泡壁增厚不明显,炎症变化较轻,有少量巨噬细胞浸润。【结论】脑内感染后第7 d是RABV在小鼠脑组织中复制能力最强的时段,且脑组织相关细胞因子的表达差异倍数随病程的推移发生明显变化;肺脏组织切片并未发现典型的特征性病理变化,但RABV感染对MyD88^(-/-)小鼠肺脏病理的影响小于MyD88^(+/+)小鼠,即MyD88基因缺失有利于小鼠对抗RABV感染,抑制炎症产生及延迟机体发病。 展开更多
关键词 狂犬病病毒(RABV) 小鼠 MyD88基因 敲除 肺脏 病理变化
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猪流行性腹泻病毒和猪圆环病毒3型双重PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 韩昊莹 赵宇 +5 位作者 崔建涛 田润博 侯华琳 徐朋丽 郑兰兰 陈红英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期99-103,共5页
为建立同时快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重PCR方法。本研究根据GenBank中登录的PEDV和PCV3基因组序列,分别在M基因和Rep基因高度同源保守区设计2对特异性引物,建立了检测PEDV和PCV3双重PCR方法,即可同时扩... 为建立同时快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重PCR方法。本研究根据GenBank中登录的PEDV和PCV3基因组序列,分别在M基因和Rep基因高度同源保守区设计2对特异性引物,建立了检测PEDV和PCV3双重PCR方法,即可同时扩增225bp(PEDV)和138bp(PCV3)2条特异性片段,而该方法对猪传染性胃肠炎病毒、猪博卡病毒、猪圆环病毒2型、大肠杆菌核酸扩增均为阴性;PEDV和PCV3的最低检出量分别为428和325拷贝/μL,且特异性强、敏感性好,为快速、高效检测PEDV和PCV3提供了技术帮助。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 猪圆环病毒3型 双重PCR
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鉴别猪流行性腹泻病毒野毒株和疫苗株RT-PCR方法的建立 被引量:1
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作者 韩昊莹 郑慧华 +4 位作者 赵宇 张鸿鑫 侯华琳 贾会斌 陈红英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期84-88,共5页
为临床上能鉴别猪流行性腹泻病毒(PEDV)野毒株和疫苗株,根据GenBank中已发表的PEDV疫苗株ORF3基因序列,在245~293位缺失区域两侧设计合成1对特异性引物,建立了快速鉴别和诊断PEDV野毒株和疫苗株的RT-PCR方法,即PEDV野毒株、疫苗株基因... 为临床上能鉴别猪流行性腹泻病毒(PEDV)野毒株和疫苗株,根据GenBank中已发表的PEDV疫苗株ORF3基因序列,在245~293位缺失区域两侧设计合成1对特异性引物,建立了快速鉴别和诊断PEDV野毒株和疫苗株的RT-PCR方法,即PEDV野毒株、疫苗株基因组中分别可扩增出长度为282和233bp的特异性片段,而对猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪博卡病毒、猪伪狂犬病毒核酸扩增均为阴性;对PEDV野毒株与疫苗株的最低检测下限分别为455拷贝/μL和396拷贝/μL。该方法不仅能够有效区分PEDV野毒株和疫苗株,而且能够鉴别发病猪的感染情况,为该病的防控提供了有效地技术保障。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 野毒株与疫苗株 ORF3基因 RT-PCR 诊断与鉴别
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