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嗜群血蜱和长角血蜱ITS-2、COⅠ和COⅡ基因序列变异与亲缘关系分析 被引量:15
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作者 古小彬 余增莹 +4 位作者 杨光友 孙家刚 魏洪 李开均 王淑贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期746-754,共9页
本研究旨在阐明长角血蜱与嗜群血蜱间的亲缘关系。采用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱基因组DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)片段、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)片段和线粒体细胞色素氧化酶亚... 本研究旨在阐明长角血蜱与嗜群血蜱间的亲缘关系。采用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱基因组DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)片段、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COⅠ)片段和线粒体细胞色素氧化酶亚基II基因(COⅡ)片段,并进行测序,进而分析其基因变异与系统发育。结果表明,长角血蜱和嗜群血蜱的ITS-2、COⅠ和COⅡ基因片段的大小存在差异,长角血蜱3种基因分别为361、479和647bp,嗜群血蜱基因分别为354、474和661bp。长角血蜱与嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因的相似性分别为84.2%、89.0%和88.4%。以3种基因构建的NJ进化树中,长角血蜱和嗜群血蜱均聚类。因此,认为长角血蜱和嗜群血蜱间ITS-2、COI和COII基因间变异较小,它们是血蜱属中亲缘关系较近的2个有效种,支持传统形态学的分类地位。 展开更多
关键词 长角血蜱 嗜群血蜱 ITS-2 COⅠ COⅡ 序列变异 亲缘关系
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长角血蜱保护性抗原基因P_(27/30)的克隆和原核表达
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作者 杨彩明 杨光友 +2 位作者 张晓谦 贾小勇 余增莹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1406-1410,共5页
采用RT-PCR技术首次从孤雌生殖长角血蜱四川株克隆到P27/30基因,扩增序列全长670 bp,包含完整的开放阅读框,编码201个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为23.38 ku。同源性分析表明孤雌生殖长角血蜱中国株与日本株P27/30基因同源性高达99.85... 采用RT-PCR技术首次从孤雌生殖长角血蜱四川株克隆到P27/30基因,扩增序列全长670 bp,包含完整的开放阅读框,编码201个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为23.38 ku。同源性分析表明孤雌生殖长角血蜱中国株与日本株P27/30基因同源性高达99.85%。经RT-PCR检测分析,该基因在孤雌生殖长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱、饥饿成蜱和饱血成蜱这几个阶段均有表达。将该基因亚克隆后连接到pET32a(+)原核表达载体,转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导可成功进行表达。表达的目的蛋白大小为24 ku左右,与预期大小一致;Western-blot显示兔抗长角血蜱全虫抗体能够识别该重组表达蛋白。 展开更多
关键词 孤雌生殖 长角血蜱 P27/30基因 克隆 原核表达
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