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猪肺炎支原体P46-P65重组蛋白的表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:3
1
作者 杨振宇 李璇 +7 位作者 刘一宁 谢邵波 郑金 刘春燕 林美婷 刘腾 唐红剑 余兴龙 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期709-715,共7页
为建立猪肺炎支原体(Mhp)血清学调查及免疫评估方法,本研究利用DNAStar生物学软件对Mhp的P46和P65进行抗原表位分析,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)获得P46-P65融合基因,构建重组表达质粒pETP46-P65,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经... 为建立猪肺炎支原体(Mhp)血清学调查及免疫评估方法,本研究利用DNAStar生物学软件对Mhp的P46和P65进行抗原表位分析,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)获得P46-P65融合基因,构建重组表达质粒pETP46-P65,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经诱导后获得了可溶性表达的重组P46(aa33~aa419)-P65(aa307~aa627)蛋白(rP46-P65)。以纯化的r P46-P65为包被抗原,经优化各反应条件后建立了检测Mhp抗体的间接ELISA方法。特异性试验结果显示所建立的方法与CSFV、FMDV、PEDV、PCV2、PRV、PRRSV和APP等阳性血清均无交叉反应。该方法可检测到最高稀释至6 400倍的Mhp阳性血清,批内和批间变异系数均小于5%。利用IDEXX试剂盒和本研究建立的方法同时检测298份临床血清样品,前者的检测阳性率为62.4%(186/298),后者的检测阳性率为73.8%(220/298),两者检测结果的总符合率为88.6%。IDEXX检测为阳性的血清,采用本研究建立的ELISA方法检测也均为阳性;而部分Mhp阳性猪经IDEXX试剂盒检测为阴性的血清,该ELISA方法检测结果却为阳性,其中79.4%(27/34)检测结果有差异的血清经Mhp颜色变化试验证明均为阳性,表明本研究建立的ELISA方法的敏感性明显高于IDEXX方法。本研究建立的检测猪Mhp抗体的间接ELISA方法与目前广泛使用的方法相比优势明显,为临床血清流行病学调查及血清抗体水平评估提供了可行方法。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 重组 融合蛋白P46-P65 间接ELISA
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“饲料禁抗”后规模猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学调查和分析 被引量:1
2
作者 高梦丽 廖荣莉 +5 位作者 李贺 柳泰 卿任科 唐红剑 郑金 余兴龙 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第10期48-54,共7页
为了解“饲料禁抗”后规模猪场中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的流行情况,本试验于2021―2023年在16个未免疫疫苗的APP阳性规模猪场采集不同生产阶段猪群的2286份血清样本,应用间接ELISA进行抗体检测。结果显示:(1)16个规模猪场血清... 为了解“饲料禁抗”后规模猪场中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的流行情况,本试验于2021―2023年在16个未免疫疫苗的APP阳性规模猪场采集不同生产阶段猪群的2286份血清样本,应用间接ELISA进行抗体检测。结果显示:(1)16个规模猪场血清样本的APP抗体总阳性率为61.2%(1399/2286),高于文献报道的“饲料禁抗”前猪群阳性率(20%~53%);(2)在不同生产阶段的猪群中,母猪APP抗体阳性率最高(92.4%,545/590),其次为哺乳期仔猪(87.6%,227/259),而后从高到低依次是育肥后期、保育期和育肥中期猪群,APP抗体阳性率分别为63.6%(361/568)、43.7%(129/295)和35.3%(122/346),育肥早期猪群的APP抗体阳性率最低,为6.6%(15/228);(3)初产母猪的APP抗体阳性率(73.8%)明显低于其他胎次母猪(96.3%~97.4%);(4)猪只的APP母源抗体随着日龄的增长而下降,基本在90日龄时降到最低,此后猪群因APP感染而导致APP抗体水平和阳性率均开始缓慢上升,到肥猪出栏前仍一直上升。结果表明,饲养密度增加和推迟肥猪出栏是导致规模猪场APP感染大幅上升的重要因素。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 饲料禁抗 规模猪场 血清学调查
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湖南一株猪非典型瘟病毒的鉴定及其NS5B和E2基因序列分析
3
作者 柳泰 胡兴业 +3 位作者 毛婉 谢邵波 尹德明 余兴龙 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期98-103,共6页
随机挑选湖南某规模化猪场出现“抖抖病”的新生仔猪,采集血清样本,用可扩增猪非典型瘟病毒(APPV)的NS5B基因和E2基因引物进行RT-PCR鉴定,对PCR扩增产物测序。随后利用MegAlign软件分析NS5B和E2基因序列的同源性,预测E2蛋白部分结构,并... 随机挑选湖南某规模化猪场出现“抖抖病”的新生仔猪,采集血清样本,用可扩增猪非典型瘟病毒(APPV)的NS5B基因和E2基因引物进行RT-PCR鉴定,对PCR扩增产物测序。随后利用MegAlign软件分析NS5B和E2基因序列的同源性,预测E2蛋白部分结构,并使用MEGA 5.0,采用邻接法构建NS5B和E2基因的遗传进化树。结果表明,发病仔猪为猪非典型瘟病毒(APPV)感染阳性。鉴定毒株HN0626与GenBank中84株参考毒株NS5B和E2基因序列的同源性分别为81.68%~98.95%、81.14%~99.33%,通过预测E2蛋白部分结构,推导其潜在的B细胞抗原表位。系统发育分析显示,HN0626毒株属于基因1型,是全球猪群中的主要流行毒株,其E2、NS5B基因序列在GenBank中的登录号分别为OR936135、OR936136。 展开更多
关键词 猪非典型瘟病毒 NS5B基因 E2基因 抗原表位预测 湖南
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中医舌诊自动识别方法的研究 被引量:56
4
作者 余兴龙 谭耀麟 +5 位作者 竺子民 索忠堃 金国藩 翁维良 许秀森 葛文津 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期336-344,共9页
本文分析了中医舌诊的主要内容,提出了实现自动识别的对策。在此基础上,以Munsell颜色系统为色标,运用色度学、近代光学技术、数字图像处理技术和计算机硬件技术,建立了中医舌诊自动识别系统。在该系统上,以中医辨症论治学... 本文分析了中医舌诊的主要内容,提出了实现自动识别的对策。在此基础上,以Munsell颜色系统为色标,运用色度学、近代光学技术、数字图像处理技术和计算机硬件技术,建立了中医舌诊自动识别系统。在该系统上,以中医辨症论治学说为指导,将计算机软件技术与临床辨舌经验结合,利用样本训练系统,根据模糊数学理论,确定有关舌像的定义域,进行纹理分析。临床研究了366例淡红舌、暗红舌、紫红舌、暗紫舌四种舌像,符合率86.34%。 展开更多
关键词 中医诊法 舌诊 舌苔 数字图像处理 模糊聚类
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以重组mE2蛋白为抗原建立检测猪瘟病毒抗体间接ELISA方法的研究 被引量:46
5
作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李作生 马正海 李红卫 吴健敏 吕宗吉 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期220-222,共3页
以在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区(mE2)为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为:12μg/孔纯化... 以在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区(mE2)为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为:12μg/孔纯化的E.coli表达的mE2重组蛋白包被酶标板,用10%的兔血清或马血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。试验表明应用重组mE2蛋白作为诊断HCV抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 展开更多
关键词 mE2重组蛋白 猪瘟病毒 抗体 间接ELISA
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猪瘟病毒兔化弱毒(HCLV)疫苗株基因组全长cDNA的克隆与序列分析 被引量:9
6
作者 余兴龙 涂长春 +3 位作者 徐兴然 张茂林 李作生 于师宇 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第5期38-42,共5页
根据猪瘟病毒基因组的序列设计合成了覆盖HCLV基因组全部序列的5对引物,通过RT-PCR从感染家兔脾脏中扩增获得了包含HCLV(bog cholera lapinized virus,HCLV)基因组全序列的5个cDNA片段,并将它们分别克隆至pGEM-T vector中。然后将这5个c... 根据猪瘟病毒基因组的序列设计合成了覆盖HCLV基因组全部序列的5对引物,通过RT-PCR从感染家兔脾脏中扩增获得了包含HCLV(bog cholera lapinized virus,HCLV)基因组全序列的5个cDNA片段,并将它们分别克隆至pGEM-T vector中。然后将这5个cDNA片段按它们在HCLV基因组上的位置从5’端至3’端的顺序依次通过酶切连接,一并克隆到pPoly2载体中得到HCLV基因组全长cDNA的质粒pPOHCLV。序列分析表明,HCLV基因组长度共12310bp,有一个大的ORF,编码一3898个氨基酸的多聚蛋白。其5'-NCR和3’-NCR长度分别是374nt和239nt。与非兔化毒株相比较,HCLV基因组在12133nt处有12个碱基的插入CTTTTTTCTTTT,该序列可能是病毒在适应兔体增殖过程中形成的。基于基因组全序列及其所推导的氨基酸序列的同源性分析表明,毒株的亲缘关系的远近与它们的毒力之间并没有相关性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒 基因组 疫苗株 HCLV cDNA 全长序列 克隆 同源性
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基于SPR传感的空间相位调制蛋白质芯片检测方法 被引量:7
7
作者 余兴龙 闫硕 +1 位作者 定翔 刘芳芳 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1134-1139,共6页
无标记蛋白质芯片检测可成为蛋白质组学研究的重要技术平台。将空间相位调制与SPR传感结合,使发生SPR时引起的反射光的相位变化转化为干涉条纹的位置变化,通过分析干涉条纹的位置变化即可获得反射光的相位变化,从而解析出相关生物信息... 无标记蛋白质芯片检测可成为蛋白质组学研究的重要技术平台。将空间相位调制与SPR传感结合,使发生SPR时引起的反射光的相位变化转化为干涉条纹的位置变化,通过分析干涉条纹的位置变化即可获得反射光的相位变化,从而解析出相关生物信息。在构建了空间调制SPR相位检测实验装置的基础上,进行了生理盐水浓度测定以及兔IgG和羊抗兔IgG相互作用检测实验。实验结果表明,NaCl溶液分辨率至少为3×10-5RIU,检测的动态范围达到1.33~1.37,兔IgG与羊抗兔IgG相互作用时引起相位变化12°。这些实验结果表明,该方法适合蛋白质微芯片的检测。 展开更多
关键词 表面等离子体共振 空间相位调制 相位检测 蛋白质芯片 蛋白质组学
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中医舌诊自动识别系统 被引量:19
8
作者 余兴龙 竺子民 +1 位作者 金国藩 谭耀麟 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1994年第1期67-72,共6页
本文叙述了中医舌诊自动识别系统的组成、工作过程和真彩色图像处理电路。提出了把样本训练技术与模糊聚类方法相结合,建立计算机判别标准,实现舌像的自动识别。本文还叙了系统软件设计及特点。临床实验表明,专家辨舌与自动辨舌比较,舌... 本文叙述了中医舌诊自动识别系统的组成、工作过程和真彩色图像处理电路。提出了把样本训练技术与模糊聚类方法相结合,建立计算机判别标准,实现舌像的自动识别。本文还叙了系统软件设计及特点。临床实验表明,专家辨舌与自动辨舌比较,舌质符合率89.24%,舌苔符合率94.20%,结果令人满意。 展开更多
关键词 中医学 舌诊 自动识别系统
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蛋白质微阵列SPR实时相位检测 被引量:2
9
作者 余兴龙 魏星 +3 位作者 王鼎新 定翔 廖玮 赵新生 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期888-892,共5页
将表面等离子体共振(surfaceplasmonresonance,SPR)与空间相位调制检测结合,用一束准直的平行光照射传感芯片,在反射光路中引入渥拉斯顿棱镜,使光束中的p光和s光产生偏振光干涉形成条纹,生化反应的有关信息从干涉条纹的相位变化中得出.... 将表面等离子体共振(surfaceplasmonresonance,SPR)与空间相位调制检测结合,用一束准直的平行光照射传感芯片,在反射光路中引入渥拉斯顿棱镜,使光束中的p光和s光产生偏振光干涉形成条纹,生化反应的有关信息从干涉条纹的相位变化中得出.选择金膜厚度为30nm和40nm的两种芯片,分别用浓度为50%和20%的酒精-水溶液进行实验,得到SPR阵列图谱;选择金膜厚度为30nm,兔IgG作为阳性对照,牛血清白蛋白(BSA)作为阴性对照,与0.2mL的羊抗兔IgG、1.8mL水的混合溶液反应,得到阵列反应图谱.实验结果表明,这种方法具有抗干扰能力强,灵敏度高,无需标记和可实时检测等优点,能满足蛋白质芯片检测的要求. 展开更多
关键词 蛋白质微阵列 SPR 相位检测 偏振光干涉
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引起新生仔猪腹泻的肺炎克雷伯菌的分离鉴定及药敏试验
10
作者 谢邵波 杨振宇 +2 位作者 周磊 余兴龙 尹德明 《湖南畜牧兽医》 2024年第2期17-19,共3页
2021年4月中旬,实验室从岳阳某猪场严重腹泻死亡的新生仔猪肠系膜淋巴结中,分离得到在麦康凯琼脂培养基上生长为红色菌落、革兰氏染色为红色短杆状的细菌,通过16S r RNA和质谱鉴定该菌为肺炎克雷伯菌。药敏试验结果显示,该菌对左氧氟沙... 2021年4月中旬,实验室从岳阳某猪场严重腹泻死亡的新生仔猪肠系膜淋巴结中,分离得到在麦康凯琼脂培养基上生长为红色菌落、革兰氏染色为红色短杆状的细菌,通过16S r RNA和质谱鉴定该菌为肺炎克雷伯菌。药敏试验结果显示,该菌对左氧氟沙星敏感,对大观霉素和多西环素较敏感。针对药敏试验结果对猪场腹泻仔猪用药后,腹泻情况明显好转,进一步说明引起腹泻的病原为肺炎克雷伯菌。 展开更多
关键词 仔猪腹泻 肠系膜淋巴结 肺炎克雷伯菌 药敏试验
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横向塞曼激光器在生物分子检测中的应用研究 被引量:1
11
作者 余兴龙 蒋弘 +3 位作者 王浩娟 殷纯永 赵乐群 朱圣庚 《激光技术》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期97-100,共4页
首先简述了表面等离子体共振原理、激发表面等离子体共振的条件和产生共振时反射光的相位变化 ,再对横向塞曼激光器的应用进行了分析。接着 ,基于相位检测 ,以横向塞曼激光器为光源 ,建立了生物分子相互作用检测实验装置 ,并以蓖麻毒素... 首先简述了表面等离子体共振原理、激发表面等离子体共振的条件和产生共振时反射光的相位变化 ,再对横向塞曼激光器的应用进行了分析。接着 ,基于相位检测 ,以横向塞曼激光器为光源 ,建立了生物分子相互作用检测实验装置 ,并以蓖麻毒素和羊抗小鼠抗体为样本进行了实验。实验表明 :检测灵敏度高 ;在整个光路中 ,P光与S光完全重合 ,满足共光路原则 ,对空气折射率和其它各种扰动具有很好的自适应性 ,检测稳定性好 ;激光稳频精度可达 3.5× 10 - 10 ,与光强检测法相比 ,检测可靠性更高。 展开更多
关键词 横向塞曼激光器 等离子体共振 相位检测 生物分子相互作用
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用于将DNA疫苗在体导入表皮细胞的微弹加速技术
12
作者 余兴龙 张锡文 +2 位作者 王媛 谢峻石 郝鹏飞 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第3期19-24,共6页
分析了将裹着DNA疫苗的微弹射入表皮细胞技术的现状 ,提出了基于两阶段引射器加速微弹的方法 ,进行了数值模拟 ,得到了不同工况下第二级喷嘴的马赫数等值线、出口截面上的静压、轴线上的速度以及在负压孔产生的负压等分布。在此基础上 ... 分析了将裹着DNA疫苗的微弹射入表皮细胞技术的现状 ,提出了基于两阶段引射器加速微弹的方法 ,进行了数值模拟 ,得到了不同工况下第二级喷嘴的马赫数等值线、出口截面上的静压、轴线上的速度以及在负压孔产生的负压等分布。在此基础上 ,进行了实验研究 ,测得了外流场的压力、微弹速度和负压孔的负压值。同时 ,还观察了钨微弹的实际分布 ,并以钨粉为微弹射击鸡皮。结果表明 ,模拟数据与测量结果一致性好 ,数值模拟可以指导仪器设计和实际操作 ;微弹分布均匀 ,能射入表皮细胞 ,还可穿透表皮 。 展开更多
关键词 DNA疫苗 基因枪 微弹加速 二阶段引射器 表皮细胞
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基于SPR原理的生物分子相互作用光强法检测技术
13
作者 余兴龙 王浩娟 +1 位作者 赵乐群 朱圣庚 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第z1期-,共4页
本文简述了表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,简称SPR)原理、激发表面等离子体共振的条件和共振发生时反射光的光强变化,对角度扫描法和波长扫描法进行了分析。接着,基于角度扫描的光强检测,以半导体激光器为光源,建立... 本文简述了表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,简称SPR)原理、激发表面等离子体共振的条件和共振发生时反射光的光强变化,对角度扫描法和波长扫描法进行了分析。接着,基于角度扫描的光强检测,以半导体激光器为光源,建立了生物分子相互作用检测实验装置,并在模拟分析的基础上以蓖麻毒素与其单克隆抗体为样本进行了实验。实验表明,实验系统结构简单,可以实时监测生物分子间的相互作用过程,对样本无需进行标记,操作简便。 展开更多
关键词 光强检测 表面等离子体共振(SPR) 生物分子相互作用 角度扫描 动力学分析
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纳米生物学的研究进展及其应用前景
14
作者 余兴龙 贾惠波 朱圣庚 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1995年第S1期92-97,共6页
纳米生物学是在纳米科技问世后出现的,是纳米科技的重要组成部分。本文简述了纳米生物学的研究内容,详细叙述了纳米生物学的研究进展,同时还展望了纳米生物学的应用前景。
关键词 纳米生物学 研究进展 纳米科技 自组装 动态特性 纳米结构 应用前景 研究人员 生物学原理 蛋白质
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用于单个生物分子分析的纳米操作和纳米测量技术
15
作者 余兴龙 王佳 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期94-97,共4页
本文叙述了用于单个生物分子分析的纳米操作和纳米测量技术。光镊子能镊住大分子,按照测量要求进行操作。近场光学扫描显微术是结构生物学的重要研究手段,可以测量大分子的结构。分子马达力学特性测量技术的出现是分子马达研究的新突... 本文叙述了用于单个生物分子分析的纳米操作和纳米测量技术。光镊子能镊住大分子,按照测量要求进行操作。近场光学扫描显微术是结构生物学的重要研究手段,可以测量大分子的结构。分子马达力学特性测量技术的出现是分子马达研究的新突破,能测出单个分子马达的力学参数。 展开更多
关键词 测量技术 生物分子 光镊子 分子马达 纳米 力学特性 声光调制器 光电倍增管 压电陶瓷驱动器 扫描显微术
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香菇多糖和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能调节的研究 被引量:66
16
作者 颜爱 李波 +2 位作者 李润成 喻凯 余兴龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期999-1001,1005,共4页
目的:研究香菇和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:通过检测环磷酰胺免疫抑制模型小鼠的迟发型变态反应程度(DTH,足跖增厚法)、脏器指数、NK细胞活性(乳酸脱氢酶释放法)、淋巴细胞增殖能力(MTT试验)以及IL-2、IL-4、IL-1... 目的:研究香菇和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:通过检测环磷酰胺免疫抑制模型小鼠的迟发型变态反应程度(DTH,足跖增厚法)、脏器指数、NK细胞活性(乳酸脱氢酶释放法)、淋巴细胞增殖能力(MTT试验)以及IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ水平变化(ELISA试剂盒)来评价香菇和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果:实验表明,环磷酰胺能显著抑制正常小鼠DTH程度、NK细胞活性及细胞因子分泌水平(均为P<0.05);香菇和黄芪两种多糖能显著恢复DTH程度(P<0.05),极显著增高NK细胞包活性(P<0.01),同时能提高血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的含量。结论:香菇及黄芪多糖对免疫抑制小鼠具有显著的免疫功能恢复效果;香菇多糖的免疫调节效应明显优于黄芪多糖。 展开更多
关键词 免疫调节 黄芪多糖(APS) 香菇多糖(LNT) Th1 Th2免疫平衡
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我国猪瘟的流行病学现状分析 被引量:74
17
作者 吕宗吉 涂长春 +4 位作者 余兴龙 吴健敏 李月红 马刚 张茂林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期300-303,共4页
根据调查、收集的猪瘟 (CSF)临床与流行病学资料 ,分析了全国 16个省市自治区 48个发病猪场 (疫点 )的流行状况。调查结果表明 ,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主 ,发病多见于 3月龄以下的仔猪 ,发病率与死亡率普遍... 根据调查、收集的猪瘟 (CSF)临床与流行病学资料 ,分析了全国 16个省市自治区 48个发病猪场 (疫点 )的流行状况。调查结果表明 ,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主 ,发病多见于 3月龄以下的仔猪 ,发病率与死亡率普遍较高 ,流行规模以局部流行为主 ,同一猪场中育肥猪与种猪的发病率很低。但母猪多呈隐性感染 ,部分感染母猪表现出繁殖障碍 ,因此认为隐性感染母猪可能是仔猪感染的重要传染源。在某些地区 ,仍然流行着高发病率和致死率的急性、典型CSF。所调查的猪群具有较高防疫注射密度 ,但仍有CSF发生 ,可能表明猪群的免疫水平不高。 展开更多
关键词 中国 猪瘟 流行病学
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应用DNA疫苗制备猪瘟病毒单克隆抗体的研究 被引量:13
18
作者 李作生 余兴龙 +5 位作者 李敏 马刚 马丛林 李红卫 涂长春 殷震 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期76-77,共2页
关键词 DNA疫苗 CSFV E2基因 单克隆抗体 猪瘟病毒 制备
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副猪嗜血杆菌的分离与鉴定及其16S rRNA生物信息学分析 被引量:18
19
作者 朱小宁 余兴龙 +7 位作者 李润成 颜运秋 刘俊琦 罗维 杨大为 葛猛 王亚 李薇 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期517-520,共4页
从湖南省内送检的疑似患多发性浆膜炎与关节炎的猪病料中分离到12株细菌,细菌学试验证明12株细菌均符合副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)形态、培养和生化特性.根据HPS16SrRNA序列设计引物对12株细菌进行PCR扩增,均得到预期目的... 从湖南省内送检的疑似患多发性浆膜炎与关节炎的猪病料中分离到12株细菌,细菌学试验证明12株细菌均符合副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)形态、培养和生化特性.根据HPS16SrRNA序列设计引物对12株细菌进行PCR扩增,均得到预期目的条带,将扩增片段测序并运用DNAStar软件与GenBank中不同血清型HPS基因序列进行比对,表明其与Genbank中已公布的不同血清型HPS菌株16SrRNA序列的同源性为90.4%~99.9%,其中与血清5型同源性最高,对所测序列与参考序列进行遗传进化树分析,结果表明其中11株属于血清5型HPS. 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 分离鉴定 16S RRNA 序列分析
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猪瘟病毒E2糖蛋白抗原表位的预测、多肽合成及特性研究 被引量:10
20
作者 刘思国 马刚 +2 位作者 余兴龙 张茂林 涂长春 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期448-450,453,共4页
目的 :研究CSFVE2蛋白免疫原性肽的生物学特性。方法 :应用计算机分析软件对猪瘟病毒E2糖蛋白的抗原表位进行了预测 ,结合E2基因的变异分析 ,人工合成了两条多肽 (Pep1和Pep2 )序列 ,与抗mE2蛋白的兔血清和抗mE2的 8株单抗进行反应 ,并... 目的 :研究CSFVE2蛋白免疫原性肽的生物学特性。方法 :应用计算机分析软件对猪瘟病毒E2糖蛋白的抗原表位进行了预测 ,结合E2基因的变异分析 ,人工合成了两条多肽 (Pep1和Pep2 )序列 ,与抗mE2蛋白的兔血清和抗mE2的 8株单抗进行反应 ,并将两条多肽分别与载体蛋白 (BSA)进行偶联和免疫家兔。结果 :两条多肽均与兔的抗血清及单抗A11反应 ;多肽Pep2与单抗D5和D8反应。多肽Pep1与BSA载体蛋白偶联 (Pep1 BSA) ,免疫家兔后能够产生针对多肽Pep1的抗体。结论 :两条多肽Pep1和Pep2中 。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2糖蛋白 抗原表位 预测 多肽合成 生物学特性
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