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猪细小病毒病(PPV_(S-1)株)灭活疫苗不同佐剂的比较试验 被引量:1
1
作者 赵本进 林鸷 +2 位作者 李嘉皓 何锡忠 彭丽英 《国外畜牧学(猪与禽)》 2024年第5期33-36,共4页
本研究分别用铝胶佐剂和ISA201佐剂配制的猪细小病毒病灭活疫苗来免疫乳鼠,乳鼠免疫后表现正常,无死亡;5倍剂量免疫仔猪后,免疫猪未出现不良反应;随后检测免疫14、21、30、60、90、120、150、180、210d时的抗体水平。结果显示,用ISA201... 本研究分别用铝胶佐剂和ISA201佐剂配制的猪细小病毒病灭活疫苗来免疫乳鼠,乳鼠免疫后表现正常,无死亡;5倍剂量免疫仔猪后,免疫猪未出现不良反应;随后检测免疫14、21、30、60、90、120、150、180、210d时的抗体水平。结果显示,用ISA201佐剂配制的灭活疫苗免疫猪后免疫期可达6个月,用铝胶佐剂配制的灭活疫苗免疫猪后免疫期可达5个月。综合试验结果,建议选择用ISA 201佐剂作为猪细小病毒病灭活疫苗的佐剂。 展开更多
关键词 ISA 201佐剂 铝胶佐剂 佐剂吸收 不良反应 抗体效价
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用微载体系统培养PK15细胞生产猪圆环病毒2型 被引量:10
2
作者 何锡忠 李春华 +2 位作者 倪建平 蒋风英 邹勇 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期149-151,共3页
研究了生物反应器、转瓶、方瓶3种不同培养系统生产PCV2,对转瓶不同参数下的病毒效价情况进行了比较和优化,最终确定培养参数为:以1:10稀释种毒后接种、接种24 h的PK15细胞、5~7 mg/mL微载体浓度和维持液低糖DMEM+2 g/L水解乳蛋白(LH)... 研究了生物反应器、转瓶、方瓶3种不同培养系统生产PCV2,对转瓶不同参数下的病毒效价情况进行了比较和优化,最终确定培养参数为:以1:10稀释种毒后接种、接种24 h的PK15细胞、5~7 mg/mL微载体浓度和维持液低糖DMEM+2 g/L水解乳蛋白(LH)的培养方式效果最为理想;采用微载体和反应器系统生产PCV2,病毒效价可达10^(5.0)TCID_(50)/mL以上。 展开更多
关键词 PCV2 微载体培养 滴度 培养条件
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微载体培养PK-15细胞试验条件的优化 被引量:6
3
作者 何锡忠 李春华 +2 位作者 倪建平 蒋风英 邹勇 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第8期20-23,共4页
为了优化PK-15细胞在微载体上的生长条件,在微载体浓度5 mg/mL、低糖DMEM+100 mL/L NBS培养液条件下,观察4.5×104cells/mL和8.7×104cells/mL的细胞接种密度对细胞生长的影响;在低糖DMEM+100 mL/L NBS培养液、接种密度5×1... 为了优化PK-15细胞在微载体上的生长条件,在微载体浓度5 mg/mL、低糖DMEM+100 mL/L NBS培养液条件下,观察4.5×104cells/mL和8.7×104cells/mL的细胞接种密度对细胞生长的影响;在低糖DMEM+100 mL/L NBS培养液、接种密度5×104cells/mg条件下,观察3、5、10 mg/mL微载体浓度对细胞生长的影响;在3 mg/mL微载体浓度条件下、接种密度25×104cells/mL,观察MEM、高糖DMEM和低糖DMEM培养基对细胞生长的影响。结果表明,以微载体接种细胞密度4.5×104cells/mg、微载体浓度5 mg/mL在低糖DMEM培养基中培养方式效果最为理想。优化的培养工艺适用于PK-15细胞的生产。 展开更多
关键词 微载体培养 PK-15细胞 培养条件
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PEG-6000浓缩圆环病毒2型的研究 被引量:5
4
作者 何锡忠 王英 +2 位作者 蒋凤英 周宗清 邹勇 《上海农业学报》 CSCD 2008年第4期42-44,共3页
研究了PEG-6000浓缩圆环病毒2型的工艺,对PEG-6000浓度、浓缩时间和NaCl浓度进行了优化,最终参数分别为8%2、h和1%,最终沉淀效果分析表明不仅病毒沉降完全,而且沉淀杂蛋白含量低。
关键词 PEG-6000 浓缩 圆环病毒2型
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ST悬浮细胞培养猪伪狂犬病病毒工艺参数的优化 被引量:6
5
作者 何锡忠 林鸷 +1 位作者 赵本进 彭丽英 《中国动物检疫》 CAS 2021年第10期127-131,共5页
为优化ST悬浮细胞培养条件及其生产猪伪狂犬病病毒的工艺参数,对影响ST悬浮细胞生长的接种细胞初始密度、培养时间和摇瓶转速等工艺参数进行优化比较,对影响猪伪狂犬病病毒增殖的接种细胞初始密度、感染量和培养时间等条件进行优化。结... 为优化ST悬浮细胞培养条件及其生产猪伪狂犬病病毒的工艺参数,对影响ST悬浮细胞生长的接种细胞初始密度、培养时间和摇瓶转速等工艺参数进行优化比较,对影响猪伪狂犬病病毒增殖的接种细胞初始密度、感染量和培养时间等条件进行优化。结果显示:接种细胞初始密度1.00×10^(6)cells/mL、摇瓶转速140 r/min、悬浮培养48 h时,细胞数量扩增了4倍且细胞活力高;猪伪狂犬病病毒接种时初始细胞密度2.00×10^(6)cells/mL、感染量MOI=1.0、培养60~72 h,毒价可达10^(9.00)TCID_(50)/mL。结果表明,优化后的培养工艺适用于摇瓶中ST悬浮细胞及猪伪狂犬病病毒的培养。本研究为获得高密度ST悬浮细胞和提高猪伪狂犬病病毒繁殖能力提供了试验依据。 展开更多
关键词 悬浮培养 ST细胞 猪伪狂犬病病毒 工艺优化
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猪圆环病毒2型培养方法的研究 被引量:2
6
作者 何锡忠 倪建平 +3 位作者 李春华 林鸷 潘洁 彭丽英 《上海农业学报》 CSCD 2017年第6期49-52,共4页
利用有限稀释法从含猪圆环病毒2型(PCV2)的PK15细胞中克隆得到1株含PCV2高感染比例的PK15-A8细胞株,初步研究了该克隆株中PCV2增殖的特性及稳定性。间接免疫荧光试验结果表明,将该克隆株在方瓶中静置培养连续传代40代后病毒滴度最高可达... 利用有限稀释法从含猪圆环病毒2型(PCV2)的PK15细胞中克隆得到1株含PCV2高感染比例的PK15-A8细胞株,初步研究了该克隆株中PCV2增殖的特性及稳定性。间接免疫荧光试验结果表明,将该克隆株在方瓶中静置培养连续传代40代后病毒滴度最高可达10^(7.5)TCID_(50)/mL,用生物反应器培养病毒滴度最高可达10^(8.0)TCID_(50)/mL以上。利用常规方瓶培养细胞方法,在37℃培养96h,收获得到猪圆环病毒2型病毒液。本研究结果为进一步开发高效价的PCV2全病毒灭活疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 细胞克隆 病毒培养
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ST贴壁细胞悬浮驯化及应用 被引量:2
7
作者 何锡忠 林鸷 +2 位作者 赵本进 朱永军 彭丽英 《中国动物检疫》 CAS 2022年第1期112-115,共4页
为将ST贴壁细胞通过自主驯化,使其能在ST-S细胞无血清培养基中悬浮生长且能稳定传代,在摇瓶中实现高密度生长,并应用于猪伪狂犬病毒(PRV)悬浮培养,经ST-A低血清培养基适应培养,对一株贴壁的ST细胞进行了无血清的全悬浮驯化,并将PRV在悬... 为将ST贴壁细胞通过自主驯化,使其能在ST-S细胞无血清培养基中悬浮生长且能稳定传代,在摇瓶中实现高密度生长,并应用于猪伪狂犬病毒(PRV)悬浮培养,经ST-A低血清培养基适应培养,对一株贴壁的ST细胞进行了无血清的全悬浮驯化,并将PRV在悬浮细胞中连续盲传培养。结果显示:ST悬浮细胞能在无血清培养基中传代,培养48 h至第3代后,所能达到的最终细胞密度为3.00×10^(6 )cells/mL以上;PRV连续培养至第5代,毒价可达到109.0 TCID50/mL。结果表明,用专用培养基可使ST贴壁细胞实现悬浮驯化,并可应用于PRV悬浮培养。本研究为获得高密度ST悬浮细胞和提高PRV增殖效率奠定了技术基础。 展开更多
关键词 ST贴壁细胞 驯化 悬浮培养 猪伪狂犬病毒
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猪圆环病毒病及其防制 被引量:2
8
作者 何锡忠 邹勇 +1 位作者 苏万国 钱永清 《养猪》 2004年第3期37-39,共3页
关键词 猪圆环病毒病 PCV 发病机制 传播途径 流行病学 防治
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应用生物反应器培养ST细胞制备猪传染性胃肠炎病毒 被引量:2
9
作者 何锡忠 李春华 +6 位作者 潘洁 张婉华 彭丽英 倪建平 张春玲 蒋凤英 徐伟林 《国外畜牧学(猪与禽)》 2014年第6期48-50,共3页
通过生物反应器制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),研究了感染复数(MOI)、微载体浓度、病毒感染时间(TOI)和病毒维持液对病毒效价的影响,结果表明,分别以1:500稀释种毒(8.0 LgTCID50/mL)后接种、接种72 h的ST细胞、5 mg/mL微载体浓度和维持... 通过生物反应器制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),研究了感染复数(MOI)、微载体浓度、病毒感染时间(TOI)和病毒维持液对病毒效价的影响,结果表明,分别以1:500稀释种毒(8.0 LgTCID50/mL)后接种、接种72 h的ST细胞、5 mg/mL微载体浓度和维持液低糖DMEM+0.2%水解乳蛋白(LH)的参数培养方式效果最为理想。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 参数 ST细胞 生物反应器
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猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪安全性及繁殖性能的影响 被引量:1
10
作者 何锡忠 林鸷 +1 位作者 朱永军 彭丽英 《国外畜牧学(猪与禽)》 2021年第5期32-35,共4页
为了确定猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪的安全性及繁殖性能的影响,本研究选用3批疫苗对怀孕母猪进行一次单剂量接种、单剂量重复接种及一次超剂量接种的试验。结果显示,肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)后,母猪接种... 为了确定猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪的安全性及繁殖性能的影响,本研究选用3批疫苗对怀孕母猪进行一次单剂量接种、单剂量重复接种及一次超剂量接种的试验。结果显示,肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)后,母猪接种部位及全身无不良反应,母猪健康,妊娠正常,无死胎和木乃伊胎,新生仔猪生长发育良好。试验表明,自主研制的猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪安全,对怀孕母猪繁殖性能无影响。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 灭活疫苗 安全性试验 繁殖性能
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猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验
11
作者 何锡忠 李春华 +4 位作者 彭丽英 林鸷 潘洁 赵本进 倪建平 《上海畜牧兽医通讯》 2017年第1期42-43,共2页
猪圆环病毒病(Porcineeircovirusdiseases,PCVDs)是由猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV2)引发的一种猪传染性疾病。一旦PCV2感染猪后具有免疫抑制特性,能够干扰其它疫苗的免疫效果。近几年我国猪场的PC耽感染已相当普... 猪圆环病毒病(Porcineeircovirusdiseases,PCVDs)是由猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV2)引发的一种猪传染性疾病。一旦PCV2感染猪后具有免疫抑制特性,能够干扰其它疫苗的免疫效果。近几年我国猪场的PC耽感染已相当普遍,个别猪场猪圆环病毒2型抗体阳性率可达100%。防控PCV2主要有效的手段是接种圆环病毒病疫苗。当前我国市场上有多种类型的圆环病毒病疫苗,猪群免疫后免疫效果参差不齐;为了评估上海佳牧生物制品有限公司研制的圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果,现进行以下试验: 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 疫苗免疫 效果试验 灭活疫苗 猪圆环病毒病 PCV2 免疫效果 传染性疾病
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猪圆环病毒2型PK15细胞适应株的培养特性
12
作者 何锡忠 谢巧 +2 位作者 邹勇 李春华 倪建平 《上海畜牧兽医通讯》 2010年第2期34-35,共2页
关键词 猪圆环病毒2型 PK15细胞 培养特性 猪断奶后多系统衰竭综合征 增生性坏死性肺炎 肾病综合征 世界范围 养猪生产
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鸡传染性法氏囊病三价与单价活疫苗的效力比较试验
13
作者 何锡忠 邹勇 +3 位作者 苏万国 唐永兰 钱永清 曹向英 《上海畜牧兽医通讯》 2004年第4期22-22,共1页
关键词 传染性法氏囊病 三价活疫苗 单价活疫苗 免疫效力
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猪圆环病毒2型灭活疫苗安全性及免疫效力的评价
14
作者 何锡忠 赵本进 +4 位作者 林鸷 朱永军 李嘉皓 丁卫星 彭丽英 《国外畜牧学(猪与禽)》 2022年第2期30-34,共5页
为了对制备的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)灭活疫苗进行安全性及免疫效力的评价,本试验将3批次猪圆环病毒2型灭活疫苗以2倍剂量接种PCV2阴性仔猪后,进行了安全性分析抗体检测和攻毒试验。结果显示:3批次疫苗以2倍剂... 为了对制备的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)灭活疫苗进行安全性及免疫效力的评价,本试验将3批次猪圆环病毒2型灭活疫苗以2倍剂量接种PCV2阴性仔猪后,进行了安全性分析抗体检测和攻毒试验。结果显示:3批次疫苗以2倍剂量接种仔猪后,仔猪均无异常临床反应,可达到1∶1600以上,而攻毒对照组及空白对照组仔猪的抗体水平均在1∶400以下;攻毒后免疫组可以达到100%保护,攻毒对照组出现100%发病。结果表明,所制备的猪圆环病毒2型灭活疫苗对仔猪不仅安全性好,而且可以为仔猪提供有效的保护,为疫苗推广奠定了重要基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型灭活疫苗 安全性 免疫效力
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国产与进口DMEM培养ST细胞及应用效果比较
15
作者 何锡忠 李嘉皓 +3 位作者 林鸷 赵本进 朱永军 彭丽英 《国外畜牧学(猪与禽)》 2022年第4期30-32,33,共4页
为比较国产与进口达尔伯克改良伊格尔培养基(dulbecco's modified eagle's medium,DMEM)培养猪睾丸(swine testis,ST)贴壁细胞和培养猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和猪传染性胃... 为比较国产与进口达尔伯克改良伊格尔培养基(dulbecco's modified eagle's medium,DMEM)培养猪睾丸(swine testis,ST)贴壁细胞和培养猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的效果,本试验采用国产与进口DMEM培养同批ST细胞,连续传代10代,并分别接种培养PPV、PRV和TGEV。结果显示,用国产DMEM培养ST细胞72 h后,连续10代细胞的密度均达到1.25×10^(6)个/mL以上,细胞增殖达5倍以上,与进口DMEM培养结果相似,两者无显著差异(P>0.05);两种培养基培养同一病毒的滴度相近,两者无显著差异(P>0.05)。试验表明,国产DMEM能达到进口培养基的培养水平,为国产DMEM替代进口DMEM来大规模培养PRV、PPV和TGEV等提供了科学依据。 展开更多
关键词 ST细胞 国产与进口DMEM 培养
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猪伪狂犬病灭活疫苗(PRV_(SX)-gE株)对新生仔猪安全性的初步研究
16
作者 何锡忠 林鸷 彭丽英 《上海畜牧兽医通讯》 2021年第6期20-21,共2页
为了证实自主研制的猪伪狂犬病病毒gE基因缺失灭活疫苗(PRV_(SX)-gE株)免疫新生仔猪的安全性,对新生仔猪(非使用日龄靶动物)进行1次单剂量肌内接种实验。结果显示:3批PRV_(SX)-gE株疫苗(批号为2017001、2017002、2018001)肌内接种3~5日... 为了证实自主研制的猪伪狂犬病病毒gE基因缺失灭活疫苗(PRV_(SX)-gE株)免疫新生仔猪的安全性,对新生仔猪(非使用日龄靶动物)进行1次单剂量肌内接种实验。结果显示:3批PRV_(SX)-gE株疫苗(批号为2017001、2017002、2018001)肌内接种3~5日龄仔猪后,仔猪接种部位及全身未见明显症状,体温正常,精神状态良好,饮食正常,被毛顺滑、有光泽。实验结果初步证明:利用PRV_(SX)-gE株疫苗免疫新生仔猪(非使用日龄靶动物)是安全的。 展开更多
关键词 新生仔猪 猪伪狂犬病病毒gE基因缺失灭活疫苗 肌内注射 安全实验
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猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒三联苗免疫试验 被引量:23
17
作者 邹勇 许宝华 +4 位作者 钱永清 唐永兰 苏万国 何锡忠 周艺萍 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期107-109,共3页
本研究采用猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和轮状病毒细胞培养物制备了三联灭活疫苗,实验室免疫结果表明,肉猪和妊娠母猪免疫后 15d达到较高的免疫水平,免疫有效期超过 6个月。妊娠母猪所产仔猪可获得高水平的被动免疫保护。试... 本研究采用猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和轮状病毒细胞培养物制备了三联灭活疫苗,实验室免疫结果表明,肉猪和妊娠母猪免疫后 15d达到较高的免疫水平,免疫有效期超过 6个月。妊娠母猪所产仔猪可获得高水平的被动免疫保护。试验场应用结果表明母猪保护率达 98%,仔猪被动免疫保护达 93%。 展开更多
关键词 流行性腹泻 病毒 疫苗
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猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒RT-PCR鉴别诊断技术研究 被引量:20
18
作者 邹勇 钱永清 +2 位作者 唐永兰 苏万国 何锡忠 《上海农业学报》 CSCD 2003年第2期82-84,共3页
分别设计了三对引物对猪流行性腹泻病毒 (PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV )和猪轮状病毒(RV)的RNA进行RT PCR ,结果其扩增产物的目的条带分别为 :199bp、886bp、3 42bp ,证明对引起猪病毒性腹泻的最主要的三种病毒用RT PCR方法 ,可在... 分别设计了三对引物对猪流行性腹泻病毒 (PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV )和猪轮状病毒(RV)的RNA进行RT PCR ,结果其扩增产物的目的条带分别为 :199bp、886bp、3 42bp ,证明对引起猪病毒性腹泻的最主要的三种病毒用RT PCR方法 ,可在 3h作出内快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 流行性腹泻 传染性胃肠炎 轮状病毒 RT-PCR鉴别 诊断技术
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PCR和IFA测定猪圆环病毒2型半数细胞培养感染量的比较 被引量:6
19
作者 王林山 尹燕博 +5 位作者 邹勇 何锡忠 韩芳婷 倪建平 赵本进 李春华 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期34-38,共5页
采用聚合酶链式反应(PCR)和间接免疫荧光法(IFA)测定PCV2 SN07-1 2株的半数细胞培养感染量(TCID_(50)),初步比较两种方法测定病毒滴度的差异。参照Reed-Muench法计算TCID_(50),并采用荧光定量PCR(Real-time PCR)法对试验结果进行验证。... 采用聚合酶链式反应(PCR)和间接免疫荧光法(IFA)测定PCV2 SN07-1 2株的半数细胞培养感染量(TCID_(50)),初步比较两种方法测定病毒滴度的差异。参照Reed-Muench法计算TCID_(50),并采用荧光定量PCR(Real-time PCR)法对试验结果进行验证。对于同一病毒样品,IFA法测出的TCID_(50)为10^(6.5)/mL,PCR法测出的TCID_(50)为10^(5.0)/mL,结果表明:IFA法比PCR法更敏感,更适宜用于测定PCV2的效价。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 间接免疫荧光 聚合酶链式反应 半数细胞培养感染量
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猪传染性胃肠炎病毒纯化方法的选择与优化 被引量:3
20
作者 蒋凤英 邹勇 +4 位作者 何锡忠 李春华 张春玲 王英 许宝华 《江西农业学报》 CAS 2010年第8期129-131,共3页
利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行检测,并对最佳纯化方法进行优化。3种纯化方法获得的蛋白浓度... 利用超速离心、饱和硫酸铵、聚乙二醇-6000(PEG-6000)对猪传染性胃肠炎细胞毒进行纯化,收集纯化病毒测定蛋白含量,分别运用PCR方法和作为ELISA包被抗原方法对纯化的效果进行检测,并对最佳纯化方法进行优化。3种纯化方法获得的蛋白浓度分别为1.875、6.435、0.763 mg/mL。PCR检测结果显示PEG-6000纯化后在上清液中未检出病毒,其余2种上清中均检出病毒。3种纯化方法制备的包被抗原ELISA试验阴阳性比值(P/N)分别为2.21、1.27、2.25,最终选择PEG-6000作为纯化病毒的方法,其最佳优化参数为PEG-6000浓度8%、浓缩时间2 h、NaCl浓度1%。研究表明利用PEG-6000纯化TGEV是一种经济实用、操作简单、并有较高纯化效率的方法,纯化后的TGEV为后续建立特异、敏感、快速的ELISA检测方法奠定了良好基础。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 纯化方法 纯化病毒 包被抗原 ELISA试验 蛋白浓度 ELISA检测 饱和硫酸铵 优化参数 浓缩时间 聚乙二醇 经济实用 检测结果 蛋白含量 超速离心 TGEV PCR方法 阴阳性 细胞毒 上清液
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