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化脓隐秘杆菌间接免疫荧光方法的建立及应用
被引量:
2
1
作者
刘威
何深宏
+5 位作者
任绍科
李小燕
杨雪芬
程方俊
周作勇
曹立亭
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期230-235,共6页
通过制备兔抗化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)高免血清,筛选固定方法、封闭液、洗涤液、抗体稀释度、抗体孵育时间等应用条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌的间接免疫荧光方法。结果表明:用冷丙酮作固定剂,10%山羊血清作封闭液,0.05%Tw...
通过制备兔抗化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)高免血清,筛选固定方法、封闭液、洗涤液、抗体稀释度、抗体孵育时间等应用条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌的间接免疫荧光方法。结果表明:用冷丙酮作固定剂,10%山羊血清作封闭液,0.05%Tween–20的0.01 mol/L pH 7.4 PBS(磷酸缓冲盐溶液)作洗涤液,兔抗化脓隐秘杆菌高免血清(一抗)1∶50稀释,37℃作用2 h,羊抗兔FITC(二抗)1∶100稀释,37℃作用2 h,草酸铵结晶紫衬染菌体3 min,对纯培养物化脓隐秘杆菌检测,可见清晰的特异性荧光,能区分溶血隐秘杆菌、伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、猪链球菌;在人工感染化脓隐秘杆菌死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及发病山羊临床病料中均能检出化脓隐秘杆菌。
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关键词
山羊
小鼠
化脓隐秘杆菌
高免血清
间接免疫荧光方法
特异性
灵敏度
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职称材料
题名
化脓隐秘杆菌间接免疫荧光方法的建立及应用
被引量:
2
1
作者
刘威
何深宏
任绍科
李小燕
杨雪芬
程方俊
周作勇
曹立亭
机构
西南大学动物科学学院
重庆市兽医科学工程研究中心
出处
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期230-235,共6页
基金
国家重点研发计划项目(2018YFD0501705)
“十二五”国家科技支撑计划项目(2011BAD36B00)
重庆市留学人员回国创业创新支持计划项目(CX2017103)。
文摘
通过制备兔抗化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)高免血清,筛选固定方法、封闭液、洗涤液、抗体稀释度、抗体孵育时间等应用条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌的间接免疫荧光方法。结果表明:用冷丙酮作固定剂,10%山羊血清作封闭液,0.05%Tween–20的0.01 mol/L pH 7.4 PBS(磷酸缓冲盐溶液)作洗涤液,兔抗化脓隐秘杆菌高免血清(一抗)1∶50稀释,37℃作用2 h,羊抗兔FITC(二抗)1∶100稀释,37℃作用2 h,草酸铵结晶紫衬染菌体3 min,对纯培养物化脓隐秘杆菌检测,可见清晰的特异性荧光,能区分溶血隐秘杆菌、伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、猪链球菌;在人工感染化脓隐秘杆菌死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及发病山羊临床病料中均能检出化脓隐秘杆菌。
关键词
山羊
小鼠
化脓隐秘杆菌
高免血清
间接免疫荧光方法
特异性
灵敏度
Keywords
goat
mouse
Trueperella pyogenes
high immune serum
indirect immunofluorescence assay
specificity
sensitivity
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
化脓隐秘杆菌间接免疫荧光方法的建立及应用
刘威
何深宏
任绍科
李小燕
杨雪芬
程方俊
周作勇
曹立亭
《湖南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
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