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变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶基因的原核表达
被引量：
2
1
作者
孙文敬
杨荔
+5 位作者
栾方
何小用
崔凤杰
王大明
钱静亚
齐向辉
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期66-72,共7页
采用降落聚合酶链式反应(touchdown polymerase chain reaction,TD-PCR)技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆了编码2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的基因kgu E。将目的基因与质粒pET-28a(+)重组后转入宿主表达菌中,...
采用降落聚合酶链式反应(touchdown polymerase chain reaction,TD-PCR)技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆了编码2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的基因kgu E。将目的基因与质粒pET-28a(+)重组后转入宿主表达菌中,获得了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kgu E。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个分子质量约为30.5 ku的融合蛋白,且该蛋白的Western-blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由256个氨基酸残基组成的分子质量为28.5 ku的亲水性蛋白,与恶臭假单胞菌的2-酮基葡萄糖酸差向异构酶在氨基酸序列上的一致性达78%,定位于细胞质中,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为40.62%、17.19%和42.19%。本研究结果为变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的功能研究提供了一定理论支持。
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关键词
变形假单胞菌
2-酮基葡萄糖酸差向异构酶
kgu
E基因
克隆
表达
生物信息学
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职称材料
变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克隆、表达及生物信息学分析
2
作者
何小用
王大明
+4 位作者
孙文敬
崔凤杰
钱静亚
齐向辉
余泗莲
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第16期10-16,共7页
采用聚合酶链式反应技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸激酶的全长基因kguK,并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kguK。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表...
采用聚合酶链式反应技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸激酶的全长基因kguK,并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kguK。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个特异的分子质量约为36.0 ku融合蛋白,且该蛋白的Western-Blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由305个氨基酸残基组成的亲水性蛋白,定位于细胞质中,存在着与pfkB家族蛋白类似的保守结构域,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为35.73%、12.79%和51.48%。
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关键词
变形假单胞菌
2-酮基葡萄糖酸激酶
kguK基因
克隆
表达
生物信息学
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职称材料
题名
变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶基因的原核表达
被引量：
2
1
作者
孙文敬
杨荔
栾方
何小用
崔凤杰
王大明
钱静亚
齐向辉
机构
江苏大学食品与生物工程学院
百勤异VC钠有限公司
江南大学生物工程学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期66-72,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(31571885)
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA022103)
+3 种基金
江西省科技计划项目(赣知发[2015]64号)
江西省创新团队建设计划项目(20142BCB24024)
江西省科技平台建设计划项目(2010DTZ01900)
德兴市科技计划项目(德科发[2015]44号)
文摘
采用降落聚合酶链式反应(touchdown polymerase chain reaction,TD-PCR)技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆了编码2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的基因kgu E。将目的基因与质粒pET-28a(+)重组后转入宿主表达菌中,获得了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kgu E。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个分子质量约为30.5 ku的融合蛋白,且该蛋白的Western-blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由256个氨基酸残基组成的分子质量为28.5 ku的亲水性蛋白,与恶臭假单胞菌的2-酮基葡萄糖酸差向异构酶在氨基酸序列上的一致性达78%,定位于细胞质中,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为40.62%、17.19%和42.19%。本研究结果为变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶的功能研究提供了一定理论支持。
关键词
变形假单胞菌
2-酮基葡萄糖酸差向异构酶
kgu
E基因
克隆
表达
生物信息学
Keywords
Pseudomonas plecoglossicide
2-ketegluconate epimerase （KguE）
kguE gene
cloning
expression
bioinformatics
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克隆、表达及生物信息学分析
2
作者
何小用
王大明
孙文敬
崔凤杰
钱静亚
齐向辉
余泗莲
机构
江苏大学食品与生物工程学院
百勤异VC钠有限公司
江南大学生物工程学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第16期10-16,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(31571885)
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA022103)
+3 种基金
江西省科技计划项目(赣知发[2015]64号)
江西省创新团队建设计划项目(20142BCB24024)
江西省科技平台建设计划项目(2010DTZ01900)
德兴市科技计划项目(德科发[2015]44号)
文摘
采用聚合酶链式反应技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸激酶的全长基因kguK,并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kguK。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个特异的分子质量约为36.0 ku融合蛋白,且该蛋白的Western-Blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由305个氨基酸残基组成的亲水性蛋白,定位于细胞质中,存在着与pfkB家族蛋白类似的保守结构域,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为35.73%、12.79%和51.48%。
关键词
变形假单胞菌
2-酮基葡萄糖酸激酶
kguK基因
克隆
表达
生物信息学
Keywords
Pseudomonas plecoglossicida
2-ketegluconate kinase (KguK)
kguK gene
cloning
expression
bioinformatics
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸差向异构酶基因的原核表达
孙文敬
杨荔
栾方
何小用
崔凤杰
王大明
钱静亚
齐向辉
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
在线阅读
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职称材料
2
变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克隆、表达及生物信息学分析
何小用
王大明
孙文敬
崔凤杰
钱静亚
齐向辉
余泗莲
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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