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连翘多糖纳米硒的制备及体外抗氧化和降血糖能力
被引量：
5
1
作者
姚琳琳
任蕊蕊
+2 位作者
李菁岚
孙建瑞
王大红
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期2216-2222,2309,共8页
利用水提醇沉法从连翘中提取了连翘多糖(FP),经硝酸-亚硒酸钠法制备了连翘多糖纳米硒(FP-SeNPs),采用UV-Vis、FTIR、XRD和SEM对其进行了表征。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)、羟基自由基(·OH)、2,2-联氮-双(3-乙...
利用水提醇沉法从连翘中提取了连翘多糖(FP),经硝酸-亚硒酸钠法制备了连翘多糖纳米硒(FP-SeNPs),采用UV-Vis、FTIR、XRD和SEM对其进行了表征。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)、羟基自由基(·OH)、2,2-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(·ABTS^(+))清除实验考察了FP-SeNPs的体外抗氧化能力。采用α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性抑制实验考察了FP-SeNPs的体外降血糖能力。结果表明,FP-SeNPs中硒含量为908 mg/kg,其形成了颗粒状分布的表面结构,改变了多糖的表面形态,但未破坏多糖的基本结构。FP-SeNPs的UV-Vis吸收光谱在270 nm处出现新峰,其XRD谱图在2θ=20°~30°内出现一个弥散峰,表明FP和SeNPs之间存在相互作用,形成了FP-SeNPs复合物。FP-SeNPs对·DPPH、·OH和·ABTS^(+)的清除能力和对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的活性抑制能力均呈浓度依赖性,质量浓度为1.6 g/L的FP-SeNPs溶液对·DPPH、·OH和·ABTS^(+)的清除率分别为91.98%、56.81%和87.44%,对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的活性抑制率分别为55.61%和72.73%,显著高于FP的自由基清除能力和酶活性抑制能力(P<0.05)。
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关键词
连翘
多糖
纳米硒
表征
抗氧化活性
降血糖活性
中药现代化技术
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职称材料
分子改造提高谷氨酰胺转氨酶的催化活性
被引量：
5
2
作者
任蕊蕊
刘松
+2 位作者
李江华
堵国成
陈坚
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期9-14,共6页
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。为提高其催化活性,通过Discovery Studio 2017预测了Streptomyces mobaraense TGase中影响其与底物α-N-CBZ-GLN-GLY结合自由能的氨基酸位点,构建得到结合自...
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。为提高其催化活性,通过Discovery Studio 2017预测了Streptomyces mobaraense TGase中影响其与底物α-N-CBZ-GLN-GLY结合自由能的氨基酸位点,构建得到结合自由能下降的TGase突变体:Y24W、E300W和Y302R。与野生TGase相比,E300W的比酶活提高了31%; Km、kcat和kcat/Km值分别提高了10%、42%和29%,说明E300W比酶活的提高主要是由于酶转换数的增加。Y24W、E300W和Y302R的热稳定性均有不同程度下降。作用力分析发现,Y24W、E300W和Y302R主链-主链氢键分别减少1、2和4个。上述结果表明,基于蛋白质结合自由能分析的策略能迅速鉴定影响TGase催化活性关键氨基酸,进一步突变能有效提高其催化活性。
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关键词
谷氨酰胺转氨酶
解脂耶氏酵母
定点突变
高效表达
酶学性质
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职称材料
谷氨酰胺转氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表达
3
作者
任蕊蕊
刘松
+2 位作者
李江华
堵国成
陈坚
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期11-15,共5页
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis) pro-TGase为基因来源...
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis) pro-TGase为基因来源,重组解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica po1h)为研究对象,通过在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶识别位点(策略1)和共表达pro-TGase与谷氨酰胺转氨酶激活金属蛋白酶(TAMEP,策略2),使proTGase在Y. lipolytica中表达后被切除酶原区,而直接转化为活性TGase。摇瓶发酵结果显示,策略1和策略2构建得到的重组菌的TGase活力分别为5. 26 U/m L和6. 77 U/m L。酶学性质研究表明,策略1和策略2得到的重组菌的TGase比酶活、Km及kcat/Km均明显优于S. mobaraensis TGase。基于Y. lipolytica食品安全性,研究结果为TGase的工业化生产提供了新型高产菌种。
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关键词
谷氨酰胺转氨酶
YARROWIA
lipolytica
活性表达
蛋白酶识别位点
活化蛋白酶
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职称材料
题名
连翘多糖纳米硒的制备及体外抗氧化和降血糖能力
被引量：
5
1
作者
姚琳琳
任蕊蕊
李菁岚
孙建瑞
王大红
机构
河南科技大学食品与生物工程学院
河南省食品微生物工程技术研究中心
出处
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期2216-2222,2309,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31401672)
河南省青年人才托举工程项目(2021HYTP027)
河南省科技攻关项目(232102110134)。
文摘
利用水提醇沉法从连翘中提取了连翘多糖(FP),经硝酸-亚硒酸钠法制备了连翘多糖纳米硒(FP-SeNPs),采用UV-Vis、FTIR、XRD和SEM对其进行了表征。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)、羟基自由基(·OH)、2,2-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(·ABTS^(+))清除实验考察了FP-SeNPs的体外抗氧化能力。采用α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性抑制实验考察了FP-SeNPs的体外降血糖能力。结果表明,FP-SeNPs中硒含量为908 mg/kg,其形成了颗粒状分布的表面结构,改变了多糖的表面形态,但未破坏多糖的基本结构。FP-SeNPs的UV-Vis吸收光谱在270 nm处出现新峰,其XRD谱图在2θ=20°~30°内出现一个弥散峰,表明FP和SeNPs之间存在相互作用,形成了FP-SeNPs复合物。FP-SeNPs对·DPPH、·OH和·ABTS^(+)的清除能力和对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的活性抑制能力均呈浓度依赖性,质量浓度为1.6 g/L的FP-SeNPs溶液对·DPPH、·OH和·ABTS^(+)的清除率分别为91.98%、56.81%和87.44%,对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的活性抑制率分别为55.61%和72.73%,显著高于FP的自由基清除能力和酶活性抑制能力(P<0.05)。
关键词
连翘
多糖
纳米硒
表征
抗氧化活性
降血糖活性
中药现代化技术
Keywords
Forsythia suspensa
polysaccharides
nano-selenium
characterization
antioxidant activity
hypoglycemic activity
modernization technology of traditional Chinese medicines
分类号
R284.2 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
分子改造提高谷氨酰胺转氨酶的催化活性
被引量：
5
2
作者
任蕊蕊
刘松
李江华
堵国成
陈坚
机构
江南大学生物工程学院
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期9-14,共6页
基金
国家自然基金面上项目(31771913)
江苏省重点研发计划社会发展项目(BE2016629)
文摘
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。为提高其催化活性,通过Discovery Studio 2017预测了Streptomyces mobaraense TGase中影响其与底物α-N-CBZ-GLN-GLY结合自由能的氨基酸位点,构建得到结合自由能下降的TGase突变体:Y24W、E300W和Y302R。与野生TGase相比,E300W的比酶活提高了31%; Km、kcat和kcat/Km值分别提高了10%、42%和29%,说明E300W比酶活的提高主要是由于酶转换数的增加。Y24W、E300W和Y302R的热稳定性均有不同程度下降。作用力分析发现,Y24W、E300W和Y302R主链-主链氢键分别减少1、2和4个。上述结果表明,基于蛋白质结合自由能分析的策略能迅速鉴定影响TGase催化活性关键氨基酸,进一步突变能有效提高其催化活性。
关键词
谷氨酰胺转氨酶
解脂耶氏酵母
定点突变
高效表达
酶学性质
Keywords
transglutaminase
Yarrowia lipolytica
site-directed mutation
high level expression
enzymatic characteristics
分类号
TS201.25 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
谷氨酰胺转氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表达
3
作者
任蕊蕊
刘松
李江华
堵国成
陈坚
机构
江南大学生物工程学院
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期11-15,共5页
基金
国家自然基金面上项目(31771913)
江苏省重点研发计划社会发展项目(BE2016629)
文摘
谷氨酰胺转氨酶(EC2. 3. 2. 13,Transglutaminase,TGase)是一种重要的食品酶。基于N-端酶原区对折叠的重要影响,TGase通常以无活性的酶原(pro-TGase)形式在异源宿主中表达。以茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis) pro-TGase为基因来源,重组解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica po1h)为研究对象,通过在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶识别位点(策略1)和共表达pro-TGase与谷氨酰胺转氨酶激活金属蛋白酶(TAMEP,策略2),使proTGase在Y. lipolytica中表达后被切除酶原区,而直接转化为活性TGase。摇瓶发酵结果显示,策略1和策略2构建得到的重组菌的TGase活力分别为5. 26 U/m L和6. 77 U/m L。酶学性质研究表明,策略1和策略2得到的重组菌的TGase比酶活、Km及kcat/Km均明显优于S. mobaraensis TGase。基于Y. lipolytica食品安全性,研究结果为TGase的工业化生产提供了新型高产菌种。
关键词
谷氨酰胺转氨酶
YARROWIA
lipolytica
活性表达
蛋白酶识别位点
活化蛋白酶
Keywords
transglutaminase
Yarrowia lipolytica
activity expression
protease recognition site
activating protease
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
连翘多糖纳米硒的制备及体外抗氧化和降血糖能力
姚琳琳
任蕊蕊
李菁岚
孙建瑞
王大红
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2024
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
分子改造提高谷氨酰胺转氨酶的催化活性
任蕊蕊
刘松
李江华
堵国成
陈坚
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2018
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
谷氨酰胺转氨酶在Yarrowia lipolytica中的活性表达
任蕊蕊
刘松
李江华
堵国成
陈坚
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
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职称材料
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