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人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体的构建和表达
1
作者
李丙所
马龙洋
+3 位作者
周红兵
党军强
任彦顺
窦科峰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期493-494,共2页
目的:构建人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体pSectag2/scFv并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中获得表达。方法:利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv,用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体pSectag2,构建重组载...
目的:构建人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体pSectag2/scFv并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中获得表达。方法:利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv,用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体pSectag2,构建重组载体pSectag2/scFv,测序鉴定后,电转染CHO细胞,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况。结果:将750bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectag2,经DNA测序鉴定正确,成功构建了pSectag2/scFv。将pSectag2/scFv转染CHO细胞后获得目的蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot检测表明目的蛋白Mr约为34000。结论:成功地构建抗scFv真核表达载体pSectag2/scFv,并在CHO细胞中获得表达,为人源肝癌scFv的进一步的应用研究提供依据。
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关键词
肝癌
单链抗体
CHO细胞
基因表达
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题名
人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体的构建和表达
1
作者
李丙所
马龙洋
周红兵
党军强
任彦顺
窦科峰
机构
第四军医大学西京医院肝胆外科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期493-494,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571828)
文摘
目的:构建人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体pSectag2/scFv并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中获得表达。方法:利用噬菌体细胞内重组技术筛选得到了肝癌特异性scFv,用PCR技术及核酸内切酶技术将其克隆入真核表达载体pSectag2,构建重组载体pSectag2/scFv,测序鉴定后,电转染CHO细胞,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达情况。结果:将750bp人源肝癌scFv插入真核表达载体pSectag2,经DNA测序鉴定正确,成功构建了pSectag2/scFv。将pSectag2/scFv转染CHO细胞后获得目的蛋白表达。SDS-PAGE和Western blot检测表明目的蛋白Mr约为34000。结论:成功地构建抗scFv真核表达载体pSectag2/scFv,并在CHO细胞中获得表达,为人源肝癌scFv的进一步的应用研究提供依据。
关键词
肝癌
单链抗体
CHO细胞
基因表达
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源肝癌单链抗体(scFv)基因真核表达载体的构建和表达
李丙所
马龙洋
周红兵
党军强
任彦顺
窦科峰
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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