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藏獒犬IFNγ基因的克隆表达及其生物学活性测定
被引量：
3
1
作者
宋世斌
陈国华
+4 位作者
胡永浩
贾怀杰
何小兵
景志忠
仝保全
《畜牧兽医杂志》
2018年第5期1-4,7,共5页
通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆IFNγ全基因,其大小为501bp,编码167个氨基酸,前23个AA为信号肽,与GenBank上发表的犬IFNγ((NM001003174.1)比较,序列的同源性为99.4%。构建了原核表达载体pET-30a-IFNγ,转化BL2L...
通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆IFNγ全基因,其大小为501bp,编码167个氨基酸,前23个AA为信号肽,与GenBank上发表的犬IFNγ((NM001003174.1)比较,序列的同源性为99.4%。构建了原核表达载体pET-30a-IFNγ,转化BL2L,IPTG诱导后表达约23Kd的重组蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化后,纯度达90%以上;利用抑制病毒噬斑法测定重组藏獒犬γ干扰素的生物学活性,结果显示纯化的蛋白具有一定的抗病毒活性,本研究结果为进一步研究犬γ干扰素的抗病毒活性奠定基础。
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关键词
藏獒犬
IFNΓ
原核表达
活性测定
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职称材料
藏獒犬白介素18基因的克隆及原核表达
2
作者
宋世斌
胡永浩
+2 位作者
何强
敬淑燕
仝保全
《畜牧兽医杂志》
2018年第4期4-8,共5页
通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆白介素18基因全长,其大小为582bp,编码194个氨基酸。与GenBank上发表的犬IL-18(NM001003305)比较,序列的同源性为100%,与犬、猫、猪,牛、羊、人的IL-18基因核苷酸同源性分别为100%...
通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆白介素18基因全长,其大小为582bp,编码194个氨基酸。与GenBank上发表的犬IL-18(NM001003305)比较,序列的同源性为100%,与犬、猫、猪,牛、羊、人的IL-18基因核苷酸同源性分别为100%、91.2%、91.1%、88.5%、89.3%、84.4%。系统进化树可以看出,藏獒犬基因与犬的亲缘关系最近,与猫的其次,与人是较远的。然后构建-IL18去信号肽的原核表达载体pET-30a-IL18,转化BL2L,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达出25kd融合蛋白而且目的蛋白主要以包涵体的形式存在,westbloting验证表达的蛋白正确。
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关键词
藏獒犬
白介素18
原核表达
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职称材料
题名
藏獒犬IFNγ基因的克隆表达及其生物学活性测定
被引量：
3
1
作者
宋世斌
陈国华
胡永浩
贾怀杰
何小兵
景志忠
仝保全
机构
甘肃农业大学动物医学院
甘肃农业职业技术学院
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜与病原生物学国家重点实验室
兰州原生獒园
出处
《畜牧兽医杂志》
2018年第5期1-4,7,共5页
基金
甘肃省高等学校科研项目资助(2015A-195)
文摘
通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆IFNγ全基因,其大小为501bp,编码167个氨基酸,前23个AA为信号肽,与GenBank上发表的犬IFNγ((NM001003174.1)比较,序列的同源性为99.4%。构建了原核表达载体pET-30a-IFNγ,转化BL2L,IPTG诱导后表达约23Kd的重组蛋白,经镍琼脂糖凝胶层析柱纯化后,纯度达90%以上;利用抑制病毒噬斑法测定重组藏獒犬γ干扰素的生物学活性,结果显示纯化的蛋白具有一定的抗病毒活性,本研究结果为进一步研究犬γ干扰素的抗病毒活性奠定基础。
关键词
藏獒犬
IFNΓ
原核表达
活性测定
Keywords
Zangao Canine
IFNγ Prokaryotic Expression
activity evaluation
分类号
S813.1 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
藏獒犬白介素18基因的克隆及原核表达
2
作者
宋世斌
胡永浩
何强
敬淑燕
仝保全
机构
甘肃农业大学动物医学院
甘肃农业职业技术学院
兰州原生獒园
出处
《畜牧兽医杂志》
2018年第4期4-8,共5页
基金
甘肃省高等学校科研项目资助(2015A-195)
文摘
通过RT-PCR技术从刺激的藏獒犬外周血淋巴细胞中成功克隆白介素18基因全长,其大小为582bp,编码194个氨基酸。与GenBank上发表的犬IL-18(NM001003305)比较,序列的同源性为100%,与犬、猫、猪,牛、羊、人的IL-18基因核苷酸同源性分别为100%、91.2%、91.1%、88.5%、89.3%、84.4%。系统进化树可以看出,藏獒犬基因与犬的亲缘关系最近,与猫的其次,与人是较远的。然后构建-IL18去信号肽的原核表达载体pET-30a-IL18,转化BL2L,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达出25kd融合蛋白而且目的蛋白主要以包涵体的形式存在,westbloting验证表达的蛋白正确。
关键词
藏獒犬
白介素18
原核表达
Keywords
Zangao Canine
IL-18
Prokaryotic Expression
分类号
S852.41 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
藏獒犬IFNγ基因的克隆表达及其生物学活性测定
宋世斌
陈国华
胡永浩
贾怀杰
何小兵
景志忠
仝保全
《畜牧兽医杂志》
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
藏獒犬白介素18基因的克隆及原核表达
宋世斌
胡永浩
何强
敬淑燕
仝保全
《畜牧兽医杂志》
2018
0
在线阅读
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职称材料
已选择
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