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无血清培养基悬浮培养BHK21细胞驯化的研究 被引量:4
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作者 井莲娜 付智财 黄炯 《草食家畜》 2013年第3期51-56,共6页
本研究主要探索用常规BHK21贴壁细胞(F38)驯化为适应无血清培养基的全悬浮细胞的过程并使用生物反应器放大进行了相关研究。实验表明:常规BHK21细胞通过运用相应的商品化培养基进行低血清贴壁驯化、再到低血清全悬浮驯化、最后到无血清... 本研究主要探索用常规BHK21贴壁细胞(F38)驯化为适应无血清培养基的全悬浮细胞的过程并使用生物反应器放大进行了相关研究。实验表明:常规BHK21细胞通过运用相应的商品化培养基进行低血清贴壁驯化、再到低血清全悬浮驯化、最后到无血清全悬浮驯化,使细胞达到全悬浮的状态。经过四十代的传代后,细胞在无血清悬浮培养基中生长细胞数量可达3.0×106/mL以上,且形态较好,倍增时间稳定,活力在90%以上。实验中采用速降和缓降两种方法进行过渡驯化,结果表明,在贴壁状态下,细胞对缓降方式比速降方式适应性要好,细胞的形态较好,活力在90%以上。细胞从低血清悬浮到无血清悬浮过程中,两种过渡方式无明显差异,均经过了5~10代驯化,细胞就完全适应了无血清悬浮培养基。无血清悬浮细胞从液氮中复苏后,采用直线放大的形式从1.5 mL到250 mL再到5 L反应器最后到650 L反应器中生长。在培养参数方面进行了摸索,最终验证用直线放大的方法是可行的。细胞数量可达4.5×106/mL左右,细胞活力在90%以上,且细胞在放大过程中,形态良好,倍增时间稳定在18 h。 展开更多
关键词 无血清悬浮培养 BHK21 驯化
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冷藏保存BHK21细胞悬液及复苏试验 被引量:1
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作者 范田梅 井莲娜 +5 位作者 赵海源 王洪巧 付智财 赵晓英 马晓娇 杜久斌 《中国兽药杂志》 2010年第3期41-44,共4页
采用方瓶存放BHK21细胞悬液,在2℃~8℃冰箱存放不同时间后,按常规方法进行细胞复苏和传代。对比存放不同时间后细胞复苏时的驯化次数、细胞数量和细胞活力,寻求最佳存放时间和复苏代次以指导生产。同时将2℃~8℃冷藏保存方法与液... 采用方瓶存放BHK21细胞悬液,在2℃~8℃冰箱存放不同时间后,按常规方法进行细胞复苏和传代。对比存放不同时间后细胞复苏时的驯化次数、细胞数量和细胞活力,寻求最佳存放时间和复苏代次以指导生产。同时将2℃~8℃冷藏保存方法与液氮冻存细胞方法在细胞复苏周期和达到所需扩繁细胞数方面进行比较。结果表明,方瓶冷藏保存BHK21细胞悬液最长可存放60d,经2—5代驯化后,细胞形态和活力恢复正常,细胞数量与收悬液前细胞数量无显著差异,并能稳定传20代以上。与液氮冻存细胞方法相比,该方法在快速恢复细胞产量时有较大优势,在生产周期紧张的情况下可作为辅助方法保障细胞传代的延续。 展开更多
关键词 BHK21细胞悬液 保存时间 复苏
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管道化培养与常规转瓶培养BHK21细胞的比较与分析
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作者 范田梅 付智财 +3 位作者 赵海源 王洪巧 曹辉 钱立保 《广西畜牧兽医》 2015年第5期240-242,共3页
本试验在常规转瓶培养BHK21细胞的基础上,推出管道化培养BHK21细胞,旨在控制污染,提升产品质量。通过此工艺的革新,在降低细胞污染率和淘汰率、提高产品质量、提高工作效率和产能、降低劳动强度等方面均起到了很大的作用。给大规模动物... 本试验在常规转瓶培养BHK21细胞的基础上,推出管道化培养BHK21细胞,旨在控制污染,提升产品质量。通过此工艺的革新,在降低细胞污染率和淘汰率、提高产品质量、提高工作效率和产能、降低劳动强度等方面均起到了很大的作用。给大规模动物细胞培养提供了可靠的保障。 展开更多
关键词 BHK21细胞 管道化培养 转瓶培养
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