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鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物耐药性的调控机制
被引量:
4
1
作者
张临
卢芳
+5 位作者
付恒峰
姜西迪
魏祺灵
漆彩丽
高海侠
李琳
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期894-903,共10页
BaeSR是鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)中重要的双组分系统(two component system,TCS),通过调控下游靶基因的转录表达影响细菌的耐药性。本研究旨在探索BaeR过表达后,鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物(FQs)的耐药调控机制,寻...
BaeSR是鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)中重要的双组分系统(two component system,TCS),通过调控下游靶基因的转录表达影响细菌的耐药性。本研究旨在探索BaeR过表达后,鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物(FQs)的耐药调控机制,寻找BaeR潜在靶基因。首先表达BaeR蛋白并纯化与验证,选取从转录组学筛选到的与耐药相关的差异表达基因(包括ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR)作为BaeR潜在靶基因,结合LacZ报告基因融合试验及凝胶阻滞试验(EMSA)探究BaeSR对鼠伤寒沙门菌的耐药调控机制。结果显示:经纯化验证后,在28 ku处出现目的条带,表明BaeR蛋白成功表达。LacZ报告基因融合试验结果表明,BaeR过表达后可以正向调控ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR的表达。EMSA结果表明,BaeR蛋白可以直接结合到marR的启动子区,调控marR基因的表达。在鼠伤寒沙门菌中,BaeSR可以通过正向调控靶基因ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR的转录表达并直接调控marR的表达,从而影响菌株对FQs的耐药性。
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关键词
鼠伤寒沙门菌
BaeSR
耐药性
EMSA
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职称材料
baeR基因对沙门菌耐药相关蛋白表达及耐药基因的调控作用
2
作者
张严方
荣巧
+6 位作者
杨硕
檀蕾
刘志海
张临
卢芳
付恒峰
李琳
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2023年第7期1-11,共11页
【目的】探究baeR对鼠伤寒沙门菌耐药相关蛋白表达水平的影响以及对耐药基因的调控作用,为鼠伤寒沙门菌耐药性的深入研究提供理论依据。【方法】采用非标记定量蛋白质组学技术,以差异倍数(FC)≥1.5且P<0.05为标准,筛选鼠伤寒沙门菌b...
【目的】探究baeR对鼠伤寒沙门菌耐药相关蛋白表达水平的影响以及对耐药基因的调控作用,为鼠伤寒沙门菌耐药性的深入研究提供理论依据。【方法】采用非标记定量蛋白质组学技术,以差异倍数(FC)≥1.5且P<0.05为标准,筛选鼠伤寒沙门菌baeR和acrB双缺失CR株(鼠伤寒沙门菌ATCC13311体外诱导环丙沙星耐药株)(C1)、baeR过表达C1株(CA)和baeR回补株(CM)的差异表达蛋白,对筛选的差异蛋白进行GO富集和KEGG通路富集分析,探究差异蛋白的主要功能和涉及的生物过程;采用平行反应监测(PRM)蛋白质组学技术对筛选到的抗药相关差异蛋白CysP、GltI、ArgT、MdtA、OmpF、ArcA、FrdD、DcuB、TorR、UhpA、NarZ、PgtA、MraY、CheM、CheA、Trg进行验证;采用LacZ报告基因融合实验研究baeR对靶基因pmrF和mdtC的调控作用。【结果】CA/C1比较组中共筛选到393个差异蛋白,其中上调182个,下调211个;CM/C1比较组中共筛选到391个差异蛋白,其中上调202个,下调189个。差异表达蛋白主要集中在外排泵、外膜蛋白、生物膜、生物合成、双组分系统等通路。PRM验证结果定量到CysP、GltI、ArgT、OmpF、ArcA、DcuB、TorR、PgtA、CheM、CheA、Trg等11个蛋白,其表达水平变化趋势与非标记定量结果一致,证实了蛋白质组结果的可靠性。baeR可以正向调控pmrF和mdtC的表达。【结论】明确了baeR过表达对鼠伤寒沙门菌耐药相关蛋白水平的影响及对相关耐药基因的调控作用。
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关键词
鼠伤寒沙门菌
BAER
蛋白质组学
基因融合试验
耐药性
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职称材料
题名
鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物耐药性的调控机制
被引量:
4
1
作者
张临
卢芳
付恒峰
姜西迪
魏祺灵
漆彩丽
高海侠
李琳
机构
安徽农业大学动物科技学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第3期894-903,共10页
基金
国家自然科学基金(31772802)
安徽农业大学研究生创新基金(2020ysj-24)。
文摘
BaeSR是鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)中重要的双组分系统(two component system,TCS),通过调控下游靶基因的转录表达影响细菌的耐药性。本研究旨在探索BaeR过表达后,鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物(FQs)的耐药调控机制,寻找BaeR潜在靶基因。首先表达BaeR蛋白并纯化与验证,选取从转录组学筛选到的与耐药相关的差异表达基因(包括ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR)作为BaeR潜在靶基因,结合LacZ报告基因融合试验及凝胶阻滞试验(EMSA)探究BaeSR对鼠伤寒沙门菌的耐药调控机制。结果显示:经纯化验证后,在28 ku处出现目的条带,表明BaeR蛋白成功表达。LacZ报告基因融合试验结果表明,BaeR过表达后可以正向调控ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR的表达。EMSA结果表明,BaeR蛋白可以直接结合到marR的启动子区,调控marR基因的表达。在鼠伤寒沙门菌中,BaeSR可以通过正向调控靶基因ompW、sodB、tolC、mdtD、spy和marR的转录表达并直接调控marR的表达,从而影响菌株对FQs的耐药性。
关键词
鼠伤寒沙门菌
BaeSR
耐药性
EMSA
Keywords
Salmonella Typhimurium
BaeSR
drug resistance
EMSA
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
baeR基因对沙门菌耐药相关蛋白表达及耐药基因的调控作用
2
作者
张严方
荣巧
杨硕
檀蕾
刘志海
张临
卢芳
付恒峰
李琳
机构
安徽农业大学动物科技学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2023年第7期1-11,共11页
基金
国家自然科学基金项目“沙门菌双组分系统BaeSR的耐药调控机制”(31772802)
安徽省自然科学基金面上项目(2208085MC79)。
文摘
【目的】探究baeR对鼠伤寒沙门菌耐药相关蛋白表达水平的影响以及对耐药基因的调控作用,为鼠伤寒沙门菌耐药性的深入研究提供理论依据。【方法】采用非标记定量蛋白质组学技术,以差异倍数(FC)≥1.5且P<0.05为标准,筛选鼠伤寒沙门菌baeR和acrB双缺失CR株(鼠伤寒沙门菌ATCC13311体外诱导环丙沙星耐药株)(C1)、baeR过表达C1株(CA)和baeR回补株(CM)的差异表达蛋白,对筛选的差异蛋白进行GO富集和KEGG通路富集分析,探究差异蛋白的主要功能和涉及的生物过程;采用平行反应监测(PRM)蛋白质组学技术对筛选到的抗药相关差异蛋白CysP、GltI、ArgT、MdtA、OmpF、ArcA、FrdD、DcuB、TorR、UhpA、NarZ、PgtA、MraY、CheM、CheA、Trg进行验证;采用LacZ报告基因融合实验研究baeR对靶基因pmrF和mdtC的调控作用。【结果】CA/C1比较组中共筛选到393个差异蛋白,其中上调182个,下调211个;CM/C1比较组中共筛选到391个差异蛋白,其中上调202个,下调189个。差异表达蛋白主要集中在外排泵、外膜蛋白、生物膜、生物合成、双组分系统等通路。PRM验证结果定量到CysP、GltI、ArgT、OmpF、ArcA、DcuB、TorR、PgtA、CheM、CheA、Trg等11个蛋白,其表达水平变化趋势与非标记定量结果一致,证实了蛋白质组结果的可靠性。baeR可以正向调控pmrF和mdtC的表达。【结论】明确了baeR过表达对鼠伤寒沙门菌耐药相关蛋白水平的影响及对相关耐药基因的调控作用。
关键词
鼠伤寒沙门菌
BAER
蛋白质组学
基因融合试验
耐药性
Keywords
Salmonella typhimurium
baeR
proteomics
gene fusion experiment
drug resistance
分类号
S851.347102 [农业科学—预防兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼠伤寒沙门菌BaeSR对氟喹诺酮类药物耐药性的调控机制
张临
卢芳
付恒峰
姜西迪
魏祺灵
漆彩丽
高海侠
李琳
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
baeR基因对沙门菌耐药相关蛋白表达及耐药基因的调控作用
张严方
荣巧
杨硕
檀蕾
刘志海
张临
卢芳
付恒峰
李琳
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2023
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