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硫辛酸对体外培养的MC3T3-E1成骨细胞骨形成的影响
被引量：
9
1
作者
付卓栋
付超
+2 位作者
孙慧君
韩国柱
刘谟震
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
2016年第1期43-51,共9页
目的研究硫辛酸对体外培养的H2O2处理后的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响,并初步探讨硫辛酸促成骨细胞骨形成的作用机制。方法在体外培养的MC3T3-E1培养基中分别加入不同浓度（0.1、0.2和0.4 mmol/L）的硫辛酸作用20 h,接着加入1 m...
目的研究硫辛酸对体外培养的H2O2处理后的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响,并初步探讨硫辛酸促成骨细胞骨形成的作用机制。方法在体外培养的MC3T3-E1培养基中分别加入不同浓度（0.1、0.2和0.4 mmol/L）的硫辛酸作用20 h,接着加入1 mmol/L H2O2作用4 h,用MTT法检测药物对成骨细胞活力的影响;用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）,细胞丙二醛（malondialdehyde,MDA）,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）,乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测成骨细胞内ALP、SOD、LDH活性和MDA含量;用Von Kossa染色法检测矿化结节数目;用real time-PCR方法检测成骨细胞内Ⅰ型胶原（collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ）、骨钙素（osteocalcin,OCN）、转录因子Osterix、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）、NADPH氧化酶4（NADPH oxidase4,Nox4）、护骨素（osteoprotegerin,OPG）、细胞核因子κB受体活化因子配基（receptor activator nuclear factor-kappa B ligand,RANKL）mRNA表达,用流式细胞仪检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平。结果硫辛酸可增加ALP活力和矿化结节数目,促进骨形成相关指标COL-Ⅰ、Osterix、BMP-2和OCN mRNA表达（P〈0.05）;硫辛酸提高H2O2损伤后MC3T3-E1细胞活力,上调细胞内SOD活性并降低细胞中MDA含量和上清中LDH活性;硫辛酸上调MC3T3-E1细胞OPG/RANKL比值及下调ROS和Nox4 mRNA表达水平（P〈0.05）。结论硫辛酸在一定浓度范围内（0.1～0.4 mmol/L）促进H2O2处理后MC3T3-E1细胞的骨形成过程,这种促进作用是通过下调Nox4和ROS水平,降低氧化应激发挥抗氧化作用上调OPG/RANKL实现的。
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关键词
硫辛酸
MC3T3-E1细胞
抗氧化
骨质疏松
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职称材料
题名
硫辛酸对体外培养的MC3T3-E1成骨细胞骨形成的影响
被引量：
9
1
作者
付卓栋
付超
孙慧君
韩国柱
刘谟震
机构
大连医科大学附属第一医院骨科
大连医科大学药学院临床药理教研室
出处
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
2016年第1期43-51,共9页
基金
辽宁省教育厅项目(L2015147)
大连市科技局项目(2015E12SF162)
文摘
目的研究硫辛酸对体外培养的H2O2处理后的小鼠前成骨细胞MC3T3-E1骨形成的影响,并初步探讨硫辛酸促成骨细胞骨形成的作用机制。方法在体外培养的MC3T3-E1培养基中分别加入不同浓度（0.1、0.2和0.4 mmol/L）的硫辛酸作用20 h,接着加入1 mmol/L H2O2作用4 h,用MTT法检测药物对成骨细胞活力的影响;用碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）,细胞丙二醛（malondialdehyde,MDA）,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）,乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）试剂盒检测成骨细胞内ALP、SOD、LDH活性和MDA含量;用Von Kossa染色法检测矿化结节数目;用real time-PCR方法检测成骨细胞内Ⅰ型胶原（collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ）、骨钙素（osteocalcin,OCN）、转录因子Osterix、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）、NADPH氧化酶4（NADPH oxidase4,Nox4）、护骨素（osteoprotegerin,OPG）、细胞核因子κB受体活化因子配基（receptor activator nuclear factor-kappa B ligand,RANKL）mRNA表达,用流式细胞仪检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平。结果硫辛酸可增加ALP活力和矿化结节数目,促进骨形成相关指标COL-Ⅰ、Osterix、BMP-2和OCN mRNA表达（P〈0.05）;硫辛酸提高H2O2损伤后MC3T3-E1细胞活力,上调细胞内SOD活性并降低细胞中MDA含量和上清中LDH活性;硫辛酸上调MC3T3-E1细胞OPG/RANKL比值及下调ROS和Nox4 mRNA表达水平（P〈0.05）。结论硫辛酸在一定浓度范围内（0.1～0.4 mmol/L）促进H2O2处理后MC3T3-E1细胞的骨形成过程,这种促进作用是通过下调Nox4和ROS水平,降低氧化应激发挥抗氧化作用上调OPG/RANKL实现的。
关键词
硫辛酸
MC3T3-E1细胞
抗氧化
骨质疏松
Keywords
alpha-lipoic acid
MC3T3-E1 cell
anti-oxidative
osteoporosis
分类号
R681 [医药卫生—骨科学]
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作者
出处
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硫辛酸对体外培养的MC3T3-E1成骨细胞骨形成的影响
付卓栋
付超
孙慧君
韩国柱
刘谟震
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
2016
9
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