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题名猪源沙门氏菌聚合酶螺旋反应方法的建立与应用
被引量：2
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作者
胡瑞鸿
从秋实
李艳飞
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机构
东北农业大学动物医学学院
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出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1227-1232,共6页
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基金
国家自然科学资金项目(31372496)
黑龙江省动物疾病防控技术与制剂创制重点实验室资助。
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文摘
为建立一种快速、高效地检测猪源沙门氏菌的聚合酶螺旋反应(PSR)方法,本研究针对猪源沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因设计3套特异性扩增引物,通过优化孵育温度、dNTPs和Mg2+浓度、Bst聚合酶浓度和反应时间初步建立了猪源沙门氏菌PSR方法。结果显示:该方法可以特异性扩增2株猪沙门氏菌,而对其它12株病原菌无扩增,特异性较强;以沙门氏菌标准株CMCC 50094为模板,并经一系列的稀释,对PSR、LAMP和qRCR方法的敏感性进行检测和比较,结果显示PSR方法和qPCR方法对菌液的最小检出量均为5×101 cfu/mL,敏感性为LAMP方法的10倍,敏感性较高;临床样品检测结果显示,经PSR方法在132份仔猪腹泻样本中共检测出猪源沙门氏菌阳性样品18份,与常规培养方法鉴定结果一致,检出率均为13.64%。本研究建立的PSR法为猪源沙门氏菌的快速检测提供了一种可行方法。
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关键词
沙门氏菌
聚合酶螺旋反应
等温扩增技术
临床检测
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Keywords
Salmonella
polymerase spiral reaction
isothermal amplification method
clinical detection
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分类号
S852.61
[农业科学—基础兽医学]
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