重楼乙醇提取物对蝮蛇毒主要酶类的抑制作用

1

作者 严之英 骆薇 +6 位作者 封紫惠 张馨月 李靖轩 包婷婷 李勇 于鸿浩 辜澜涛 《华夏医学》 2025年第2期32-40,共9页

目的检测重楼乙醇提取物对蝮蛇毒中主要酶活力的抑制作用,分析重楼乙醇提取物治疗蝮蛇咬伤的效果。方法通过平板实验检测重楼乙醇提取物对蝮蛇毒蛋白水解酶和磷脂酶A2的抑制作用,利用分光光度法检测重楼乙醇提取物对蝮蛇毒透明质酸酶活... 目的检测重楼乙醇提取物对蝮蛇毒中主要酶活力的抑制作用,分析重楼乙醇提取物治疗蝮蛇咬伤的效果。方法通过平板实验检测重楼乙醇提取物对蝮蛇毒蛋白水解酶和磷脂酶A2的抑制作用,利用分光光度法检测重楼乙醇提取物对蝮蛇毒透明质酸酶活性的抑制作用,并通过血凝实验来评估重楼乙醇提取物对蝮蛇毒凝血酶活性的抑制作用。结果蝮蛇毒与重楼乙醇提取物的质量比达到1∶50时,重楼乙醇提取物能显著抑制蝮蛇毒中的磷脂酶A2和蛋白水解酶活性。当蝮蛇毒与重楼乙醇提取物的质量比达到1∶50时,蝮蛇毒透明质酸酶的活性可以被重楼乙醇提取物完全抑制。此外,重楼乙醇提取物可以显著抑制蝮蛇毒凝血作用。结论重楼乙醇提取物能够有效抑制蝮蛇毒中主要酶类的活性,为治疗蝮蛇咬伤提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 重楼乙醇提取物 蝮蛇毒 抑制作用

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藏羚粪便中类固醇激素的高效液相色谱分析 被引量：4

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作者 于鸿浩 赵新全 尤进茂 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第21期12881-12883,共3页

[目的]通过建立粪便中生殖激素含量的测定方法,为研究藏羚羊的繁殖特征奠定基础。[方法]以2-(11H-苯﹝α﹞咔唑)-乙基肼基甲酸酯(BCECH)为柱前衍生化试剂,探讨皮质醇、皮质酮、睾酮和孕酮4种类固醇激素衍生物的最佳色谱分离条件。通过比... [目的]通过建立粪便中生殖激素含量的测定方法,为研究藏羚羊的繁殖特征奠定基础。[方法]以2-(11H-苯﹝α﹞咔唑)-乙基肼基甲酸酯(BCECH)为柱前衍生化试剂,探讨皮质醇、皮质酮、睾酮和孕酮4种类固醇激素衍生物的最佳色谱分离条件。通过比较4种类固醇激素标准品出峰时间,确定粪样中目标物质峰。[结果]最优衍生条件为:以乙腈为衍生化溶剂,以三氯乙酸为催化剂,衍生化温度65℃,衍生试剂用量为总摩尔类固醇的10倍以上。在建立的色谱条件下,藏羚粪样中4种类固醇激素含量色谱图有较多的杂质峰,表明粪样中的成分很复杂。[结论]该研究建立了藏羚羊粪便中类固醇激素高效液相色谱的分析方法,实现了藏羚粪便中4种类固醇化合物的定量测定。 展开更多

关键词 高效液相色谱 柱前衍生 类固醇 藏羚

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哺乳动物化学通讯研究概况 被引量：4

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作者 于鸿浩 《榆林学院学报》 2012年第6期3-9,共7页

动物间的信息交流对于动物生存和繁殖具有重要意义。通常,动物获取信息的方式主要有视觉、听觉、嗅觉、味觉等,而化学通讯在大多数哺乳动物的通讯行为中占有主导地位。很多学者对化学通讯的功能、神经通路以及信息素化学成分进行了大量... 动物间的信息交流对于动物生存和繁殖具有重要意义。通常,动物获取信息的方式主要有视觉、听觉、嗅觉、味觉等,而化学通讯在大多数哺乳动物的通讯行为中占有主导地位。很多学者对化学通讯的功能、神经通路以及信息素化学成分进行了大量探索,促进了哺乳动物化学通讯研究领域快速发展。本文就哺乳动物化学通讯的功能、气味源的种类与功能、信息素的化学成分及研究方法、神经感知通路等研究热点就行了相关评述。 展开更多

关键词 哺乳动物 化学通讯 信息素 气味源

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猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫抑制研究进展 被引量：16

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作者 敬晓棋 孟建斌 +6 位作者 高晓阳 冯平 闫海龙 刘生耀 于鸿浩 胡军和 屈雷 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第10期75-78,共4页

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是造成全球养猪业巨大经济损失的病毒性传染病,由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起。自从该病被发现以来,PRRSV病毒的基因组结构、蛋白功能等生物学、致病性、传播方式等流行病学及疫苗和防控进行了深入的研... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是造成全球养猪业巨大经济损失的病毒性传染病,由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起。自从该病被发现以来,PRRSV病毒的基因组结构、蛋白功能等生物学、致病性、传播方式等流行病学及疫苗和防控进行了深入的研究,然而目前商业化的疫苗对PRRS的预防效果并不理想,这可能与PRRSV的免疫逃避和对机体免疫机能的抑制有关。PRRSV可通过抗原逃避、延迟中和抗体产生和T细胞免疫、抗体依赖性增强、抑制树突状细胞功能、诱导调节性T细胞分化等多种途径逃避和抑制机体的天然免疫和适应性免疫应答,导致病毒的持续性感染。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 生物学 免疫抑制

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保存温度对卵母细胞体外成熟率的影响及牦牛卵母细胞体外成熟培养方式初探 被引量：4

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作者 庞礴 赵新全 +3 位作者 郭志林 屈雷 于鸿浩 郭松长 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1158-1164,共7页

【目的】探索不同卵巢保存温度对卵母细胞体外成熟的影响以及两种培养方式对牦牛卵母细胞体外成熟的影响。【方法】通过对绵羊、山羊、牦牛、蒙古牛和奶牛卵母细胞进行体外成熟培养,比较两种保存温度对5种卵母细胞成熟率的影响,并以牦... 【目的】探索不同卵巢保存温度对卵母细胞体外成熟的影响以及两种培养方式对牦牛卵母细胞体外成熟的影响。【方法】通过对绵羊、山羊、牦牛、蒙古牛和奶牛卵母细胞进行体外成熟培养,比较两种保存温度对5种卵母细胞成熟率的影响,并以牦牛卵母细胞为研究对象比较两种培养方式对牦牛卵母细胞成熟率的影响。【结果】卵巢保存温度为20～25℃时,山羊卵母细胞体外成熟率显著高于卵巢保存温度26～30℃(P=0.021)。蒙古牛卵巢保存于20～25℃时,其卵母细胞成熟率极显著高于卵巢保存在26～30℃(P=0.001)。保存温度为20～25℃时,绵羊、牦牛和奶牛的卵母细胞体外成熟率都较高于卵巢保存温度为26～30℃时的成熟率。另外,牦牛卵母细胞在四孔板中成熟培养的成熟率与在35 mm培养皿中成熟率并没有显著差异(P=0.65)。【结论】绵羊、山羊、牦牛、蒙古牛和奶牛的卵巢保存于20～25℃为宜,该卵巢保存温度可提高卵母细胞体外成熟率。牦牛卵母细胞在四孔板中培养的成熟率高于在35 mm培养皿中成熟率。 展开更多

关键词 牦牛 保存温度 培养方式 卵母细胞体外成熟 成熟率

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藏獒皮肤成纤维细胞培养与生物学特性观察 被引量：2

6

作者 石凡 杨永梅 +3 位作者 于鸿浩 郭志林 郭松长 赵新全 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期156-161,共6页

为了研究藏獒体细胞生物学特性和保存藏獒遗传资源,采用组织块法建立了2株藏獒成纤维细胞系,对体外培养的细胞形态、增殖能力和部分生物学特性进行了分析。结果表明,体外培养的藏獒细胞呈现典型的成纤维细胞形态,生长良好,增殖能力强,... 为了研究藏獒体细胞生物学特性和保存藏獒遗传资源,采用组织块法建立了2株藏獒成纤维细胞系,对体外培养的细胞形态、增殖能力和部分生物学特性进行了分析。结果表明,体外培养的藏獒细胞呈现典型的成纤维细胞形态,生长良好,增殖能力强,测定的细胞群体倍增时间为46.1h;经免疫荧光染色,细胞表达波形蛋白;F5代细胞正常二倍体核型率为91.4%,藏獒核型2n=78,X染色体为亚中着丝粒染色体,Y染色体为端着丝粒染色体。本研究所建立的藏獒体细胞系为开展藏獒体细胞核移植研究提供了材料。 展开更多

关键词 藏獒 细胞培养 成纤维细胞 免疫荧光染色

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基于基因编辑技术研究特定基因对小鼠肠道微生物的影响

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作者 阮浩龙 王宁 +1 位作者 于鸿浩 岳鹏鹏 《中国医学工程》 2024年第11期44-49,共6页

基因编辑是一种能够精确修改基因组的技术,它为基因功能研究提供了强大的工具。利用锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活类效应核酸酶(TALENs)、规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR)等技术,研究人员可以操作目标基因,实现在小鼠模型中敲除、... 基因编辑是一种能够精确修改基因组的技术,它为基因功能研究提供了强大的工具。利用锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活类效应核酸酶(TALENs)、规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR)等技术,研究人员可以操作目标基因,实现在小鼠模型中敲除、插入或修改特定基因,用以研究其对肠道微生物组成的影响,探索肠道微生物与宿主相互作用的机制,理解这些相互作用对宿主健康的影响。近期的研究发现,小鼠基因编辑对其肠道微生物的影响有了重要进展。特定基因的敲除能够导致微生物组成的改变,进而影响宿主的代谢、免疫和疾病风险。这些研究揭示了肠道微生物与宿主之间复杂的相互作用网络,为理解肠道微生物学和宿主健康的关键因素提供了重要线索。未来,进一步研究小鼠基因组编辑对肠道微生物的影响,将有助于开发新的治疗策略和预防措施,以维护宿主健康。 展开更多

关键词 基因编辑 特定基因 小鼠模型 肠道微生物 相互作用

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医学遗传学教学改革探索 被引量：4

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作者 李勇 李夏 +3 位作者 肖福英 于鸿浩 马海林 韦日明 《华夏医学》 CAS 2021年第2期161-163,共3页

医学遗传学是医学生的基础课程,是医学生了解遗传学的重要渠道。医学遗传学又是遗传学基础学科和临床实践相结合的交叉学科,以遗传病即人类遗传物质发生改变所产生的疾病作为研究对象[1]。近年来医学遗传学的快速发展是为更好地满足新... 医学遗传学是医学生的基础课程,是医学生了解遗传学的重要渠道。医学遗传学又是遗传学基础学科和临床实践相结合的交叉学科,以遗传病即人类遗传物质发生改变所产生的疾病作为研究对象[1]。近年来医学遗传学的快速发展是为更好地满足新时代医学的需求,不仅要加强当代医学生对遗传学基础知识的夯实,更要注重培养医学生的整体素质。本文就医学遗传学的教学改革进行探讨。 展开更多

关键词 医学遗传学 理论教学 实验实践 改革

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医药生物技术专业实验动物学教学改革的探讨 被引量：1

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作者 李勇 肖福英 +3 位作者 于鸿浩 唐军 张震 韦日明 《华夏医学》 CAS 2019年第5期135-137,共3页

医药生物技术专业是一个实践性强、对学生的创新能力要求很高的专业。目前国家积极倡导加强对大学生创新、创业能力的培养,如何培养、提高学生的创新、创业能力是新形势下医药生物技术专业教学改革的重要目标。在创新、创业教育的视野... 医药生物技术专业是一个实践性强、对学生的创新能力要求很高的专业。目前国家积极倡导加强对大学生创新、创业能力的培养,如何培养、提高学生的创新、创业能力是新形势下医药生物技术专业教学改革的重要目标。在创新、创业教育的视野下进行高校教学改革,可实现教育创新,从而促进本专业的创新、创业教育,促进创新人才的培养。对于医药生物专业的实验动物学课程教学改革,笔者把理论课教学内容改革、实验课教学内容和方式方法的改革作为切入点和突破口,从教师、教学、考试的角度着手,力图培养学生灵活运用理论知识解决实际问题的能力;培养学生的知识迁移能力、创新意识、创新精神和创业能力。 展开更多

关键词 实验动物学 教学改革 创新能力 创业能力

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靶向小鼠Gaa基因的CRISPR/Cas9系统设计及打靶效力分析 被引量：4

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作者 岳鹏鹏 唐琴艳 +3 位作者 李欣怡 陈玲 付灿 于鸿浩 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第10期1021-1027,共7页

目的 GAA基因突变是人类II型糖原贮积病的遗传学病因,目前尚无根治方法。文章拟设计可模拟人类GAA基因强致病位点突变的靶向小鼠Gaa基因的CRISPR/Cas9系统,并在细胞水平验证其打靶效力。方法检索OMIM、ExAC以及ClinVar等数据库筛查人类... 目的 GAA基因突变是人类II型糖原贮积病的遗传学病因,目前尚无根治方法。文章拟设计可模拟人类GAA基因强致病位点突变的靶向小鼠Gaa基因的CRISPR/Cas9系统,并在细胞水平验证其打靶效力。方法检索OMIM、ExAC以及ClinVar等数据库筛查人类Ⅱ型糖原累积病致病基因GAA的强致病位点。通过人和小鼠GAA蛋白序列比对分析将筛查到的强致病位点定位于小鼠基因组上。根据定位区域的小鼠基因组DNA序列,设计了3个向导RNA序列(Small Guide RNA,sgRNA)序列。然后构建了3个sgRNA表达载体,并将3个sgRNA表达载体分别与cas9表达质粒共转染小鼠N2a细胞。通过嘌呤霉素和杀稻瘟菌素进行药物筛选,收取阳性转染细胞。PCR扩增打靶区域DNA片段,利用T7EN I酶切反应和sanger测序初步分析打靶情况。随后通过高通量测序分析基因型和打靶效率。结果根据筛查结果判定人GAA蛋白的p.Tyr609位点为强致病位点,与小鼠Gaa蛋白的p.Tyr609位点相对应;根据小鼠Gaa蛋白p.Tyr609位点的DNA序列,成功构建了3个靶向该位点的sgRNA表达质粒;药筛阳性细胞打靶位点的PCR扩增产物测序及T7EN I酶切反应表明3个位点均发生了DNA变异;高通量测序结果表明3个位点的突变效率分别为49.45%、71.23%和70.91%。结论成功构建了靶向小鼠Gaa基因的高效CRISPR/Cas9系统,为深入研究Gaa基因的功能以及建立Gaa基因编辑小鼠模型进而探讨疾病的机制和治疗方法奠定基础。 展开更多

关键词 GAA基因 基因编辑 CRISPR/Cas9系统 糖原贮积病

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靶向小鼠KRT5基因的CRISPR/Cas9系统设计与打靶效力分析 被引量：1

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作者 王蓉 陈圆圆 +3 位作者 潘向和 李鑫 于鸿浩 岳鹏鹏 《华夏医学》 CAS 2022年第5期1-7,共7页

目的:单纯型大疱性表皮松解症(EBS)是一种单基因遗传性皮肤疾病,KRT5基因突变是其主要的遗传学病因。本研究在综合分析人KRT5基因的致病突变位点后,在其附近设计、合成3条sgRNA序列,并构建靶向小鼠KRT5基因的CRISPR/Cas9系统,以模拟人K... 目的:单纯型大疱性表皮松解症(EBS)是一种单基因遗传性皮肤疾病,KRT5基因突变是其主要的遗传学病因。本研究在综合分析人KRT5基因的致病突变位点后,在其附近设计、合成3条sgRNA序列,并构建靶向小鼠KRT5基因的CRISPR/Cas9系统,以模拟人KRT5基因的致病突变。方法:分析数据库中人KRT5基因的致病突变位点,设计3条小鼠拟突变位点sgRNA序列;构建pGL3-U6-KRT5-sgRNA表达质粒,然后采用Lipofectamine3000转染试剂将pGL3-U6-KRT5-sgRNA表达质粒与pST1374-NLS-flag-linker-Cas9表达质粒共同转染入小鼠N2a细胞,再以嘌呤霉素和杀稻瘟菌素进行筛选;采用PCR产物测序和TA克隆测序鉴定突变序列,分析打靶效力。结果:成功构建了3个pGL3-U6-KRT5-sgRNA表达质粒,将其转入小鼠N2a细胞后,打靶KRT5基因的效力最高为64.29%,最低为16.67%。结论:设计的CRISPR/Cas9系统可以有效打靶小鼠KRT5基因,为后续建立KRT5基因编辑的小鼠模型,探讨KRT5基因在EBS发生、发展中的作用和机制奠定基础。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 基因编辑 单纯型大疱性表皮松解症 KRT5

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构建靶向小鼠Slc39a4基因的CRISPR/Cas9系统及打靶功能验证

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作者 江晓雨 杨志成 +3 位作者 黄念 于鸿浩 唐雪辉 岳鹏鹏 《华夏医学》 CAS 2022年第6期51-56,共6页

目的:构建靶向小鼠Slc39a4基因的CRISPR/Cas9系统并在细胞水平上对其打靶功能进行验证。方法:参考数据库中人SLC39A4强致病位点,对比分析人和小鼠Slc39a4蛋白序列,将人强致病位点定位于小鼠基因组上。根据定位区域的小鼠基因组DNA序列,... 目的:构建靶向小鼠Slc39a4基因的CRISPR/Cas9系统并在细胞水平上对其打靶功能进行验证。方法:参考数据库中人SLC39A4强致病位点,对比分析人和小鼠Slc39a4蛋白序列,将人强致病位点定位于小鼠基因组上。根据定位区域的小鼠基因组DNA序列,设计3个向导RNA(small guide RNA,sgRNA)序列,构建表达载体。通过细胞转染、药物筛选,获得阳性细胞。利用PCR扩增、T7 Endonu-clease酶切反应和TA克隆测序分析打靶情况以及打靶位点的基因型和编辑效率。结果:成功构建了3个sgRNA,sgRNA3导向序列可诱导Cas9蛋白打靶小鼠Slc39a4基因,打靶效率为30%。结论:成功构建靶向小鼠Slc39a4基因的CRISPR/Cas9系统,为制备SLC39A4基因编辑动物模型,深入研究SLC39a4基因的致病机理奠定基础。 展开更多

关键词 基因编辑 CRISPR/Cas9 Slc39a4 肠病性肢端皮炎

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靶向小鼠Abcb11基因CRISPR/Cas9系统的构建及效率检测

13

作者 张泽伟 周灿 +3 位作者 凡睿 覃碧依 于鸿浩 岳鹏鹏 《华夏医学》 CAS 2023年第2期43-49,共7页

目的:ABCB11基因突变是肝内胆汁淤积症2型(PFIC-2)的主要病因,本研究试图构建特异性靶向小鼠Abcb11基因的CRISPR/Cas9系统,并检测该系统的基因编辑效率。方法:根据小鼠Abcb11基因的DNA序列,设计3条sgRNA导向序列,通过构建sgRNA表达载体,... 目的:ABCB11基因突变是肝内胆汁淤积症2型(PFIC-2)的主要病因,本研究试图构建特异性靶向小鼠Abcb11基因的CRISPR/Cas9系统,并检测该系统的基因编辑效率。方法:根据小鼠Abcb11基因的DNA序列,设计3条sgRNA导向序列,通过构建sgRNA表达载体,将sgRNA质粒和Cas9质粒一起转入N2a细胞,药物筛选,阳性细胞DNA的PCR产物测序以及TA克隆测序等实验,完成基因编辑系统构建及效率检测。结果:sgRNA3导向序列可用于编辑小鼠Abcb11基因,编辑效率为61.54%。结论:靶向小鼠Abcb11基因的编辑系统构建成功,且有较高的编辑效率,为后续建立精准模拟人类PFIC-2疾病的小鼠模型以及临床治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 Abcb11 CRISPR/Cas9系统 肝内胆汁淤积症2型

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