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噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库构建及差减筛选融合蛋白
被引量：
1
1
作者
王阔鹏
于凌娇
+2 位作者
刘倩宏
刘麒
张履冰
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期376-381,共6页
目的建立噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库,差减筛选具有良好特异性、亲和力及反应原性的蛋白,为确定新型诊断用抗原奠定基础。方法利用噬菌粒载体pYW01构建重组羊型布鲁氏菌16M株基因文库,辅助噬菌体VCSM13感染基因文库进而构...
目的建立噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库,差减筛选具有良好特异性、亲和力及反应原性的蛋白,为确定新型诊断用抗原奠定基础。方法利用噬菌粒载体pYW01构建重组羊型布鲁氏菌16M株基因文库,辅助噬菌体VCSM13感染基因文库进而构建噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M蛋白文库。利用PEG纯化后,扩增蛋白文库。随机挑取单克隆,提取质粒,测序鉴定蛋白文库。通过差减筛选,选择具有良好特异性、亲和力及反应原性的表面蛋白,为确定诊断用抗原奠定基础。结果通过DNA重组技术,构建羊型布鲁氏菌16M基因文库,库容量达到10~8pfu/mL,并且随机性良好。利用辅助噬菌体VCSM13包装基因文库,随机挑取蛋白文库中单克隆,提取质粒,经测序鉴定,成功构建噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库。利用免疫血清及感染血清对噬菌体展示蛋白文库进行差减淘选,筛选出6个噬菌体融合蛋白。经Western-blot分析6个噬菌体融合蛋白均具有较好的反应原性及特异性。结论成功构建噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库,差减筛选出6个具有较好反应原性及特异性的融合蛋白,为后续新型血清学诊断制剂筛选奠定基础。
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关键词
布鲁氏菌
噬菌体展示
融合蛋白
差减筛选
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职称材料
几种常见蛋白质饲料的体外营养价值评定
被引量：
4
2
作者
董捷
于凌娇
何玉华
《养殖与饲料》
2019年第7期10-13,共4页
采用凯氏定氮法、胃蛋白酶和胰蛋白酶分别作用于5种饲料原料(豆粕、血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉),并测定其粗蛋白的含量、溶解度及体外消化率。试验结果表明:粗蛋白的含量依次为:羽毛粉〉血粉〉鱼粉〉豆粕>DDGS;豆粕、血粉、鱼粉、DDG...
采用凯氏定氮法、胃蛋白酶和胰蛋白酶分别作用于5种饲料原料(豆粕、血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉),并测定其粗蛋白的含量、溶解度及体外消化率。试验结果表明:粗蛋白的含量依次为:羽毛粉〉血粉〉鱼粉〉豆粕>DDGS;豆粕、血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉的溶解度分别为:83.56%、56.4%、34.01%、14.33%、7.99%;豆粕、鱼粉、血粉、DDGS、羽毛粉中粗蛋白在消化道不同部位消化率均不相同,而且随着时间的推移,粗蛋白在体外的消化率呈现动态增加的趋势。在消化28h后,豆粕中粗蛋白的体外消化率为84.69%,显著高于其他4种;血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉中粗蛋白的消化率分别为63.19%、61.56%、48.77%和14.25%。
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关键词
豆粕
鱼粉
血粉
DDGS
羽毛粉
蛋白质体外消化率
蛋白质溶解度
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职称材料
题名
噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库构建及差减筛选融合蛋白
被引量：
1
1
作者
王阔鹏
于凌娇
刘倩宏
刘麒
张履冰
机构
吉林农业科技学院动物科技学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第5期376-381,共6页
基金
吉林省科技厅项目(No.20150204022NY)
大学生科技创新项目[No.吉农院合字(2009)第11439024号
No.201811439024]联合资助~~
文摘
目的建立噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库,差减筛选具有良好特异性、亲和力及反应原性的蛋白,为确定新型诊断用抗原奠定基础。方法利用噬菌粒载体pYW01构建重组羊型布鲁氏菌16M株基因文库,辅助噬菌体VCSM13感染基因文库进而构建噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M蛋白文库。利用PEG纯化后,扩增蛋白文库。随机挑取单克隆,提取质粒,测序鉴定蛋白文库。通过差减筛选,选择具有良好特异性、亲和力及反应原性的表面蛋白,为确定诊断用抗原奠定基础。结果通过DNA重组技术,构建羊型布鲁氏菌16M基因文库,库容量达到10~8pfu/mL,并且随机性良好。利用辅助噬菌体VCSM13包装基因文库,随机挑取蛋白文库中单克隆,提取质粒,经测序鉴定,成功构建噬菌体展示羊型布鲁氏菌16M株表面蛋白文库。利用免疫血清及感染血清对噬菌体展示蛋白文库进行差减淘选,筛选出6个噬菌体融合蛋白。经Western-blot分析6个噬菌体融合蛋白均具有较好的反应原性及特异性。结论成功构建噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库,差减筛选出6个具有较好反应原性及特异性的融合蛋白,为后续新型血清学诊断制剂筛选奠定基础。
关键词
布鲁氏菌
噬菌体展示
融合蛋白
差减筛选
Keywords
Brucella
phage display
fusion protein
subtractive scanning
分类号
R378.5 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
几种常见蛋白质饲料的体外营养价值评定
被引量：
4
2
作者
董捷
于凌娇
何玉华
机构
吉林农业科技学院动物科技学院
出处
《养殖与饲料》
2019年第7期10-13,共4页
基金
2017年吉林农业科技学院省级大学生创新项目(吉农院合字201711439025号)
文摘
采用凯氏定氮法、胃蛋白酶和胰蛋白酶分别作用于5种饲料原料(豆粕、血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉),并测定其粗蛋白的含量、溶解度及体外消化率。试验结果表明:粗蛋白的含量依次为:羽毛粉〉血粉〉鱼粉〉豆粕>DDGS;豆粕、血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉的溶解度分别为:83.56%、56.4%、34.01%、14.33%、7.99%;豆粕、鱼粉、血粉、DDGS、羽毛粉中粗蛋白在消化道不同部位消化率均不相同,而且随着时间的推移,粗蛋白在体外的消化率呈现动态增加的趋势。在消化28h后,豆粕中粗蛋白的体外消化率为84.69%,显著高于其他4种;血粉、鱼粉、DDGS、羽毛粉中粗蛋白的消化率分别为63.19%、61.56%、48.77%和14.25%。
关键词
豆粕
鱼粉
血粉
DDGS
羽毛粉
蛋白质体外消化率
蛋白质溶解度
分类号
S816.4 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
噬菌体展示布鲁氏菌蛋白文库构建及差减筛选融合蛋白
王阔鹏
于凌娇
刘倩宏
刘麒
张履冰
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
几种常见蛋白质饲料的体外营养价值评定
董捷
于凌娇
何玉华
《养殖与饲料》
2019
4
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