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雷帕霉素通过活化MAPK促进神经胶质瘤U87-MG细胞自噬
被引量:
6
1
作者
曹相玫
徐辉
+3 位作者
武艳玮
游南林
于佳翔
马杰
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期654-660,共7页
目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对神经胶质瘤U87-MG细胞自噬的相关作用和机制。方法:用Rapa处理U87-MG细胞,分为正常对照(NC)组(0μmol/L Rapa)及Rapa各浓度组(1、2.5、5、10、20和40μmol/L Rapa),MTT实验检测细胞活性,软琼脂集落形成实验和...
目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对神经胶质瘤U87-MG细胞自噬的相关作用和机制。方法:用Rapa处理U87-MG细胞,分为正常对照(NC)组(0μmol/L Rapa)及Rapa各浓度组(1、2.5、5、10、20和40μmol/L Rapa),MTT实验检测细胞活性,软琼脂集落形成实验和平板集落形成实验检测细胞集落形成能力,Western blot法检测mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ、beclin-1、p-S6、p70S6K、p-MAPK及GFAP蛋白水平的变化。结果:MTT实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞的活力,并呈现剂量依赖性(P<0.05)。软琼脂和平板集落形成实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞集落形成数(P<0.05)。Western blot结果显示,Rapa处理后mTOR及p-mTOR蛋白水平降低;自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和beclin-1水平显著升高(P<0.05);自噬相关信号通路分子p70S6K表达趋势呈抛物线轨迹,差异无统计学意义(P>0.05);p-S6表达趋势与p70S6K相反,Rapa干预后p-S6表达显著降低,在40μmol/L Rapa干预后上升至NC组的水平;p-MAPK和GFAP水平显著增高(P<0.05)。结论:Rapa通过激活MAPK促进细胞自噬,从而抑制U87-MG细胞增殖。
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关键词
神经胶质瘤
自噬
雷帕霉素
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职称材料
异柠檬酸脱氢酶1突变体对U87细胞生物节律基因表达的影响
被引量:
1
2
作者
武艳玮
王世雄
+4 位作者
徐辉
于佳翔
马杰
刘焕
曹相玫
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期519-524,共6页
目的:研究异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型与突变型(mut IDH1)对人胶质瘤细胞系U87节律基因的影响。方法:分别用IDH1和mut IDH1重组慢病毒感染U87细胞,应用荧光倒置显微镜观察感染效率;流式细胞术检测细胞周期分布;Western Blot检测U87细胞...
目的:研究异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型与突变型(mut IDH1)对人胶质瘤细胞系U87节律基因的影响。方法:分别用IDH1和mut IDH1重组慢病毒感染U87细胞,应用荧光倒置显微镜观察感染效率;流式细胞术检测细胞周期分布;Western Blot检测U87细胞内IDH1、mut IDH1、Bmal1、Clock、Smad通路相关分子的表达水平。结果:成功感染IDH1和mut IDH1重组慢病毒,当感染复数(MOI)为20∶1时,感染效率最高。流式细胞术检测细胞周期分布提示IDH1基因突变使U87细胞G1期比例增高(野生型组62.00%,突变型组72.31%),S期比例降低(野生型组29.82%,突变型组19.39%)。Western Blot结果显示IDH1基因突变使得正调节节律分子Bmal1与Clock的蛋白表达明显降低,以及Smad通路相关分子Smad2、Smad3、Smad2-3的蛋白表达降低,pSmad2、p-Smad3、Smad4的蛋白表达升高。结论:IDH1基因可能通过TGF-β/Smad通路来改变U87细胞的节律基因。
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关键词
异柠檬酸脱氢酶1
突变
生物节律
胶质瘤
SMAD
U87细胞
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职称材料
题名
雷帕霉素通过活化MAPK促进神经胶质瘤U87-MG细胞自噬
被引量:
6
1
作者
曹相玫
徐辉
武艳玮
游南林
于佳翔
马杰
机构
宁夏医科大学基础医学院病理学系
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期654-660,共7页
基金
宁夏自然科学基金(No.2020AAC03185)。
文摘
目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对神经胶质瘤U87-MG细胞自噬的相关作用和机制。方法:用Rapa处理U87-MG细胞,分为正常对照(NC)组(0μmol/L Rapa)及Rapa各浓度组(1、2.5、5、10、20和40μmol/L Rapa),MTT实验检测细胞活性,软琼脂集落形成实验和平板集落形成实验检测细胞集落形成能力,Western blot法检测mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ、beclin-1、p-S6、p70S6K、p-MAPK及GFAP蛋白水平的变化。结果:MTT实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞的活力,并呈现剂量依赖性(P<0.05)。软琼脂和平板集落形成实验结果显示,Rapa显著抑制U87-MG细胞集落形成数(P<0.05)。Western blot结果显示,Rapa处理后mTOR及p-mTOR蛋白水平降低;自噬标志蛋白LC3-Ⅱ和beclin-1水平显著升高(P<0.05);自噬相关信号通路分子p70S6K表达趋势呈抛物线轨迹,差异无统计学意义(P>0.05);p-S6表达趋势与p70S6K相反,Rapa干预后p-S6表达显著降低,在40μmol/L Rapa干预后上升至NC组的水平;p-MAPK和GFAP水平显著增高(P<0.05)。结论:Rapa通过激活MAPK促进细胞自噬,从而抑制U87-MG细胞增殖。
关键词
神经胶质瘤
自噬
雷帕霉素
Keywords
Glioma
Autophagy
Rapamycin
分类号
R739.4 [医药卫生—肿瘤]
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
异柠檬酸脱氢酶1突变体对U87细胞生物节律基因表达的影响
被引量:
1
2
作者
武艳玮
王世雄
徐辉
于佳翔
马杰
刘焕
曹相玫
机构
宁夏医科大学基础医学院病理学系
宁夏医科大学临床医学院
宁夏医科大学基础医学院
西安医学院基础医学部病理生理学教研室
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第5期519-524,共6页
基金
国家自然科学基金(81560501
81601637)
+1 种基金
宁夏自然科学基金(2020AAC03185
2020AAC03351)。
文摘
目的:研究异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)野生型与突变型(mut IDH1)对人胶质瘤细胞系U87节律基因的影响。方法:分别用IDH1和mut IDH1重组慢病毒感染U87细胞,应用荧光倒置显微镜观察感染效率;流式细胞术检测细胞周期分布;Western Blot检测U87细胞内IDH1、mut IDH1、Bmal1、Clock、Smad通路相关分子的表达水平。结果:成功感染IDH1和mut IDH1重组慢病毒,当感染复数(MOI)为20∶1时,感染效率最高。流式细胞术检测细胞周期分布提示IDH1基因突变使U87细胞G1期比例增高(野生型组62.00%,突变型组72.31%),S期比例降低(野生型组29.82%,突变型组19.39%)。Western Blot结果显示IDH1基因突变使得正调节节律分子Bmal1与Clock的蛋白表达明显降低,以及Smad通路相关分子Smad2、Smad3、Smad2-3的蛋白表达降低,pSmad2、p-Smad3、Smad4的蛋白表达升高。结论:IDH1基因可能通过TGF-β/Smad通路来改变U87细胞的节律基因。
关键词
异柠檬酸脱氢酶1
突变
生物节律
胶质瘤
SMAD
U87细胞
Keywords
isocitrate dehydrogenase 1
mutation
biorhythm
glioma
Smad
U87 cells
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雷帕霉素通过活化MAPK促进神经胶质瘤U87-MG细胞自噬
曹相玫
徐辉
武艳玮
游南林
于佳翔
马杰
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
6
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下载PDF
职称材料
2
异柠檬酸脱氢酶1突变体对U87细胞生物节律基因表达的影响
武艳玮
王世雄
徐辉
于佳翔
马杰
刘焕
曹相玫
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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