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miRNA-138-5p靶向调控胱天蛋白酶3减缓吸烟所致睾丸支持细胞TM4细胞凋亡
被引量：
5
1
作者
徐华
买尔哈巴·阿不力孜
+1 位作者
赵婉竹
何丽娟
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期285-294,共10页
近年来研究表明,长期大量吸烟可致睾丸出现不可逆性损伤进而出现精子发生受阻,凋亡信号通路在其中发挥着关键作用,其分子调控机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨miRNA-138-5p在香烟烟雾所致小鼠睾丸支持细胞TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertol...
近年来研究表明,长期大量吸烟可致睾丸出现不可逆性损伤进而出现精子发生受阻,凋亡信号通路在其中发挥着关键作用,其分子调控机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨miRNA-138-5p在香烟烟雾所致小鼠睾丸支持细胞TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertoli细胞)损伤中的靶向调控机制。MTT法、乳酸脱氢酶法和TUNEL法结果显示,CSE干预后的TM4细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞毒性显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05);RT-PCR和Western印迹结果证明,10%CSE干预TM4细胞后,凋亡前体基因p53、促凋亡基因Bak和胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA和蛋白质表达水平显著上调(P<0.05);在TM4细胞中转染miRNA-138-5p过表达质粒后同样进行CSE干预,结果显示,支持细胞存活率较转染前显著升高(P<0.05),凋亡阳性细胞数较转染前显著降低(P<0.05),凋亡前体p53基因、促凋亡基因Bak和Caspase-3的mRNA和蛋白质表达较转染前显著下调(P<0.05);沉默miRNA-138-5p后,Bak、胱天蛋白酶3的mRNA和蛋白质表达水平显著增加(P<0.05);在线数据库分析显示,miRNA-138-5p与胱天蛋白酶3具有较高的匹配预测值,双荧光素酶报告基因结果显示,Bak未结合至miRNA-138-5p,而胱天蛋白酶3可以靶向结合至miRNA-138-5p。以上结果提示,miRNA-138-5p可靶向调控胱天蛋白酶3,减缓吸烟所致睾丸支持细胞凋亡,具有支持细胞的保护作用。
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关键词
香烟烟雾暴露
TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertoli细胞)
miRNA-138-5p
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职称材料
线粒体凋亡通路参与香烟烟雾暴露所致的大鼠睾丸凋亡
被引量：
1
2
作者
何丽娟
买尔哈巴·阿不力孜
+2 位作者
张晨
仲春雪
李琳琳
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第7期974-982,共9页
近年来,伴随全球吸烟人数剧增,对吸烟所致雄性生殖毒性损伤关注也日益增多。研究表明,长期大量吸烟可致男性睾丸损伤,表现为精液质量下降等,然而其具体机制不详。为探讨线粒体凋亡通路在香烟烟雾暴露所致大鼠睾丸凋亡损伤中的调控作用,...
近年来,伴随全球吸烟人数剧增,对吸烟所致雄性生殖毒性损伤关注也日益增多。研究表明,长期大量吸烟可致男性睾丸损伤,表现为精液质量下降等,然而其具体机制不详。为探讨线粒体凋亡通路在香烟烟雾暴露所致大鼠睾丸凋亡损伤中的调控作用,选用SPF级SD雄鼠并随机分为高、中、低香烟烟雾暴露组(30支/d、20支/d和10支/d)和对照组,采用静式染毒法处理各组,分别于2、4、6、8和12周后麻醉处死动物,计算睾丸脏器系数,检测睾丸组织病理学改变及细胞凋亡情况。同时检测细胞凋亡激活因子1(cell apoptosis activation factor 1,Apaf-1)、胱天蛋白酶9(caspase-9)及Bcl-2家族中Bim、Bcl-w和Bak在mRNA和蛋白质水平的表达。结果显示,随香烟烟雾暴露剂量增加,暴露时间延长,暴露组大鼠的体重逐渐下降,睾丸组织呈现出明显的病理学改变,睾丸脏器系数逐渐减少。染毒第8周,中、高剂量组及第12周各剂量组睾丸脏器系数较对照组显著减少(P<0.05);睾丸阳性凋亡细胞数也随染毒时间延长而逐渐增多,从第6周起呈现统计学差异(P<0.05);香烟烟雾暴露12周后,睾丸Apaf-1和胱天蛋白酶9表达均较空白组显著上调(P<0.05);促凋亡基因Bak的mRNA转录水平在染毒初期逐渐下调,从第8周开始,其mRNA转录水平逐渐上调;Bak的蛋白质水平上调,在染毒12周时,Bak的mRNA和蛋白质水平均出现显著性上调(P<0.05);抗凋亡基因Bcl-w的mRNA转录表达在染毒第6周开始出现显著性下调(P<0.05),Bcl-w在染毒12周时出现显著性下调(P<0.05),BH3 only基因Bim表达虽有上调趋势,但未出现统计学差异(P>0.05)。以上结果提示,长期大量吸烟可激活线粒体凋亡通路,促使睾丸组织的不可逆性凋亡损伤。这为进一步探讨吸烟所致男性生殖损伤的分子机制提供了科学依据。
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关键词
香烟烟雾暴露
睾丸
细胞凋亡
线粒体凋亡通路
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职称材料
题名
miRNA-138-5p靶向调控胱天蛋白酶3减缓吸烟所致睾丸支持细胞TM4细胞凋亡
被引量：
5
1
作者
徐华
买尔哈巴·阿不力孜
赵婉竹
何丽娟
机构
新疆医科大学第一附属医院生殖助孕中心
新疆医科大学公共卫生学院社会医学教研室
新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室
新疆医科大学药学院博士后流动站
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期285-294,共10页
基金
新疆特殊环境与健康研究重点实验室开放课题项目(No.SKL-SEHR-2021-04)
国家自然科学基金(No.82260651)
博士后科研启动金资助。
文摘
近年来研究表明,长期大量吸烟可致睾丸出现不可逆性损伤进而出现精子发生受阻,凋亡信号通路在其中发挥着关键作用,其分子调控机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨miRNA-138-5p在香烟烟雾所致小鼠睾丸支持细胞TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertoli细胞)损伤中的靶向调控机制。MTT法、乳酸脱氢酶法和TUNEL法结果显示,CSE干预后的TM4细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞毒性显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05);RT-PCR和Western印迹结果证明,10%CSE干预TM4细胞后,凋亡前体基因p53、促凋亡基因Bak和胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA和蛋白质表达水平显著上调(P<0.05);在TM4细胞中转染miRNA-138-5p过表达质粒后同样进行CSE干预,结果显示,支持细胞存活率较转染前显著升高(P<0.05),凋亡阳性细胞数较转染前显著降低(P<0.05),凋亡前体p53基因、促凋亡基因Bak和Caspase-3的mRNA和蛋白质表达较转染前显著下调(P<0.05);沉默miRNA-138-5p后,Bak、胱天蛋白酶3的mRNA和蛋白质表达水平显著增加(P<0.05);在线数据库分析显示,miRNA-138-5p与胱天蛋白酶3具有较高的匹配预测值,双荧光素酶报告基因结果显示,Bak未结合至miRNA-138-5p,而胱天蛋白酶3可以靶向结合至miRNA-138-5p。以上结果提示,miRNA-138-5p可靶向调控胱天蛋白酶3,减缓吸烟所致睾丸支持细胞凋亡,具有支持细胞的保护作用。
关键词
香烟烟雾暴露
TM4细胞(正常小鼠睾丸Sertoli细胞)
miRNA-138-5p
Keywords
cigarette smoke exposure(CSE)
testicular Sertoli cells of normal mice
miRNA-138-5p
分类号
R114 [医药卫生—卫生毒理学]
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职称材料
题名
线粒体凋亡通路参与香烟烟雾暴露所致的大鼠睾丸凋亡
被引量：
1
2
作者
何丽娟
买尔哈巴·阿不力孜
张晨
仲春雪
李琳琳
机构
新疆医科大学公共卫生学院社会医学教研室
新疆医科大学第五附属医院教科办
新疆医科大学药学院药理教研室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第7期974-982,共9页
基金
自治区自然科学基金(No.2017D01C230)资助。
文摘
近年来,伴随全球吸烟人数剧增,对吸烟所致雄性生殖毒性损伤关注也日益增多。研究表明,长期大量吸烟可致男性睾丸损伤,表现为精液质量下降等,然而其具体机制不详。为探讨线粒体凋亡通路在香烟烟雾暴露所致大鼠睾丸凋亡损伤中的调控作用,选用SPF级SD雄鼠并随机分为高、中、低香烟烟雾暴露组(30支/d、20支/d和10支/d)和对照组,采用静式染毒法处理各组,分别于2、4、6、8和12周后麻醉处死动物,计算睾丸脏器系数,检测睾丸组织病理学改变及细胞凋亡情况。同时检测细胞凋亡激活因子1(cell apoptosis activation factor 1,Apaf-1)、胱天蛋白酶9(caspase-9)及Bcl-2家族中Bim、Bcl-w和Bak在mRNA和蛋白质水平的表达。结果显示,随香烟烟雾暴露剂量增加,暴露时间延长,暴露组大鼠的体重逐渐下降,睾丸组织呈现出明显的病理学改变,睾丸脏器系数逐渐减少。染毒第8周,中、高剂量组及第12周各剂量组睾丸脏器系数较对照组显著减少(P<0.05);睾丸阳性凋亡细胞数也随染毒时间延长而逐渐增多,从第6周起呈现统计学差异(P<0.05);香烟烟雾暴露12周后,睾丸Apaf-1和胱天蛋白酶9表达均较空白组显著上调(P<0.05);促凋亡基因Bak的mRNA转录水平在染毒初期逐渐下调,从第8周开始,其mRNA转录水平逐渐上调;Bak的蛋白质水平上调,在染毒12周时,Bak的mRNA和蛋白质水平均出现显著性上调(P<0.05);抗凋亡基因Bcl-w的mRNA转录表达在染毒第6周开始出现显著性下调(P<0.05),Bcl-w在染毒12周时出现显著性下调(P<0.05),BH3 only基因Bim表达虽有上调趋势,但未出现统计学差异(P>0.05)。以上结果提示,长期大量吸烟可激活线粒体凋亡通路,促使睾丸组织的不可逆性凋亡损伤。这为进一步探讨吸烟所致男性生殖损伤的分子机制提供了科学依据。
关键词
香烟烟雾暴露
睾丸
细胞凋亡
线粒体凋亡通路
Keywords
cigarette smoking exposure
testis
apoptosis
mitochondrial apoptosis pathway
分类号
R114 [医药卫生—卫生毒理学]
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1
miRNA-138-5p靶向调控胱天蛋白酶3减缓吸烟所致睾丸支持细胞TM4细胞凋亡
徐华
买尔哈巴·阿不力孜
赵婉竹
何丽娟
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
5
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下载PDF
职称材料
2
线粒体凋亡通路参与香烟烟雾暴露所致的大鼠睾丸凋亡
何丽娟
买尔哈巴·阿不力孜
张晨
仲春雪
李琳琳
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
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