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猴源轮状病毒SA11株Balb/c乳鼠动物模型的建立
1
作者
乔洪图
周艳
+5 位作者
尹娜
陈林林
刘洋
苏婷
孙茂盛
李鸿钧
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期22-26,共5页
建立轮状病毒(rotavirus,RV) SA-11株Balb/c乳鼠动物模型,研究其发病机制,为后续疫苗保护性评价奠定基础。用不同剂量的SA11毒株单次灌胃感染7 d龄的Balb/c乳鼠,于感染后不同时间点观察其腹泻、活动能力及精神状态等生理指标,并解剖乳鼠...
建立轮状病毒(rotavirus,RV) SA-11株Balb/c乳鼠动物模型,研究其发病机制,为后续疫苗保护性评价奠定基础。用不同剂量的SA11毒株单次灌胃感染7 d龄的Balb/c乳鼠,于感染后不同时间点观察其腹泻、活动能力及精神状态等生理指标,并解剖乳鼠,取其心、肝、脾、肺、小肠及肾等组织。免疫组化和免疫荧光检测轮状病毒抗原分布,HE染色观察小肠形态学改变,组织细胞原位凋亡检测观察攻毒后小肠绒毛细胞的凋亡情况。研究发现,高剂量和中剂量攻毒组在攻毒24 h后全组乳鼠即可发生明显腹泻,对照组和低剂量组乳鼠无腹泻发生。攻毒72 h后解剖乳鼠,高、中剂量攻毒组的乳鼠肠道可见明显充血及肠胀气,病理切片HE染色显示小肠绒毛发生大量空泡变性及小肠绒毛顶端破损,小肠绒毛原位凋亡检测可见其顶端细胞发生大量凋亡,免疫荧光检测发现在乳鼠的小肠绒毛顶端及肾脏的肾小球位置均有RV抗原分布。成功构建了猴源轮状病毒SA11株Balb/c乳鼠动物模型,研究发现轮状病毒除感染乳鼠小肠绒毛导致其病变破损发生腹泻外,还可感染肾脏等肠道外器官,引起肠道外感染。
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关键词
轮状病毒
动物模型
Balb/c乳鼠
发病机制
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职称材料
恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究
2
作者
刘雅琳
周艳
+4 位作者
耿盼盼
解裕萍
乔洪图
孙茂盛
李鸿钧
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2017年第3期1-5,共5页
构建携带miR-125a-3p过表达与抑制表达shRNA的慢病毒,研究miR-125a-3p对轮状病毒感染乳鼠导致的腹泻的影响,为进一步研究miR-125a-3p对轮状病毒增殖过程中的影响及探究其机制提供前期研究基础。设计miR-125a-3p前体序列及其反向互补序列...
构建携带miR-125a-3p过表达与抑制表达shRNA的慢病毒,研究miR-125a-3p对轮状病毒感染乳鼠导致的腹泻的影响,为进一步研究miR-125a-3p对轮状病毒增殖过程中的影响及探究其机制提供前期研究基础。设计miR-125a-3p前体序列及其反向互补序列,与慢病毒骨架质p LVshRNA-EGFP(2A)Puro载体进行酶切连接,构建过表达与抑制表达miR-125a-3p的慢病毒表达载体。利用HEK293Ta细胞包装慢病毒颗粒,测定病毒滴度后,将获得的miR-125a-3p过表达慢病毒颗粒感染MA104细胞和灌胃感染乳鼠,检测miR-125a-3p的表达。同时对乳鼠进行轮状病毒攻毒试验,观察腹泻情况。研究成功构建了过表达及抑制miR-125a-3p表达的慢病毒载体,获得高效的过表达及抑制miR-125a-3p的慢病毒颗粒,成功感染MA104细胞,以及在乳鼠小肠组织有表达。同时发现miR-125a-3p过表达慢病毒感染乳鼠后对轮状病毒引起的腹泻有明显的抑制作用。
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关键词
miR-125a-3p
慢病毒
过表达载体
抑制表达载体
乳鼠
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职称材料
题名
猴源轮状病毒SA11株Balb/c乳鼠动物模型的建立
1
作者
乔洪图
周艳
尹娜
陈林林
刘洋
苏婷
孙茂盛
李鸿钧
机构
中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期22-26,共5页
基金
中国医学科学院医学与健康科技创新工程协同创新团队项目(2016-I2M-3-026)
云南省应用基础研究计划项目(2016FB034)
云南省科技计划项目(2014BC008)。
文摘
建立轮状病毒(rotavirus,RV) SA-11株Balb/c乳鼠动物模型,研究其发病机制,为后续疫苗保护性评价奠定基础。用不同剂量的SA11毒株单次灌胃感染7 d龄的Balb/c乳鼠,于感染后不同时间点观察其腹泻、活动能力及精神状态等生理指标,并解剖乳鼠,取其心、肝、脾、肺、小肠及肾等组织。免疫组化和免疫荧光检测轮状病毒抗原分布,HE染色观察小肠形态学改变,组织细胞原位凋亡检测观察攻毒后小肠绒毛细胞的凋亡情况。研究发现,高剂量和中剂量攻毒组在攻毒24 h后全组乳鼠即可发生明显腹泻,对照组和低剂量组乳鼠无腹泻发生。攻毒72 h后解剖乳鼠,高、中剂量攻毒组的乳鼠肠道可见明显充血及肠胀气,病理切片HE染色显示小肠绒毛发生大量空泡变性及小肠绒毛顶端破损,小肠绒毛原位凋亡检测可见其顶端细胞发生大量凋亡,免疫荧光检测发现在乳鼠的小肠绒毛顶端及肾脏的肾小球位置均有RV抗原分布。成功构建了猴源轮状病毒SA11株Balb/c乳鼠动物模型,研究发现轮状病毒除感染乳鼠小肠绒毛导致其病变破损发生腹泻外,还可感染肾脏等肠道外器官,引起肠道外感染。
关键词
轮状病毒
动物模型
Balb/c乳鼠
发病机制
Keywords
rotavirus
animal model
Balb/c neonatal mice
pathogenesis
分类号
R512.5 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究
2
作者
刘雅琳
周艳
耿盼盼
解裕萍
乔洪图
孙茂盛
李鸿钧
机构
中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2017年第3期1-5,共5页
基金
十二五重大新药创制(2014ZX09102041004)
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目(2016-I2M)
+1 种基金
云南省应用基础研究计划项目(2016FB034)
云南省科技计划项目(2014BC008)
文摘
构建携带miR-125a-3p过表达与抑制表达shRNA的慢病毒,研究miR-125a-3p对轮状病毒感染乳鼠导致的腹泻的影响,为进一步研究miR-125a-3p对轮状病毒增殖过程中的影响及探究其机制提供前期研究基础。设计miR-125a-3p前体序列及其反向互补序列,与慢病毒骨架质p LVshRNA-EGFP(2A)Puro载体进行酶切连接,构建过表达与抑制表达miR-125a-3p的慢病毒表达载体。利用HEK293Ta细胞包装慢病毒颗粒,测定病毒滴度后,将获得的miR-125a-3p过表达慢病毒颗粒感染MA104细胞和灌胃感染乳鼠,检测miR-125a-3p的表达。同时对乳鼠进行轮状病毒攻毒试验,观察腹泻情况。研究成功构建了过表达及抑制miR-125a-3p表达的慢病毒载体,获得高效的过表达及抑制miR-125a-3p的慢病毒颗粒,成功感染MA104细胞,以及在乳鼠小肠组织有表达。同时发现miR-125a-3p过表达慢病毒感染乳鼠后对轮状病毒引起的腹泻有明显的抑制作用。
关键词
miR-125a-3p
慢病毒
过表达载体
抑制表达载体
乳鼠
Keywords
miR-125a-3p
lentivirus vector
overexpression vector
suppression vector
suckling mice
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴源轮状病毒SA11株Balb/c乳鼠动物模型的建立
乔洪图
周艳
尹娜
陈林林
刘洋
苏婷
孙茂盛
李鸿钧
《生物学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
恒河猴miR-125a-3p慢病毒载体的构建、鉴定以及功能研究
刘雅琳
周艳
耿盼盼
解裕萍
乔洪图
孙茂盛
李鸿钧
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2017
0
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