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不同环境和营养条件对捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌生长、产孢及几丁质酶表达的影响 被引量:1
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作者 孙殿明 张慧梅 +5 位作者 李柠杏 孙焱森 李若冰 乔军 才学鹏 孟庆玲 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期709-718,共10页
[目的]研究温度、pH和不同营养条件对捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌(Arthrobotrys conoides)生长及产孢特性的影响,分析其在碳氮饥饿条件下几丁质酶的表达水平,优化该菌的培养条件,为该菌的扩大培养提供参考依据。[方法]将圆锥节丛孢菌AC-s... [目的]研究温度、pH和不同营养条件对捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌(Arthrobotrys conoides)生长及产孢特性的影响,分析其在碳氮饥饿条件下几丁质酶的表达水平,优化该菌的培养条件,为该菌的扩大培养提供参考依据。[方法]将圆锥节丛孢菌AC-shz1菌株接种于YPSSA培养基,分别置于不同温度(15、20、25、30和35℃)、pH(5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5和8.0)、碳源(果糖、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉、纤维素、几丁质)、氮源(甘氨酸、苯丙氨酸、蛋白胨、酵母粉、硫酸铵、尿素)和碳氮比(1∶1、5∶1、10∶1、20∶1、40∶1)环境条件下进行培养,观察并记录菌丝的生长速度及形态,测定其产孢能力;在碳氮源饥饿条件下,采用实时荧光定量PCR方法对4种几丁质酶基因的表达水平进行分析。[结果]圆锥节丛孢菌在温度15~30℃均能生长,其中以25℃时菌丝生长最快且产孢能力最强;在pH为6.5~7.5时菌丝生长良好,其中以pH 7.0时产孢能力最强。圆锥节丛孢菌最适菌丝生长和产孢碳源为葡萄糖和蔗糖,其中含葡萄糖的培养基产孢量最高;最适氮源为酵母粉和蛋白胨,含酵母粉的培养基产孢量最高,以葡萄糖和酵母粉为碳氮源的最适碳氮比为5∶1。与对照组相比,在碳饥饿条件下,捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌几丁质酶-14(AC-14,P<0.01)和捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌几丁质酶-190(AC-190,P>0.05)基因转录水平上调,捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌几丁质酶-379(AC-379,P>0.05)和捕食线虫真菌圆锥节丛孢菌几丁质酶-483(AC-483,P<0.01)基因转录水平下调;在氮饥饿条件下,上述4种几丁质酶基因转录水平均极显著下调(P<0.01)。[结论]菌丝生长和产孢最适温度为25℃,最适pH为7.0,最适碳氮源分别为葡萄糖和酵母粉,最适碳氮比为5∶1。本研究结果为进一步研发具有高效的捕食线虫真菌生物防控制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 捕食线虫真菌 圆锥节丛孢菌 温度 pH 碳氮源 几丁质酶
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犬Ⅰ型腺病毒TN株的分离鉴定 被引量:5
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作者 乔军 孟庆龄 +2 位作者 夏咸柱 何宏彬 范泉水 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期97-99,共3页
应用 MDCK细胞采用单层吸附接毒和带毒传代的方法 ,从新疆阿克苏送检的犬粪便中分离出 1株犬腺病毒 ,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的 TN株为 1株CAV-
关键词 犬Ⅰ型腺病毒 TN株 分离鉴定
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犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究 被引量:2
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作者 乔军 夏咸柱 +4 位作者 杨松涛 郝峰 高玉伟 郑晓一 黄耕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期412-416,共5页
以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向... 以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞,通过RT-PCR法进行转录水平的检测,并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36 h后就可检测到目的基因的转录;在转染72 h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明,3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答,这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 基因疫苗表达载体 构建 免疫原性
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Serological survey on canine coronavirus antibodies in giant pandas by virus neutralization test 被引量:2
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作者 乔军 夏咸柱 +9 位作者 杨松涛 李德生 胡桂学 高玉伟 孙贺廷 赵忠鹏 谢之景 闫芳 贺文琦 黄耕 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2004年第4期295-297,共3页
In order to survey the infectious situation of canine coronavirus (CCV) in giant panda population, a virus neutralization test detecting specific antibodies against CCV in giant panda抯 sera was established by using t... In order to survey the infectious situation of canine coronavirus (CCV) in giant panda population, a virus neutralization test detecting specific antibodies against CCV in giant panda抯 sera was established by using two-fold dilutions of serum and 100 TCID50 of the virus. The 62 sera samples of giant pandas, which were gathered from zoos and reserve region of Sichuan Province, China were detected. The neutralization antibody titer of 1:4 was recognized as the positive criterion, 8 sera samples were detected to be positive, and the positive rate was 12.9%. The titers of neutralizing antibody ranged from 1:8 to 1:32. It was the first comprehensive investigation on neutralization antibodies against CCV in giant panda population in China. The results of study showed that the infection of CCV in giant panda population was universal, which has posed a threat to the health of giant panda. Therefore, it is incumbent on us to study safe and effective vaccines to protect giant panda against CCV infection. 展开更多
关键词 Serological survey Canine coronavirus Giant panda Neutralization test
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世界纸浆工业全无氯漂白发展概述 被引量:8
5
作者 乔军 李忠正 《林产工业》 北大核心 1998年第5期5-7,共3页
介绍了世界TCF漂白发展的背景,概述了TCF漂白的一般程序及技术发展趋势。
关键词 TCF 过氧化氢漂白 臭氧漂白 全无氯漂白 漂白
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用半套式PCR检测犬瘟热病毒的研究 被引量:6
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作者 乔军 孟庆龄 +2 位作者 陈瑛 何宏彬 夏咸柱 《中国动物检疫》 CAS 2000年第6期24-26,共3页
根据GenBanK中Barrett报道的犬瘟热病毒Onderstepoort弱毒株的附着或血凝蛋白基因序列,设计合成了能扩增760bp基因片段的半套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总RNA进行反转录,再以此产物进行半套式PCR扩增,并筛选出... 根据GenBanK中Barrett报道的犬瘟热病毒Onderstepoort弱毒株的附着或血凝蛋白基因序列,设计合成了能扩增760bp基因片段的半套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总RNA进行反转录,再以此产物进行半套式PCR扩增,并筛选出最佳PCR扩增。结果经半套式PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物,并且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明,此法能扩增出CDV强毒细胞培养物(毒价为10-5.8TCID50/0.1mL)10-6稀释的反转录产物,远高于常规PCR。经初步应用表明,此法可用于天瘟热的临床诊断和实验研究。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 半套式PCR 检测方法
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降低茄子茎段组培染菌率的初步研究 被引量:2
7
作者 乔军 石瑶 +5 位作者 连勇 刘富中 陈钰辉 张映 李素文 王利英 《中国蔬菜》 北大核心 2016年第7期64-67,共4页
茄子茎段组培容易染菌,为了测试15种灭菌方法的灭菌效果,选取紫圆茄、紫长茄、绿茄3种类型茄子品种,根据染菌率和植株再生成活率判断最佳灭菌方法。结果表明,不同类型茄子适用的灭菌方法不同。紫圆茄茎段适宜的灭菌方法为:2%Na Cl O浸泡... 茄子茎段组培容易染菌,为了测试15种灭菌方法的灭菌效果,选取紫圆茄、紫长茄、绿茄3种类型茄子品种,根据染菌率和植株再生成活率判断最佳灭菌方法。结果表明,不同类型茄子适用的灭菌方法不同。紫圆茄茎段适宜的灭菌方法为:2%Na Cl O浸泡10min,再用0.1%Hg Cl2浸泡10min;紫长茄茎段适宜的灭菌方法为:4%Na Cl O浸泡10min,再用0.3%Hg Cl2浸泡10min;绿茄茎段适宜的灭菌方法为:6%Na Cl O浸泡10min,再用0.1%Hg Cl2浸泡10min。绿茄茎段保存试验结果表明,低温保存有利于降低茄子茎段组培染菌率,其中最适保存条件为5℃下保存3d以内,染菌率在20%以下,再生成活率保持在60%左右,可以满足植株再生要求。 展开更多
关键词 茄子 茎段 组培 染菌率
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马尾松硫酸盐浆过氧化氢强化氧漂的研究 被引量:3
8
作者 乔军 王海燕 李忠正 《林产工业》 北大核心 1999年第3期11-13,共3页
探讨了预处理和过氧化氢强化氧漂对氧漂浆性能的影响,结果表明:采用酶、螯合预处理能较多地提高氧漂的选择性和脱木素程度,而对漂后浆的白度影响较小。在氧漂过程中添加过氧化氢能大幅度提高预处理浆的白度,而浆的卡伯值和粘度下降... 探讨了预处理和过氧化氢强化氧漂对氧漂浆性能的影响,结果表明:采用酶、螯合预处理能较多地提高氧漂的选择性和脱木素程度,而对漂后浆的白度影响较小。在氧漂过程中添加过氧化氢能大幅度提高预处理浆的白度,而浆的卡伯值和粘度下降较小。 展开更多
关键词 硫酸盐浆 预处理 过氧化氢 氧漂 漂白
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果菜类蔬菜早熟性育种研究进展 被引量:3
9
作者 乔军 石瑶 王利英 《中国蔬菜》 北大核心 2015年第5期14-17,共4页
早熟性是蔬菜作物育种的重要指标,对农业增产和农民增收意义重大。本文对果菜类蔬菜早熟性评价指标,早熟性相关农艺性状和早熟性育种方法三个方面的研究进展进行综述,并对基因工程辅助早熟育种进行了展望。
关键词 果菜类蔬菜 早熟性 育种 综述
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用套式PCR法检测犬冠状病毒的研究 被引量:1
10
作者 乔军 孟庆玲 +2 位作者 贾桂珍 何宏彬 夏咸柱 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2000年第2期64-67,共4页
根据 Gen Bank中 Wesseling发表的犬冠状病毒 K378株纤突蛋白基因序列 ,设计合成了能扩增 372 bp基因片段的套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物进行套式 PCR扩增 ,并筛选出最佳套式 PCR扩... 根据 Gen Bank中 Wesseling发表的犬冠状病毒 K378株纤突蛋白基因序列 ,设计合成了能扩增 372 bp基因片段的套式引物。用异硫氰酸胍—酚—仿一步抽取法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物进行套式 PCR扩增 ,并筛选出最佳套式 PCR扩增条件。结果经套式 PCR扩增能得到与设计大小相同的产物 ,并且不扩增犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬 型腺病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验表明 ,此法能扩增出犬冠状病毒强毒细胞培养物 (毒价为 1 0 -4.2 TCID5 0 / 0 .1 ml) 1 0 -6稀释的反转录产物 ,远高于常规 RT PCR。经初步应用表明 。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 套式PCR法 临床诊断
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盘磨机种类及打浆酶预处理对打浆能耗的影响
11
作者 乔军 吴朝军 《中国造纸》 CAS 北大核心 2014年第11期69-71,共3页
主要分析了盘磨机种类及打浆酶预处理对漂白针叶木浆(NBKP)和漂白阔叶木浆(LBKP)打浆能耗的影响。结果表明,对于NBKP和LBKP浆,在达到相同的打浆效果时,使用柱形磨打浆均比使用双盘磨打浆的单位打浆总能耗低;打浆酶和柱形磨相结合处理NBK... 主要分析了盘磨机种类及打浆酶预处理对漂白针叶木浆(NBKP)和漂白阔叶木浆(LBKP)打浆能耗的影响。结果表明,对于NBKP和LBKP浆,在达到相同的打浆效果时,使用柱形磨打浆均比使用双盘磨打浆的单位打浆总能耗低;打浆酶和柱形磨相结合处理NBKP浆后,其单位打浆总能耗比只使用柱形磨的大幅降低。 展开更多
关键词 打浆酶 盘磨机 打浆能耗
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卡拉库尔羊猝死症病原的分离与鉴定
12
作者 乔军 孟庆龄 +1 位作者 陈创夫 郭新怀 《中国草食动物》 2001年第6期42-44,共3页
通过细菌培养 ,从新疆阿克苏托海乡种羊场发生猝死症的卡拉库尔病死羊肾脏中分离出细菌 1株 ,并对其进行了形态学观察 ,理化特性、血清学和动物感染试验。结果表明 。
关键词 卡拉库尔羊 猝死症 病原 分离 鉴定 D型魏氏梭菌
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剥离型聚苯乙烯/蒙脱土纳米复合材料的制备及性能研究
13
作者 乔军 黄向红 《科技通报》 北大核心 2014年第1期15-17,58,共4页
采用一锅乳液聚合制备了完全剥离型聚苯乙烯/蒙脱土纳米复合材料,对材料进行了XRD,TEM,TGA表征。XRD和TEM表征充分说明蒙脱土有序结构被打破,以无序的单片层分散在聚苯乙烯基体中,形成完全剥离型聚苯乙烯/蒙脱土纳米复合材料。TGA表明... 采用一锅乳液聚合制备了完全剥离型聚苯乙烯/蒙脱土纳米复合材料,对材料进行了XRD,TEM,TGA表征。XRD和TEM表征充分说明蒙脱土有序结构被打破,以无序的单片层分散在聚苯乙烯基体中,形成完全剥离型聚苯乙烯/蒙脱土纳米复合材料。TGA表明有机蒙脱土的引入增强了聚苯乙烯的热稳定性能,使复合材料热分解温度提高近50℃。 展开更多
关键词 剥离型 聚苯乙烯 蒙脱土纳米复合材料 热稳定性
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兔羟类固醇磺基转移酶AST-RB_2的分子克隆、表达和酶学特性
14
作者 乔军 陈创夫 《动物医学进展》 CSCD 2000年第1期55-57,共3页
胞质磺基转移酶至少有三个基因家族组成 ,最近纯化到的一个兔羟类固醇磺基转移酶 AST- RB2 ( ST2 A8) ,对羟类固醇和胺类表现出很高的催化活性。为了鉴别此酶 ,兔的 c DNA文库用抗 AST- RB2 抗体筛选阳性克隆。根据纯化的 AST- RB2 氨... 胞质磺基转移酶至少有三个基因家族组成 ,最近纯化到的一个兔羟类固醇磺基转移酶 AST- RB2 ( ST2 A8) ,对羟类固醇和胺类表现出很高的催化活性。为了鉴别此酶 ,兔的 c DNA文库用抗 AST- RB2 抗体筛选阳性克隆。根据纯化的 AST- RB2 氨基酸序列 ,可判定筛选的 c DNA克隆为编码 AST- RB2 的基因。克隆的 c DNA与其它哺乳动物的羟类固醇磺基转移酶 ( ST2 )在氨基酸水平有较高的同源性 ( 5 8%~ 6 8% ) ,但与芳香磺基转移酶 ( ST1 )的同源性较低 ( <37% )。在大肠杆菌中表达的蛋白质可催化典型的 ST2 底物硫酸化 ,根据 ST2 A8的基本结构及底物特异性可判定其属于 ST2 家族。在大肠杆菌中表达的 ST2 A8的细胞定位 (胞质 /不溶性片段 )也与鼠 ST2 A1和 ST2 A2有明显的不同。ST2 A8对石胆酸没有催化活性 ,但对脱氧表雄酮和睾酮却表现出极高的催化活性 ,由此表明 ST2 A各型 ( ST2 A1 ,ST2 A2、ST2 A3、ST2 A8)的内源性底物特异性有明显差异。 展开更多
关键词 羟类固醇 磺基转移酶 分子克隆 酶学特性 ST2
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中国最大的民营造纸企业——太阳纸业:深化结构调整 促进产业升级
15
作者 乔军 《中华纸业》 CAS 2014年第13期34-35,共2页
山东太阳纸业股份有限公司是中国最大的民营造纸企业,涂布纸龙头生产企业。现在造纸行业进入了微利时代,太阳纸业积极转变发展模式、推动企业升级转型,具体做法概括如下:
关键词 山东太阳纸业股份有限公司 造纸企业 产业升级 结构调整 民营 中国 生产企业 造纸行业
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抗温抗盐聚合物降滤失剂的研制及其作用机制 被引量:29
16
作者 黄维安 邱正松 +2 位作者 乔军 江琳 李公让 《西南石油大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期129-134,共6页
针对当前国内外超高温水基钻井液滤失性及高温稳定性调控难点,新研制出抗240℃高温、抗盐聚合物降滤失剂HTP–1。热重分析表明,HTP–1分子链热解温度达320℃以上,热稳定性强;在各种钻井液基浆中的降滤失作用评价结果表明,HTP–1在钻井... 针对当前国内外超高温水基钻井液滤失性及高温稳定性调控难点,新研制出抗240℃高温、抗盐聚合物降滤失剂HTP–1。热重分析表明,HTP–1分子链热解温度达320℃以上,热稳定性强;在各种钻井液基浆中的降滤失作用评价结果表明,HTP–1在钻井液中具有优异的抗高温(240℃)抗盐(饱和)、抗钙(0.5%)降滤失作用,优于国内外同类产品。通过吸附实验、粒度分布测量、胶体稳定性测试和泥饼压缩性测试等手段,探讨了HTP–1的降滤失作用机理:(1)在粘土颗粒上的吸附量大且吸附牢固,受矿化度、pH值和温度的影响小;(2)老化(240℃/16 h)前后均能明显改善泥饼可压缩性,降低其渗透率;(3)增强钻井液体系的胶体稳定性,改善其中的颗粒粒径级配。 展开更多
关键词 深井 高温 水基钻井液 降滤失剂 作用机制
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胜利油田钻井油气层保护分析与认识 被引量:20
17
作者 韩来聚 薛玉志 +2 位作者 李公让 乔军 刘保锋 《油气地质与采收率》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期1-4,共4页
油气层保护是石油工程技术永恒的主题。简述了中外钻井油气层保护技术的发展历程、技术现状和发展趋势,重点分析了胜利油田在钻井油气层保护方面针对不同类型储层采取的技术及效果,剖析了目前在基础研究、钻井工艺、完井工艺及技术管理... 油气层保护是石油工程技术永恒的主题。简述了中外钻井油气层保护技术的发展历程、技术现状和发展趋势,重点分析了胜利油田在钻井油气层保护方面针对不同类型储层采取的技术及效果,剖析了目前在基础研究、钻井工艺、完井工艺及技术管理等方面存在的差距,并对胜利油田油气层保护工作提出了建议。 展开更多
关键词 油气层保护 钻井 钻井液 完井 欠平衡 胜利油田
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奶牛源金黄色葡萄球菌新疆流行株的耐药特性、毒力基因及分子分型 被引量:18
18
作者 孟丹 孟庆玲 +5 位作者 乔军 蔡扩军 王登峰 马帅 伍晔晖 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期181-194,共14页
旨在了解引起奶牛乳房炎和子宫内膜炎的金黄色葡萄球菌(SA)新疆流行株的耐药性、毒力基因及其分子流行病学特征。对2014—2016年新疆地区155株SA奶牛临床分离株的耐药表型进行分析,并对耐甲氧西林SA(MRSA)进行鉴定;通过PCR技术对SA的耐... 旨在了解引起奶牛乳房炎和子宫内膜炎的金黄色葡萄球菌(SA)新疆流行株的耐药性、毒力基因及其分子流行病学特征。对2014—2016年新疆地区155株SA奶牛临床分离株的耐药表型进行分析,并对耐甲氧西林SA(MRSA)进行鉴定;通过PCR技术对SA的耐药基因、毒力基因进行检测及SCCmec、MLST分子分型。结果在155株SA中检出22株MRSA,检出率为14.2%;MRSA流行株的耐药性明显高于甲氧西林敏感SA(MSSA);不同的毒力基因在MSSA和MRSA中的检出率有所差异;SCCmecⅠ为新疆地区SA主要基因型;MLST分型共检出14种ST型,分别为ST188、ST584、ST9、ST805、ST2373、ST968、ST2139、ST1、ST2700、ST903、ST2454、ST2990、ST63、STX,其中ST1和ST9检出率相对较高,在MSSA菌株中ST9型的检出率最高,MRSA菌株中ST1检出率最高。研究表明,新疆地区奶牛源SA中主要流行株为MSSA,但MRSA耐药性更强,且毒力基因分布多样,ST9为MSSA流行株的主要基因型,ST1-SCCmecⅠ为MRSA流行株的主要基因型。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐药特性 毒力基因 分子分型
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高中数学后进生的形成原因及转化对策
19
作者 乔军 《数理化解题研究》 2023年第6期59-61,共3页
如何转化后进生,是所有教师面临的难题.对于高中数学学科来说,学困生占据了一定比例,他们在学习中表现出积极性不高、信心不足等情况,不仅影响教学工作的有效推进,也制约了学生的全面发展,背离了新课改的要求.鉴于此,如何做好后进生的... 如何转化后进生,是所有教师面临的难题.对于高中数学学科来说,学困生占据了一定比例,他们在学习中表现出积极性不高、信心不足等情况,不仅影响教学工作的有效推进,也制约了学生的全面发展,背离了新课改的要求.鉴于此,如何做好后进生的转化工作,实现所有学生均取得长足进步,全面推动教学工作的顺利开展,已成为一线教师关心的问题.本文以此为出发点,结合课堂教学实践,进行详细地探究. 展开更多
关键词 高中数学 后进生 形成原因 转化
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布氏杆菌和结核杆菌二重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:17
20
作者 孟茹 陈创夫 +4 位作者 张辉 乔军 任艳 王正荣 蒋松 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1012-1017,共6页
本试验旨在利用二重实时荧光定量PCR技术建立鉴别诊断布氏杆菌和结核杆菌的方法。通过筛选布氏杆菌omp10、omp19、omp17、omp25、omp31和结核杆菌cfp10基因的最佳引物组合,建立二重实时定量PCR鉴别诊断方法,对该方法进行稳定性、特异性... 本试验旨在利用二重实时荧光定量PCR技术建立鉴别诊断布氏杆菌和结核杆菌的方法。通过筛选布氏杆菌omp10、omp19、omp17、omp25、omp31和结核杆菌cfp10基因的最佳引物组合,建立二重实时定量PCR鉴别诊断方法,对该方法进行稳定性、特异性和敏感性试验,并对临床样品及模拟样品进行检测。经筛选布氏杆菌的omp25基因与结核杆菌cfp10基因引物组合最佳,该二重实时荧光定量PCR方法中布氏杆菌Tm值为88~89℃,结核杆菌Tm值为90~91℃,对其他供试的菌株则为阴性;该方法对布氏杆菌的DNA最低检出量为20拷贝.μL-1,结核杆菌为50拷贝.μL-1,两病原都存在时为100拷贝.μL-1,比常规PCR高100倍。利用所建立的二重荧光定量PCR方法及常规PCR,对24份结核痰样、11份布氏杆菌基因粗提物及30份模拟奶样进行检测,符合率为100%。本试验建立的方法可用于同时检测布氏杆菌和结核杆菌,并且具有良好的特异性、敏感性和稳定性。 展开更多
关键词 布氏杆菌 结核杆菌 二重实时荧光定量PCR
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