海洋来源纤维素酶CelL7的异源表达、酶学表征及生物膜清除作用

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作者 翁晓敏 胡诗琦 +2 位作者 蔡佳琪 洪健渠 严芬 《食品科学》 北大核心 2025年第6期124-132,共9页

从海洋细菌Zobellia sp.B2中克隆新型纤维素酶CelL7基因,同时添加碳水化合物结合模块家族3(carbohydrate-binding module family 3,CBM3)基因构建融合基因CelL7-CBM3,并实现其编码的融合蛋白CelL7-CBM3在大肠杆菌BL21中实现异源表达,利... 从海洋细菌Zobellia sp.B2中克隆新型纤维素酶CelL7基因,同时添加碳水化合物结合模块家族3(carbohydrate-binding module family 3,CBM3)基因构建融合基因CelL7-CBM3,并实现其编码的融合蛋白CelL7-CBM3在大肠杆菌BL21中实现异源表达,利用亲和层析柱获得纯化蛋白。CelL7基因序列全长1 077 bp,编码358个氨基酸残基,理论蛋白分子质量为40.39 kDa。CelL7和CelL7-CBM3的比酶活力分别为2 249.81 U/mg和2 915.75 U/mg。CelL7与CelL7-CBM3的最适反应温度均为50℃,最适pH值分别为5.0和5.5,Mn^(2+)和Fe^(2+)能激活CelL7,Cu^(2+)抑制CelL7的活力,CelL7可降解羧甲基纤维素钠、纤维二糖和木聚糖。以羧甲基纤维素钠为底物时,CelL7-CBM3的米氏常数(K_(m))为11.70 mg/mL,较CelL7的K_(m)(13.23 mg/mL)有所降低,表明添加结合结构域后的融合酶对羧甲基纤维素钠的亲和力增强;最大反应速率(V_(max))为175.44 mg/(mL·min),催化常数(K_(cat))为2.78 s^(-1),K_(cat)/K_(m)为0.24 mL/(mg·s),与CelL7相比变化不大。生物膜清除实验表明,10.0~60.0μg/mL的CelL7和30.0~60.0μg/mL CelL7-CBM3能够有效分散生物膜,减少生物膜量。 展开更多

关键词 纤维素酶 异源表达 结构域融合 生物膜清除

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使用补偿非参数CUSUM方法检测DDoS攻击 被引量：13

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作者 严芬 陈轶群 +1 位作者 黄皓 殷新春 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2008年第6期126-132,共7页

提出了一种有效的、在攻击目的端检测DDoS攻击的方法。研究目的是为了在花费较少代价的情况下,早期检测到攻击的存在,记录可疑的攻击包。对基于TCP协议的DDoS攻击而言,从受害端进行观察,会发现很多没有确认的TCP报文段。在每个时间间隔... 提出了一种有效的、在攻击目的端检测DDoS攻击的方法。研究目的是为了在花费较少代价的情况下,早期检测到攻击的存在,记录可疑的攻击包。对基于TCP协议的DDoS攻击而言,从受害端进行观察,会发现很多没有确认的TCP报文段。在每个时间间隔?t,计算未确认的报文段个数与总报文段个数的比值,形成基于时间的统计序列,再用经过改进的非参数递归CUSUM(cumulative sum)算法在线、快速检测DDoS攻击,并在检测的同时记录可疑的攻击包。经实验验证,该检测算法不仅快速,而且具有更低的误报率,能够适应更复杂的网络检测环境。另外,还能为攻击的分析取证和追踪提供一定帮助。 展开更多

关键词 信息安全 DDOS 非参数CUSUM算法 攻击检测 TCP 未确认报文段

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高产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化 被引量：17

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作者 严芬 连燕萍 +3 位作者 杨光 王培松 吴晨烁 陈宁辛 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期287-292,共6页

采用透明圈初筛方法得到一株产褐藻胶裂解酶菌株B1,通过形态观察和16S r DNA序列分析鉴定该菌株为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)。通过单因素实验对菌株B1产酶条件进行优化,最佳培养基组成为:褐藻酸钠1%,氯化铵0.2%,Na Cl 3%,K... 采用透明圈初筛方法得到一株产褐藻胶裂解酶菌株B1,通过形态观察和16S r DNA序列分析鉴定该菌株为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)。通过单因素实验对菌株B1产酶条件进行优化,最佳培养基组成为:褐藻酸钠1%,氯化铵0.2%,Na Cl 3%,KH2PO40.02%,Mg SO40.01%,Ca Cl2·2H2O 0.1%,初始p H5.5。最佳的培养条件:装液量75 m L,培养温度30℃,摇床转速180 r/min,培养22 h。在该条件下,褐藻胶裂解酶最高酶活力提高到71.94 U/m L,提高了72.11%。 展开更多

关键词 褐藻胶裂解酶 假交替单胞菌 筛选 鉴定 培养条件

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基于MLL-AT的网络攻击建模方法研究 被引量：5

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作者 严芬 殷新春 黄皓 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2011年第3期115-124,共10页

研究了攻击树建模攻击的方法,主要研究目的是如何有效地用攻击树建模和表示多阶段网络攻击。对传统攻击树进行扩充和改进,重新定义了攻击节点,量化了叶子节点的攻击风险,提出了一种用MLL-AT(多级分层攻击树)建模攻击的思想和方法,并给... 研究了攻击树建模攻击的方法,主要研究目的是如何有效地用攻击树建模和表示多阶段网络攻击。对传统攻击树进行扩充和改进,重新定义了攻击节点,量化了叶子节点的攻击风险,提出了一种用MLL-AT(多级分层攻击树)建模攻击的思想和方法,并给出了一种基于攻击树的MLL-ATDL攻击描述语言。改进后的攻击树能更准确地建模攻击,尤其是表示多阶段网络攻击,并可以用于评估系统风险,区分不同攻击序列对系统的不同安全威胁程度。 展开更多

关键词 网络安全 网络攻击 攻击建模 攻击树 攻击描述语言

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产普鲁兰酶海单胞菌的分离鉴定及发酵条件优化 被引量：3

5

作者 严芬 杨光 +2 位作者 连燕萍 王培松 吴晨烁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期40-44,共5页

以普鲁兰糖为唯一碳源,利用平板涂布法从盐湖中分离到1株产普鲁兰酶的细菌YH-6,结合菌株形态特征和16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为海单胞菌(Oceanimonas sp.)。通过单因素试验对发酵培养基以及发酵条件进行优化,优化后的培养基组分(... 以普鲁兰糖为唯一碳源,利用平板涂布法从盐湖中分离到1株产普鲁兰酶的细菌YH-6,结合菌株形态特征和16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为海单胞菌(Oceanimonas sp.)。通过单因素试验对发酵培养基以及发酵条件进行优化,优化后的培养基组分(g/L)为:玉米淀粉15.0,酵母膏10.0,KH_2PO_41.0,FeSO_4·7H_2O0.01,NaCl 26.5,MgCl_2·7H_O 2.1,KCl 0.9,CaCl_·H_2O 1.2,MgSO_4·7H_2O 4.2,pH 7.0;最佳培养条件为:发酵温度30℃,转速200 r/min,发酵时间为36 h。优化后的普鲁兰酶的活力可达1.85 U/mL,比优化前的1.28 U/mL提高了44.53%。 展开更多

关键词 普鲁兰酶 海单胞菌(Oceanimonas sp.) 鉴定 发酵条件

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硬蜱常用分子分类技术研究进展 被引量：5

6

作者 杨亚 刘进辉 +2 位作者 伏健 严芬 程天印 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期98-100,共3页

蜱类系统分类学研究已经进入分子阶段,与传统的形态学、生物学鉴定相比,无疑更加客观准确,建立系统进化树更能全面反映其亲缘关系,极大地提高了鉴定效率与可信度。论文总结了近年来应用分子生物学技术鉴定硬蜱的主要方法,包括核酸序列... 蜱类系统分类学研究已经进入分子阶段,与传统的形态学、生物学鉴定相比,无疑更加客观准确,建立系统进化树更能全面反映其亲缘关系,极大地提高了鉴定效率与可信度。论文总结了近年来应用分子生物学技术鉴定硬蜱的主要方法,包括核酸序列分析、随机扩增DNA多态性分析、限制性片段长度多态性分析。随着分子生物学和现代统计学的广泛应用,蜱类的鉴定将更加依赖现代分类学方法。 展开更多

关键词 硬蜱 分子生物学技术 分类

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结合气候的建筑设计教学研究——夏热地区铁路旅客站毕业设计专题

7

作者 李传成 严芬 苏伟乐 《新建筑》 2012年第6期106-109,共4页

重点介绍了结合气候的建筑设计教学,论述了气候与建筑设计结合的目的与意义。通过对三届建筑学本科生的毕业设计过程进行解读,具体分析了该专题研究从题目选择到教学过程中的设计方法及教学思路框架等一系列问题,充分展现了结合气候的... 重点介绍了结合气候的建筑设计教学,论述了气候与建筑设计结合的目的与意义。通过对三届建筑学本科生的毕业设计过程进行解读,具体分析了该专题研究从题目选择到教学过程中的设计方法及教学思路框架等一系列问题,充分展现了结合气候的被动式设计教学过程。最后展示了部分优秀作品。 展开更多

关键词 建筑设计 毕业设计教学 铁路旅客站 被动式设计

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浅谈人民币反假工作的问题及对策

8

作者 严芬 《武汉金融》 北大核心 2005年第3期34-34,共1页

人民币是我国的法定货币,及时识别、防止伪造货币进入流通领域,严厉打击伪造、贩买、贩运假币的违法犯罪行为,维护人民币的正常流通秩序,是各级金融部门一项长期而艰巨的任务。本文针对人民币反假防伪工作中存在的问题与难点,提出了相... 人民币是我国的法定货币,及时识别、防止伪造货币进入流通领域,严厉打击伪造、贩买、贩运假币的违法犯罪行为,维护人民币的正常流通秩序,是各级金融部门一项长期而艰巨的任务。本文针对人民币反假防伪工作中存在的问题与难点,提出了相应的几点建议。 展开更多

关键词 人民币 反假 对策

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生防菌解淀粉芽孢杆菌抗菌蛋白的研究进展 被引量：15

9

作者 出晓铭 林毅雄 +2 位作者 张珅 严芬 林河通 《包装与食品机械》 CAS 2014年第6期49-54,共6页

生防解淀粉芽孢杆菌具有强烈抑制真菌和细菌的能力,在果蔬采后病害防治方面具有巨大的应用潜力。该文对解淀粉芽孢杆菌产生的抗菌蛋白、蛋白的分离纯化、抑菌机理和生防应用等方面进行了综述,并对其在果蔬采后病害防治应用前景进行了展望。

关键词 解淀粉芽孢杆菌 抗菌蛋白 采后病害 生物防治

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酶解制备褐藻寡糖工艺优化及活性研究 被引量：15

10

作者 陈淑琼 李晓月 +1 位作者 吴晨烁 严芬 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第13期51-56,共6页

为了优化褐藻胶裂解酶酶解褐藻酸钠制备褐藻寡糖的工艺条件,在单因素试验的基础上,运用软件Design-Expert8.0.6设计中心组合试验,以反应体系中还原糖生成量为评价指标,采用响应面分析法确定褐藻胶裂解酶酶解的最优工艺,通过测定2,2'... 为了优化褐藻胶裂解酶酶解褐藻酸钠制备褐藻寡糖的工艺条件,在单因素试验的基础上,运用软件Design-Expert8.0.6设计中心组合试验,以反应体系中还原糖生成量为评价指标,采用响应面分析法确定褐藻胶裂解酶酶解的最优工艺,通过测定2,2'-联氮双-(3-乙基苯并噻唑林-6-磺酸)二铵盐[2,2'-azinobis(3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]自由基的清除能力、抑菌指数和对对虾多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO)活性的影响,检测酶解制备的褐藻寡糖的抗氧化活性和抑菌活性。结果显示最佳工艺条件:酶解时间16h、体系pH值8.4、酶解温度30℃、底物质量浓度8g/L。此条件下,还原糖质量浓度达到1660mg/L。结果显示制备的褐藻寡糖具有较强的清除ABTS^+自由基的能力和抑菌能力,并能有效的抑制对虾多酚氧化酶的活性。 展开更多

关键词 褐藻胶裂解酶 酶水解 褐藻寡糖 响应面法 抑菌能力

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海洋来源褐藻胶裂解酶及其基因B1SM的克隆和表达 被引量：2

11

作者 吴晨烁 李晓月 +1 位作者 秦明珍 严芬 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期77-82,共6页

从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.) B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质。通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-P... 从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.) B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质。通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因(B1SM),将目的基因插入到p GEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli) BL21 (DE3)。结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8. 51,编码蛋白质的理论分子质量为37. 13 k Da。重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8. 0和25℃。该褐藻胶裂解酶在pH 7. 0～9. 0范围内,25℃下保温1 h,仍剩余60%以上活力,pH稳定性较好。在最适pH 8. 0和30℃下保温1 h重组酶仍剩余60%以上活力。该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E. coli BL21(DE3)中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础。 展开更多

关键词 褐藻胶裂解酶 假交替单胞菌 聚合酶链反应

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基于国密SM9的匿名标识广播加密方案

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作者 潘璇 严芬 《信息安全研究》 CSCD 2023年第10期968-979,共12页

标识广播加密将广播加密与标识加密相结合,在具备广播加密特点的同时,避免了耗费大量资源的证书管理工作.为满足我国密码技术自主可控的战略需求,赖建昌等人首次设计了基于我国SM9标识加密算法的高效标识广播加密方案,并给出IND-sID-CP... 标识广播加密将广播加密与标识加密相结合,在具备广播加密特点的同时,避免了耗费大量资源的证书管理工作.为满足我国密码技术自主可控的战略需求,赖建昌等人首次设计了基于我国SM9标识加密算法的高效标识广播加密方案,并给出IND-sID-CPA安全性分析.但目前为止,仍缺失基于SM9的匿名标识广播加密方案的研究,匿名标识广播加密能够有效避免数据接收者具备判断其他接收者是否合法的能力.因此,借鉴He等人的通用匿名标识广播加密方案的构造思想,利用双线性对技术,设计了第1个基于国密SM9的随机谕言模型下IND-nID-CCA2安全和ANO-ID-CCA2安全的匿名标识广播加密方案.该方案更易与当前基于国密SM9标识加密算法的系统相融合.对于所设计方案的安全性给出分析过程.性能分析表明方案安全性较好且具备一定的理想特性,即方案主公钥、主私钥、接收者私钥的长度与计算成本恒定,解密计算成本恒定. 展开更多

关键词 标识广播加密 匿名 SM9 IND-nID-CCA2安全 ANO-ID-CCA2安全

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英文绘本在小学英语阅读教学中的运用探讨 被引量：8

13

作者 严芬 《青海教育》 2017年第12期36-37,共2页

英文绘本属于一种全新的教学素材,具有独特的教学价值、生动连续的故事情节,可以很好地将图画和文字相结合,将其运用到小学英语阅读教学中,有利于满足学生的阅读期待,提高学生的英语水平.

关键词 英文绘本 小学英语 阅读教学 运用

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儿童气管颈段的应用解剖学研究 被引量：3

14

作者 柳声华 薛奕星 严芬 《解剖学杂志》 CAS 1985年第1期68-69,共2页

气管切开术在抢救喉以下呼吸道堵塞有重要地位,近年来已有很大的扩展,但手术的意外屡见不鲜,特别是儿童气管颈段的解剖资料报告不多,为此,我们对儿童气管切开有关的结构进行了解剖观测,供临床参考。研究用身长49-130cm,常规防腐的童尸60... 气管切开术在抢救喉以下呼吸道堵塞有重要地位,近年来已有很大的扩展,但手术的意外屡见不鲜,特别是儿童气管颈段的解剖资料报告不多,为此,我们对儿童气管切开有关的结构进行了解剖观测,供临床参考。研究用身长49-130cm,常规防腐的童尸60具(男33、女37),用解剖剥离,肉眼观察的方法,用游标卡尺和钢尺测量。 展开更多

关键词 气管环 胸骨 下缘 上切迹 儿童 甲状腺峡部 颈段

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稀土元素镧的应用及其毒性效应研究进展 被引量：1

15

作者 黄坤 郭淼 +1 位作者 严芬 高艳芳 《稀土信息》 2023年第3期29-31,共3页

由于稀土镧在农业、医疗卫生、军工业、食品行业等多个领域的应用,其可蓄积于水体、土壤、农作物中,并可经皮肤、消化道、呼吸道等多种途径进入机体,随之通过血液循环重新分布于各脏器系统,对各脏器产生影响。持续研究稀土镧的性质,更... 由于稀土镧在农业、医疗卫生、军工业、食品行业等多个领域的应用,其可蓄积于水体、土壤、农作物中,并可经皮肤、消化道、呼吸道等多种途径进入机体,随之通过血液循环重新分布于各脏器系统,对各脏器产生影响。持续研究稀土镧的性质,更加科学准确地对镧元素进行评估。 展开更多

关键词 镧 肝肾功能 生殖系统 神经系统 生物应用

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