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应用多重实时荧光PCR方法对8种动物毛纤维种类鉴别的研究
被引量：
6
1
作者
刘艳艳
范阳阳
+4 位作者
步迅
胡悦
东野升金
谭晴晴
张全芳
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期1540-1549,共10页
本研究旨在利用多重实时荧光PCR方法对水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维进行物种鉴定研究。利用碱裂解法加入二硫苏糖醇,并结合硅珠吸附核酸法来优化动物毛纤维DNA的提取;根据8种动物16S rDNA基因特异核苷酸序列...
本研究旨在利用多重实时荧光PCR方法对水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维进行物种鉴定研究。利用碱裂解法加入二硫苏糖醇,并结合硅珠吸附核酸法来优化动物毛纤维DNA的提取;根据8种动物16S rDNA基因特异核苷酸序列设计通用PCR引物和特异性TaqMan荧光探针;通过优化引物和探针浓度及退火温度等PCR反应体系和条件,建立了多重实时荧光PCR检测体系;并对多重PCR体系的特异性、灵敏度、重复性和适用性进行评估。结果表明,使用SDS-二硫苏糖醇DTT-蛋白酶K结合Chelex-100法,并利用硅珠纯化提取动物毛纤维DNA效果最佳,满足实时荧光PCR检测要求。本方法 DNA灵敏度为0.01ng,混合样本方法检出限为1.0%。因此本方法能够从动物毛纤维提取高质量DNA,建立的多重实时荧光PCR检测体系具有特异性强、重复性好和灵敏度高等优势。本方法可用于水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物及其混合物毛纤维的鉴定,为拓展动物毛纤维在物种识别、分子进化研究、分子标记辅助育种和遗传资源评价等领域中的应用奠定基础。
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关键词
动物毛纤维
多重实时荧光PCR
鉴定
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职称材料
动物皮张基因组DNA三种提取方法比较
被引量：
2
2
作者
刘艳艳
东野升金
+5 位作者
王想想
卞如如
陈杰
范阳阳
张全芳
步迅
《山东农业科学》
2015年第12期6-9,共4页
以干燥的驴皮张样品为试验材料,将SDS-蛋白酶K法与Chelex-100法相结合,创新性地引入玻璃奶DNA纯化技术,提取全基因组DNA,并将此方法与前人发表的陈旧皮张DNA提取方法和试剂盒提取方法进行比较分析。结果表明,本研究发明方法提取的基因组...
以干燥的驴皮张样品为试验材料,将SDS-蛋白酶K法与Chelex-100法相结合,创新性地引入玻璃奶DNA纯化技术,提取全基因组DNA,并将此方法与前人发表的陈旧皮张DNA提取方法和试剂盒提取方法进行比较分析。结果表明,本研究发明方法提取的基因组DNA纯度较高,杂质较少,且操作简单,所用试剂、仪器费用较低,能更好地应用于分子生物学实验。
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关键词
动物皮张
DNA提取
玻璃奶
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职称材料
题名
应用多重实时荧光PCR方法对8种动物毛纤维种类鉴别的研究
被引量：
6
1
作者
刘艳艳
范阳阳
步迅
胡悦
东野升金
谭晴晴
张全芳
机构
山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省农业科学院应用生命科学实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第7期1540-1549,共10页
基金
国家自然基金青年科学基金(31702215)
文摘
本研究旨在利用多重实时荧光PCR方法对水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维进行物种鉴定研究。利用碱裂解法加入二硫苏糖醇,并结合硅珠吸附核酸法来优化动物毛纤维DNA的提取;根据8种动物16S rDNA基因特异核苷酸序列设计通用PCR引物和特异性TaqMan荧光探针;通过优化引物和探针浓度及退火温度等PCR反应体系和条件,建立了多重实时荧光PCR检测体系;并对多重PCR体系的特异性、灵敏度、重复性和适用性进行评估。结果表明,使用SDS-二硫苏糖醇DTT-蛋白酶K结合Chelex-100法,并利用硅珠纯化提取动物毛纤维DNA效果最佳,满足实时荧光PCR检测要求。本方法 DNA灵敏度为0.01ng,混合样本方法检出限为1.0%。因此本方法能够从动物毛纤维提取高质量DNA,建立的多重实时荧光PCR检测体系具有特异性强、重复性好和灵敏度高等优势。本方法可用于水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物及其混合物毛纤维的鉴定,为拓展动物毛纤维在物种识别、分子进化研究、分子标记辅助育种和遗传资源评价等领域中的应用奠定基础。
关键词
动物毛纤维
多重实时荧光PCR
鉴定
Keywords
animal wool fiber
multiple real-time fluorescent PCR
identification
分类号
Q341 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
动物皮张基因组DNA三种提取方法比较
被引量：
2
2
作者
刘艳艳
东野升金
王想想
卞如如
陈杰
范阳阳
张全芳
步迅
机构
山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物遗传改良与生态生理重点实验室
济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院
出处
《山东农业科学》
2015年第12期6-9,共4页
基金
济南市高校院所自主创新项目(201401264)
文摘
以干燥的驴皮张样品为试验材料,将SDS-蛋白酶K法与Chelex-100法相结合,创新性地引入玻璃奶DNA纯化技术,提取全基因组DNA,并将此方法与前人发表的陈旧皮张DNA提取方法和试剂盒提取方法进行比较分析。结果表明,本研究发明方法提取的基因组DNA纯度较高,杂质较少,且操作简单,所用试剂、仪器费用较低,能更好地应用于分子生物学实验。
关键词
动物皮张
DNA提取
玻璃奶
Keywords
Animal skin
DNA extraction
Glass Milk
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
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1
应用多重实时荧光PCR方法对8种动物毛纤维种类鉴别的研究
刘艳艳
范阳阳
步迅
胡悦
东野升金
谭晴晴
张全芳
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
6
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职称材料
2
动物皮张基因组DNA三种提取方法比较
刘艳艳
东野升金
王想想
卞如如
陈杰
范阳阳
张全芳
步迅
《山东农业科学》
2015
2
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