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大孔树脂纯化仙草黄酮及成分测定 被引量:13
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作者 上官宇晨 黄丽媛 +3 位作者 黄熊 何传波 魏好程 熊何健 《中国调味品》 CAS 北大核心 2021年第6期149-153,159,共6页
为研究仙草黄酮纯化工艺及其主要组分的结构,以仙草为原料,采用大孔树脂(HPD-100)、羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)分别对仙草黄酮进行柱层析纯化和组分分离,利用HPLC、1 H-NMR、13 C-NMR对分离得到的化合物进行分析和结构鉴定。结... 为研究仙草黄酮纯化工艺及其主要组分的结构,以仙草为原料,采用大孔树脂(HPD-100)、羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)分别对仙草黄酮进行柱层析纯化和组分分离,利用HPLC、1 H-NMR、13 C-NMR对分离得到的化合物进行分析和结构鉴定。结果表明,HPD-100大孔树脂纯化仙草黄酮效果良好,动态吸附工艺参数为:上样量为3 BV,上样流速为3 BV/h,洗脱剂乙醇浓度为60%,洗脱流速为6 BV/h。通过Sephadex LH-20柱层析分离得到两种黄酮类化合物,HPLC分析表明两者纯度均在90%以上,经鉴定为迷迭香酸(rosmarinic acid,MBF1)与紫云英苷(astragalin,MBF2)。该研究可为仙草资源的高值化利用提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 仙草 大孔树脂 黄酮 纯化
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琯溪蜜柚柚皮苷纯化鉴定及其对胰脂肪酶的抑制作用 被引量:7
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作者 晏幸 肖文熙 +5 位作者 欧丽明 上官宇晨 杜希萍 李利君 胡阳 倪辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1-7,共7页
为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪... 为了探索琯溪蜜柚黄酮作为胰脂肪酶抑制剂的应用价值,本实验采用Sephadex LH-20葡聚糖柱层析、高效液相色谱-质谱联用、傅里叶变换红外光谱对琯溪蜜柚柚皮黄酮进行分离纯化及结构鉴定,并通过酶反应动力学和分子对接技术研究其对胰脂肪酶的抑制类型和分子间相互作用。高效液相色谱-质谱联用和傅里叶变换红外光谱分析结果表明,纯化后的琯溪蜜柚柚皮主要黄酮成分为柚皮苷;纯化鉴定的柚皮苷对胰脂肪酶半抑制浓度(half inhibitory concentration,IC_(50))为0.99μg/mL,抑制类型为可逆非竞争型,抑制常数Ki=0.58μg/mL;该黄酮与胰脂肪酶的结合自由能为-30.14 kJ/mol,相互间的分子作用力包括范德华力、疏水相互作用、氢键、π键等,结合区域位于酶催化活性中心之外的位点。本研究表明琯溪蜜柚的主要黄酮成分柚皮苷对胰脂肪酶具有强烈的抑制作用,为利用琯溪蜜柚黄酮开发高效安全的胰脂肪酶抑制剂提供了理论依据。 展开更多
关键词 琯溪蜜柚 柚皮苷 分离纯化 结构鉴定 胰脂肪酶 非竞争性抑制
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仙草多糖对细胞氧化损伤的保护作用 被引量:16
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作者 何传波 邓婷 +3 位作者 魏好程 吴国宏 上官宇晨 熊何健 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第13期160-168,共9页
采用碱液浸提法从仙草中提取粗多糖JMBP-C,通过超滤、离子交换和凝胶柱层析纯化获得一种中性多糖JMBP-N和两种酸性多糖JMBP-A1和JMBP-A2。采用H2O2对人体肝细胞LO2进行氧化损伤,构建LO2细胞的氧化损伤模型。通过测定细胞存活率、乳酸脱... 采用碱液浸提法从仙草中提取粗多糖JMBP-C,通过超滤、离子交换和凝胶柱层析纯化获得一种中性多糖JMBP-N和两种酸性多糖JMBP-A1和JMBP-A2。采用H2O2对人体肝细胞LO2进行氧化损伤,构建LO2细胞的氧化损伤模型。通过测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量探讨JMBP-C、JMBP-A1和JMBP-A2对氧化损伤细胞的保护作用。结果表明,3种多糖能显著增加氧化损伤细胞的存活率,有效降低LDH的释放量,2 mg/mL时,仙草多糖均能极显著降低损伤细胞LDH活力(P<0.01),JMBP-A1质量浓度为0.5 mg/mL时,细胞存活率比模型组增加49.47%。仙草多糖能提高GSH-Px、SOD和CAT活力,且呈现一定的量效关系。JMBP-A2质量浓度为0.125 mg/mL时能将GSH-Px活力提高到正常细胞的69.20%,高于阳性对照,2 mg/mL的JMBP-A1将SOD和CAT活力分别恢复到正常对照组的80.32%和88.14%,极显著高于模型组(P<0.01),效果接近阳性对照。同时,3种多糖样品均能有效减少MDA生成,0.5 mg/mL的JMBP-A1使受损细胞的MDA含量降低了31.50%,与阳性对照效果相当。综上,仙草多糖可增加细胞内抗氧化酶活性,降低脂质过氧化物生成,有明显的氧化损伤保护作用。 展开更多
关键词 仙草多糖 细胞 氧化损伤 抗氧化酶
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