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羟基喜树碱对肝纤维化大鼠肝组织Bax、Bcl-2基因和α-SMA蛋白表达及肝纤维化的影响 被引量:15
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作者 邵佳亮 胡国信 +2 位作者 郑洁 万赞燕 姜瑞娇 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期399-405,共7页
目的考察羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对肝纤维化大鼠肝组织中Bax、Bcl-2基因和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及肝纤维化的影响。方法 64只SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、低剂量HCPT治疗组、中剂量HCPT治疗组、高剂量HCP... 目的考察羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对肝纤维化大鼠肝组织中Bax、Bcl-2基因和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及肝纤维化的影响。方法 64只SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、低剂量HCPT治疗组、中剂量HCPT治疗组、高剂量HCPT治疗组。采用40%四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型。正常组给予生理盐水腹腔注射;3个治疗组在造模同时分别给予0.25、0.5、1.0mg/kg HCPT腹腔注射,3次/周,共8周。各组分别在第8周末取肝脏组织,行H-E、Masson染色观察肝脏组织病理学改变;RT-PCR检测肝脏组织中Bax、Bcl-2mRNA表达并计算Bax/Bcl-2mRNA比值免疫组化染色检测肝脏组织中α-SMA蛋白表达;TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果模型组大鼠出现明显的肝纤维化(Ⅲ期2例,Ⅳ期8例),各HCPT治疗组的肝纤维化程度较模型组减轻(低剂量组Ⅱ期1例,Ⅲ期8例,Ⅳ期1例;中剂量组Ⅱ期7例,Ⅲ期3例;高剂量组Ⅰ期1例,Ⅱ期7例,Ⅲ期2例),差异有统计学意义(P均<0.05)。RT-PCR检测显示模型组Bax、Bcl-2mRNA较正常组升高,而各HCPT治疗组较模型组降低(P均<0.05);模型组Bax/Bcl-2mRNA比值低于各HCPT治疗组(P均<0.05)。免疫组化染色检测显示模型组α-SMA蛋白表达水平高于中、高剂量HCPT组(P<0.05)。TUNEL染色结果显示正常组、模型组无明显阳性染色,各HCPT治疗组均有阳性染色。结论 HCPT对CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型具有防治作用,抑制肝星状细胞活化增殖,上调Bax/Bcl-2mRNA比值可能是HCPT抗肝纤维化的部分机制。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 细胞凋亡 羟基喜树碱
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应用PCR-反向点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐药突变基因 被引量:9
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作者 彭亦平 宗佩兰 +8 位作者 辛茶香 熊国亮 胡群芳 袁小兰 史安良 姚琳 王小路 万赞燕 吴娟 《中国防痨杂志》 CAS 2016年第8期619-622,共4页
目的 评价PCR-反向点杂交技术在检测结核分枝杆菌耐药突变基因中的应用价值。方法选取2014年8月至2015年12月江西省胸科医院住院的部分肺结核患者作为研究对象,共1071例。研究对象均送检了痰液标本,共1071份。所有患者均经病原学或病... 目的 评价PCR-反向点杂交技术在检测结核分枝杆菌耐药突变基因中的应用价值。方法选取2014年8月至2015年12月江西省胸科医院住院的部分肺结核患者作为研究对象,共1071例。研究对象均送检了痰液标本,共1071份。所有患者均经病原学或病理学证实,或符合菌阴肺结核诊断标准。采用PCR-反向点杂交技术对研究对象痰标本进行异烟肼(H)、利福平(R)、链霉素(s)、乙胺丁醇(E)耐药基因检测,并以痰培养阳性标本的药物敏感性试验(简称“药敏试验”)检测结果作为金标准,来验证检测结果的可靠性及评价其检测效能。结果PCR-反向点杂交检测的1071例患者中,596例结核分枝杆菌阳性,阳性率为55.65%。其中,218例(36.58%)检出H、R、S、E耐药基因突变,分布于所测13个位点。H、R、S、E最常见突变位点分别位于KatG的315M(82.53%,137/166)、rpoB的$531L(69.50%,98/141)、rpsl的43M(78.65%,70/89)、embB的306M2(55.13%,43/78)和306M1(39.74%,31/78)。433例患者标本同时行结核分枝杆菌培养,培养阳性且同时PCR反向点杂交检测阳性157例。以培养及药敏试验结果为金标准,PCR-反向点杂交法对H、R、S、E的耐药检测经Kappa检验具有较好的一致性(Kappa值分别为0.77、0.73、0.66、0.49);敏感度分别为88.89%(40/45)、79.66%(47/59)、67.57%(25/37)、63.16%(12/19);特异度分别为91.07%(102/112)、91.84%(90/98)、95.00%(114/120)、91.30%(126/138)。结论PCR-反向点杂交技术用于结核分枝杆菌耐药基因检测较为可靠,对早期临床用药具有较好的指导作用。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 分枝杆菌 结核 抗药性 细菌 基因
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