目的观察过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿刺激系膜细胞-足细胞轴及直接刺激足细胞对细胞增殖及肿瘤坏死因子(TNF)-α分泌的影响,从而探讨在HSPN发病机制中IgA1引起足细胞损伤的作用机制。方法采用层析法获得HSPN患儿及健康儿童血清单聚体IgA...目的观察过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿刺激系膜细胞-足细胞轴及直接刺激足细胞对细胞增殖及肿瘤坏死因子(TNF)-α分泌的影响,从而探讨在HSPN发病机制中IgA1引起足细胞损伤的作用机制。方法采用层析法获得HSPN患儿及健康儿童血清单聚体IgA1(mIgA1),并热聚合为聚合IgA1(aIgA1),分别采用HSPN患儿aIgA1与系膜细胞共培养上清(aIgA1-MES上清组)、HSPN患儿的aIgA1(HSPN组)及健康儿童的aIgA1(健康儿童组)刺激足细胞,三组均采用50、100、250μg/mL三种浓度的aIgA1;并设不含aIgA1的阴性对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测刺激24 h及48 h足细胞的增殖情况;收集培养48 h的细胞培养基上清,用酶聚免疫吸附测定(ELISA)法测定TNF-α的水平。对比分析不同浓度的aIgA1对细胞增殖和TNF-α分泌水平的影响。结果 24 h MTT结果显示,aIgA1-MES上清组刺激足细胞在aIgA1浓度为100、250μg/mL的aIgA1中OD值明显低于阴性对照组(P<0.05),HSPN组及健康儿童组aIgA1直接刺激足细胞不能对细胞增殖产生影响(P>0.05);48 h MTT结果显示,IgA1-MES上清组在三种aIgA1浓度下足细胞OD值明显低于阴性对照组(P<0.05),HSPN组及健康儿童组直接刺激足细胞不能对细胞增殖产生影响(P>0.05);三种aIgA1浓度的aIgA1-MES上清组刺激足细胞分泌TNF-α含量较阴性对照组明显升高(P<0.01),三种aIgA1浓度的HSPN组及健康儿童组TNF-α含量与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSPN患儿aIgA1不能直接刺激足细胞造成细胞损伤,而是通过系膜细胞-足细胞轴抑制足细胞的增殖,并诱导足细胞分泌TNF-α水平增加。展开更多
文摘目的观察过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿刺激系膜细胞-足细胞轴及直接刺激足细胞对细胞增殖及肿瘤坏死因子(TNF)-α分泌的影响,从而探讨在HSPN发病机制中IgA1引起足细胞损伤的作用机制。方法采用层析法获得HSPN患儿及健康儿童血清单聚体IgA1(mIgA1),并热聚合为聚合IgA1(aIgA1),分别采用HSPN患儿aIgA1与系膜细胞共培养上清(aIgA1-MES上清组)、HSPN患儿的aIgA1(HSPN组)及健康儿童的aIgA1(健康儿童组)刺激足细胞,三组均采用50、100、250μg/mL三种浓度的aIgA1;并设不含aIgA1的阴性对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测刺激24 h及48 h足细胞的增殖情况;收集培养48 h的细胞培养基上清,用酶聚免疫吸附测定(ELISA)法测定TNF-α的水平。对比分析不同浓度的aIgA1对细胞增殖和TNF-α分泌水平的影响。结果 24 h MTT结果显示,aIgA1-MES上清组刺激足细胞在aIgA1浓度为100、250μg/mL的aIgA1中OD值明显低于阴性对照组(P<0.05),HSPN组及健康儿童组aIgA1直接刺激足细胞不能对细胞增殖产生影响(P>0.05);48 h MTT结果显示,IgA1-MES上清组在三种aIgA1浓度下足细胞OD值明显低于阴性对照组(P<0.05),HSPN组及健康儿童组直接刺激足细胞不能对细胞增殖产生影响(P>0.05);三种aIgA1浓度的aIgA1-MES上清组刺激足细胞分泌TNF-α含量较阴性对照组明显升高(P<0.01),三种aIgA1浓度的HSPN组及健康儿童组TNF-α含量与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSPN患儿aIgA1不能直接刺激足细胞造成细胞损伤,而是通过系膜细胞-足细胞轴抑制足细胞的增殖,并诱导足细胞分泌TNF-α水平增加。
