乙酰短杆菌酶法合成5-甲基尿苷 被引量：4

1

作者 丁庆豹 邱蔚然 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期284-287,共4页

用乙酰短杆菌完整细胞为酶源，以鸟苷和胸腺嘧啶为底物，酶法合成５－甲基尿苷。最佳反应条件为：底物浓度１００～２００ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ８．０，磷酸盐缓冲液浓度１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ，６０°Ｃ，摇床转速１２０ｒ／ｍｉｎ... 用乙酰短杆菌完整细胞为酶源，以鸟苷和胸腺嘧啶为底物，酶法合成５－甲基尿苷。最佳反应条件为：底物浓度１００～２００ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ８．０，磷酸盐缓冲液浓度１０～５０ｍｍｏｌ／Ｌ，６０°Ｃ，摇床转速１２０ｒ／ｍｉｎ，反应１ｈ即达到平衡，５－甲基尿苷转化率达６０％以上。 展开更多

关键词 酶法 合成 5-甲基尿苷 乙酰短杆菌

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D-核糖产生菌的选育及发酵 被引量：13

2

作者 高淑红 邱蔚然 +2 位作者 丁庆豹 蔡华 孙强 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第1期37-40,共4页

以枯草芽孢杆菌Ｄ－２ 为出发菌株，经紫外诱变，得到一株莽草酸缺陷型突变株Ｄ－２０２，摇瓶发酵Ｄ－核糖产量可达到５２．６ｇ／Ｌ。该菌遗传稳定性良好。通过发酵条件的优化，最高产量可达６５ｇ／Ｌ。经２ｔ发酵罐中试，发酵单位... 以枯草芽孢杆菌Ｄ－２ 为出发菌株，经紫外诱变，得到一株莽草酸缺陷型突变株Ｄ－２０２，摇瓶发酵Ｄ－核糖产量可达到５２．６ｇ／Ｌ。该菌遗传稳定性良好。通过发酵条件的优化，最高产量可达６５ｇ／Ｌ。经２ｔ发酵罐中试，发酵单位达到５０ｇ／Ｌ。 展开更多

关键词 D-核糖 枯草芽孢杆菌 诱变育种 发酵

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用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱 被引量：9

3

作者 牛红星 邱蔚然 丁庆豹 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期372-375,共4页

κ-卡拉胶 -魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞 ,经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱 (CDP-胆碱 )。结果表明 :2 5 0 m L摇瓶中加入 5 0 m L反应液 (葡萄糖 40 0 mmol/ L,CMP1 0 mmol/ L,磷酸胆碱 5 0 mmol/ L,K2 HPO4 -KH2 PO4... κ-卡拉胶 -魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞 ,经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱 (CDP-胆碱 )。结果表明 :2 5 0 m L摇瓶中加入 5 0 m L反应液 (葡萄糖 40 0 mmol/ L,CMP1 0 mmol/ L,磷酸胆碱 5 0 mmol/ L,K2 HPO4 -KH2 PO4 缓冲液 1 0 0 mmol/ L,Mg SO4 1 0 mmol/ L,p H=8.0 ) ,固定化细胞 1 2 0 0 g/ L,3 4°C、1 5 0 r/ min下 ,反应 4h后补加 40 0 mmol/ L葡萄糖 ,反应 8h可使60 %以上的 CMP转化为 CDP-胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶 I(NAD+ )后 ,固定化细胞可连续使用 4次 ,CDP-胆碱转化率维持在 40 展开更多

关键词 合成 胞嘧啶核苷二磷酸胆碱 卡拉胶 魔芋多糖 啤酒酵母 固定化细胞 CDP-胆碱 医药工业

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麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质 被引量：7

4

作者 李德莹 邱蔚然 丁庆豹 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期376-379,共4页

从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H... 从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H7.0 ,时间 2 h,5′-核苷酸转化率达80 %。 展开更多

关键词 制备 麦芽根 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸 核糖核酸 热稳定性 pH稳定性 啤酒废料

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酶法合成抗癌新药氟铁龙前体——5-FUR 被引量：4

5

作者 闫蓬勃 丁庆豹 +2 位作者 邱蔚然 严滢 石佳瑛 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期143-146,共4页

筛选得到一株核苷磷酸化酶活力高的乙酰短杆菌 ,以该菌体为酶源酶法合成抗癌新药氟铁龙前体 5-氟尿苷 ,所用反应物为鸟苷和 5-氟尿嘧啶。在 1 50 m L的摇瓶装液 1 5m L的条件下进行研究 ,结果显示 :菌体添加量 2 0～ 30 g/L,底物浓度 1 ... 筛选得到一株核苷磷酸化酶活力高的乙酰短杆菌 ,以该菌体为酶源酶法合成抗癌新药氟铁龙前体 5-氟尿苷 ,所用反应物为鸟苷和 5-氟尿嘧啶。在 1 50 m L的摇瓶装液 1 5m L的条件下进行研究 ,结果显示 :菌体添加量 2 0～ 30 g/L,底物浓度 1 0 0 mmol/L,磷酸盐浓度 50 mmol/L( p H8.0 ) ,60°C,摇床转速 1 60 r/min,反应 4h,5-氟尿苷的转化率可以达到 60 展开更多

关键词 酶法合成 5-氟尿苷 乙酰短杆菌 5-氟尿嘧啶 鸟苷 抗癌药物

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乳品中的核苷酸及其对婴儿的生物学功效 被引量：6

6

作者 魏晓琨 王玥 +1 位作者 丁庆豹 欧伶 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2008年第1期35-38,43,共5页

本文阐述了乳品中的核苷酸成分,分析比较了核苷酸在体内的吸收,并对核苷酸生物学功能和对婴儿的营养保健功能作了综述。与人乳相比,牛乳中的核苷酸成份主为乳清酸,其他核苷酸含量甚微。基于牛乳的婴儿配方奶粉也是如此。核酸及其组成物... 本文阐述了乳品中的核苷酸成分,分析比较了核苷酸在体内的吸收,并对核苷酸生物学功能和对婴儿的营养保健功能作了综述。与人乳相比,牛乳中的核苷酸成份主为乳清酸,其他核苷酸含量甚微。基于牛乳的婴儿配方奶粉也是如此。核酸及其组成物质时入消化道后,很快降解成核苷酸并被吸收,多数停留在肠道的上皮细胞中,并经呼吸和尿液排出体外。小部分则参与体内其它细胞的代谢及合成核酸大分子等。核苷酸除具有常见的生物功能外,乳品的核苷酸还具有特定的生理功能,尤其是对婴幼儿。婴儿配方粉中添加核苷酸,对提高婴儿的免疫功能,增加铁的吸收,影响脂蛋白的代谢,改善肠道有益菌群,完善肠道功能和肝功能及促进生长有一定的意义,并越来越为各国所重视。近年来中国也提倡婴儿配方粉中添加核苷酸。 展开更多

关键词 核苷酸 乳制品 代谢 营养保健

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大肠杆菌核苷磷酸化酶的重组表达和活性 被引量：2

7

作者 谭黎 欧阳立明 +1 位作者 丁庆豹 欧伶 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期660-664,共5页

将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的37%以上,与产... 将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的37%以上,与产核苷磷酸化酶的野生菌比较,酶的活性也有显著提高。在特异反应条件下,构建的工程菌可以用来高效催化核苷的转糖基反应。 展开更多

关键词 大肠杆菌 嘌呤核苷磷酸化酶 尿苷磷酸化酶 胸苷磷酸化酶 表达

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蜂蜜醋发酵及其智舌辨识的研究 被引量：4

8

作者 袁鹰 常雅宁 +1 位作者 丁庆豹 聂嘉睿 《中国调味品》 CAS 北大核心 2015年第4期61-64,68,共5页

以蜂蜜为原料,经过固定化酵母和醋酸杆菌两步发酵得到蜂蜜醋。固定化酵母发酵生产酒精时,发酵批次最多可达15次。调整酒精度为4.0%时,向原料中添加0.25%酵母膏(YE+),接种量为2%时,经醋酸杆菌发酵72h乙酸量可达1.9g/dL,相同条件下酵母膏... 以蜂蜜为原料,经过固定化酵母和醋酸杆菌两步发酵得到蜂蜜醋。固定化酵母发酵生产酒精时,发酵批次最多可达15次。调整酒精度为4.0%时,向原料中添加0.25%酵母膏(YE+),接种量为2%时,经醋酸杆菌发酵72h乙酸量可达1.9g/dL,相同条件下酵母膏未添加组(YE-)增加接种量至40%时,乙酸量增加至2.2g/dL。利用智舌对发酵的蜂蜜醋进行辨识,发现蜂蜜醋与进口果醋在滋味等多个方面具有很高的相似性,因此本实验发酵所得蜂蜜醋总体口味可归于进口果醋一类。 展开更多

关键词 蜂蜜 蜂蜜酒 蜂蜜醋 电子舌

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大肠杆菌L-阿拉伯糖异构酶的克隆表达及D-塔格糖的制备 被引量：1

9

作者 王栋 丁庆豹 +3 位作者 欧伶 魏晓琨 许艳梅 孙丽云 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2010年第5期87-92,102,共7页

将大肠杆菌K-12中的L-阿拉伯糖异构酶基因araA克隆到载体pET-28a上,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中表达。通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性酶蛋白。以重悬菌液为酶源、D-半乳糖为底物,对酶转化D-塔格糖的条件进行测定。... 将大肠杆菌K-12中的L-阿拉伯糖异构酶基因araA克隆到载体pET-28a上,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中表达。通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性酶蛋白。以重悬菌液为酶源、D-半乳糖为底物,对酶转化D-塔格糖的条件进行测定。结果表明:D-塔格糖的最佳转化温度为60℃。在pH7～9的范围中,D-塔格糖的转化率均能达到30%～40%。加入Mn2+、Ca2+、Co2+和Mg2+均能够使D-塔格糖的转化率提高,EDTA处理后的酶明显不具备催化能力,加入Mn2+后能使酶液恢复催化能力,但并不随着Mn2+浓度的提高而增大。 展开更多

关键词 大肠杆菌 L-阿拉伯糖异构酶 D-塔格糖 表达 转化

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超声提取韭菜籽生物碱工艺及其活性研究 被引量：2

10

作者 郭奎彩 丁庆豹 胡国华 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2015年第2期69-76,共8页

对韭菜籽生物碱的超声提取工艺进行了研究,在提取溶剂、提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、料液比等单因素的基础上,研究了韭菜籽生物碱的超声提取法,对料液比、温度、时间、提取次数等提取因素进行优化,结果表明通过超声提取法的最佳... 对韭菜籽生物碱的超声提取工艺进行了研究,在提取溶剂、提取溶剂浓度、提取温度、提取时间、料液比等单因素的基础上,研究了韭菜籽生物碱的超声提取法,对料液比、温度、时间、提取次数等提取因素进行优化,结果表明通过超声提取法的最佳提取工艺条件为料液比是1∶45,温度是60℃,时间为40min,功率确定为200W,在该条件下所测得的韭菜籽生物碱的含量为93μg/m L。对韭菜籽生物碱·OH的清除能力和对K3Fe(CN)6的还原性进行分别测定,结果表明韭菜籽生物碱浓度与其·OH的清除及对铁氰化钾的还原能力能力呈线性正相关。 展开更多

关键词 韭菜籽 生物碱 提取工艺 活性

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酶法合成5-杂氮-2’-脱氧胞苷 被引量：1

11

作者 王丽慧 丁庆豹 +3 位作者 欧伶 许彦梅 张春燕 王玥 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期325-329,共5页

将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量... 将瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)中的N-脱氧核糖转移酶II的基因(ntd)克隆到大肠杆菌BL21(DE3)中,构建原核表达系统,成功地得到一株大量表达N-脱氧核糖转移酶II的菌株PND。以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,该重组菌可大量表达N-脱氧核糖转移酶II。在此酶作用下,以5-杂氮胞嘧啶和脱氧胸苷为底物,生成胸腺嘧啶和目标产物5-杂氮-2’-脱氧胞苷。最佳反应条件为:底物浓度均为2 mmol/L,20 mmol/LTris-HCl缓冲液(pH为7.1),200μL酶,最终反应体积2 mL,55℃反应2 h,转化率可达61%。 展开更多

关键词 N-脱氧核糖转移酶II 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 合成

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D-核糖发酵过程中的pH控制及对产D-核糖关键酶的影响

12

作者 杨兆娟 徐京宁 +2 位作者 丁庆豹 欧伶 邱蔚然 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期739-742,共4页

在枯草芽孢杆菌突变株D-756发酵生产D-核糖过程中,采用葡萄糖和葡萄糖酸钙混合发酵,葡萄糖酸作为pH调节剂,能促进菌体的生长,显著地提高D-核糖的产量。经酶活测定,发现流加葡萄糖酸能提高单位发酵液中葡萄糖酸激酶的酶活。在5 L发酵罐中... 在枯草芽孢杆菌突变株D-756发酵生产D-核糖过程中,采用葡萄糖和葡萄糖酸钙混合发酵,葡萄糖酸作为pH调节剂,能促进菌体的生长,显著地提高D-核糖的产量。经酶活测定,发现流加葡萄糖酸能提高单位发酵液中葡萄糖酸激酶的酶活。在5 L发酵罐中,利用葡萄糖酸维持发酵pH值在7.2,培养72 h后产核糖76.8 g/L。 展开更多

关键词 D-核糖 pH值调控 关键酶 葡萄糖酸 发酵 枯草芽孢杆菌

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高产耐热3′-磷酸二酯酶菌种的选育及酶性质的研究

13

作者 修俊鹏 丁庆豹 +1 位作者 欧伶 邱蔚然 《华东理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期274-277,共4页

以粘红酵母(Rhodotoru la g lutin is)Q 0402为出发菌株,经紫外诱变,得到一株粘红酵母QX 0402。5 L发酵罐的发酵液中3′-磷酸二酯酶酶活力可达250 U/mL,为文献报道过的最高酶活力的2.5倍。所产生的3′-磷酸二酯酶在70°C下保温1 h,... 以粘红酵母(Rhodotoru la g lutin is)Q 0402为出发菌株,经紫外诱变,得到一株粘红酵母QX 0402。5 L发酵罐的发酵液中3′-磷酸二酯酶酶活力可达250 U/mL,为文献报道过的最高酶活力的2.5倍。所产生的3′-磷酸二酯酶在70°C下保温1 h,酶活力仍有50%以上。该酶最适反应pH为5.4,最适反应温度为60°C,反应3 h的反应转化率为56.37%,底物浓度可以提高到3%,生产效率为文献报道的3倍。 展开更多

关键词 3′-磷酸二酯酶 3′-核苷酸 粘红酵母 诱变育种

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米糠多糖的研究及应用进展 被引量：14

14

作者 胡国华 杨帆 +2 位作者 马正智 周强 丁庆豹 《中国食品添加剂》 CAS 2007年第5期80-85,共6页

阐述了米糠多糖的研究和应用进展,包括其化学结构组成、性质、提取方法、生理功能及其在我国的应用开发进展等内容。

关键词 米糠 多糖 半纤维素 研究 应用

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脱脂米糠半纤维素C的分离与鉴定 被引量：3

15

作者 胡国华 马正智 +1 位作者 周强 丁庆豹 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期205-206,209,共3页

采用化学法和酶法相结合的分离方法,由新鲜脱脂米糠细胞壁物质中碱提分离出半纤维素C,经鉴定其单糖组成为阿拉伯糖(14.5%),木糖(61.2%),葡萄糖(11.7%)和半乳糖(12.7%)。结合蛋白的氨基酸组成同游离米糠蛋白有较大差异,半纤维素C主要由3... 采用化学法和酶法相结合的分离方法,由新鲜脱脂米糠细胞壁物质中碱提分离出半纤维素C,经鉴定其单糖组成为阿拉伯糖(14.5%),木糖(61.2%),葡萄糖(11.7%)和半乳糖(12.7%)。结合蛋白的氨基酸组成同游离米糠蛋白有较大差异,半纤维素C主要由39.6万和25.3万Da两种分子量组分组成。 展开更多

关键词 米糠 半纤维素 膳食纤维

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