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猪流行性腹泻病毒BZ01株的分离鉴定及培养特性研究
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作者 魏凤 张文通 +4 位作者 孟庆伟 吕素芳 王艳 张志亭 李峰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期6-11,共6页
用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培... 用已建立的RT-PCR方法对采集的疑似猪流行性腹泻病猪的粪便样品进行检测,选用Vero细胞分离培养检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性的样品,连续传3代后用RT-PCR方法鉴定,对其S1基因进行序列测定和遗传进化分析,并用Vero细胞对分离毒体外培养所需的接毒时间、收毒时间、接毒剂量及胰蛋白酶浓度进行试验,筛选出该株PEDV体外培养最佳条件。结果表明,该分离株为G2b型,在Vero细胞增殖最佳接毒时间为培养24 h细胞长成单层时,最佳收毒时间为接毒后48 h,最佳接毒剂量为10%,最佳胰蛋白酶浓度为15μg/mL,研究结果可为PEDV的分离培养及提高病毒效价提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 鉴定 培养特性
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一株羊口疮病毒分离株的生物学特性研究 被引量:9
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作者 唐娜 刘吉山 +5 位作者 王玉茂 王金良 张倩 谢金文 曲光刚 沈志强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第6期49-53,共5页
为深入开展羊口疮病毒特性研究与羊口疮的防控,通过细胞分离培养、B2L 基因序列测定及分析等试验,对从山东某羊场分离的一株羊口疮病毒分离株 SD1201进行病毒学及分子生物学特性研究。结果表明,该分离株能够引起绵羊睾丸细胞、Vero E... 为深入开展羊口疮病毒特性研究与羊口疮的防控,通过细胞分离培养、B2L 基因序列测定及分析等试验,对从山东某羊场分离的一株羊口疮病毒分离株 SD1201进行病毒学及分子生物学特性研究。结果表明,该分离株能够引起绵羊睾丸细胞、Vero E6细胞、MDCK 细胞发生不同程度的病变,绵羊睾丸细胞病变最为明显,在18 h 内迅速发生细胞病变,病毒 TCTD50浓度为10^-4.5/mL。通过 PCR 扩增分离株 B2L基因特定片段并克隆测序,分析结果表明,该分离株与3株羊口疮病毒中国分离株亲缘关系最近,同源性为98.0%~98.2%。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 SD1201株 生物学特性 B2L基因 序列分析
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应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒 被引量:6
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作者 庄金秋 毕研丽 +3 位作者 梅建国 王金良 苗立中 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期36-39,共4页
为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒,根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成了1对特异性引物,其扩增产物长度为314bp,建立了PCR法,其特异性和敏感性较好。经与间接... 为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒,根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成了1对特异性引物,其扩增产物长度为314bp,建立了PCR法,其特异性和敏感性较好。经与间接免疫荧光法进行同步比较试验,发现结果吻合性较高,且PCR法的结果更为直观,易于判断,样品保存方便,重检也方便,当日即可完成,显示出了较好的可行性。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生症病毒 PCR 检测
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部分禽源生物制品外源病毒的检测 被引量:5
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作者 庄金秋 梅建国 +3 位作者 刘晓倩 王艳 苗立中 沈志强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期121-125,共5页
进行了部分禽用生物制品外源病毒检测的鸡胚检查法、细胞检查法和鸡检查法。鸡胚检查法应用SPF鸡胚检验;细胞检查法主要通过鸡红细胞吸附试验、禽白血病病毒ELISA和禽网状内皮组织增生症病毒IFA检验疫苗是否含有外源鸡红细胞吸附因子、... 进行了部分禽用生物制品外源病毒检测的鸡胚检查法、细胞检查法和鸡检查法。鸡胚检查法应用SPF鸡胚检验;细胞检查法主要通过鸡红细胞吸附试验、禽白血病病毒ELISA和禽网状内皮组织增生症病毒IFA检验疫苗是否含有外源鸡红细胞吸附因子、禽白血病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒,并提出疫苗检验的判定标准,为各兽用生物制品生产企业新城疫疫苗的外源病毒检验提供参考。 展开更多
关键词 禽源生物制品 外源病毒 检测
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猪繁殖与呼吸综合征病毒结构和非结构蛋白生物学功能研究进展 被引量:5
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作者 张松林 沈志强 +2 位作者 刘磊 马永彪 刘吉山 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1683-1696,共14页
猪繁殖与呼吸综合征严重危害着养猪业的健康发展,给养猪业造成了巨大的经济损失。由于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)介导的特殊的免疫逃避机制以及抗原性基因的异质性等特征,目前疫苗产品不能提供十分有效的保护。作者就PRRSV结构和非... 猪繁殖与呼吸综合征严重危害着养猪业的健康发展,给养猪业造成了巨大的经济损失。由于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)介导的特殊的免疫逃避机制以及抗原性基因的异质性等特征,目前疫苗产品不能提供十分有效的保护。作者就PRRSV结构和非结构蛋白生物学功能的最新研究进展进行归纳总结,以期为PRSSV防控,新型疫苗设计等提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 生物学功能 结构和非结构蛋白
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应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒 被引量:2
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作者 庄金秋 梅建国 +3 位作者 毕研丽 王金良 苗立中 沈志强 《中国动物检疫》 CAS 2012年第2期52-54,共3页
为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒,根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列,利用Primer Premier5.0软件设计合成了1对特异性引物,其扩增产物长度为314bp,建立了PCR法。经与间接免疫荧光法进行同步比较试... 为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒,根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列,利用Primer Premier5.0软件设计合成了1对特异性引物,其扩增产物长度为314bp,建立了PCR法。经与间接免疫荧光法进行同步比较试验,发现结果吻合性较高,而且PCR法的结果更为直观,易于判断,样品保存方便,重检也方便,当日即可完成,显示出了较好的可行性。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生症病毒 PCR 检测
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貉源绿脓杆菌分离鉴定 被引量:5
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作者 王建军 莫玲 +3 位作者 郭广君 韩强 姚春阳 王玉茂 《中国动物保健》 2021年第12期116-117,120,共3页
为确诊引起山东省潍坊市某貉子养殖场的主要细菌性疾病,对该养殖户送检的病死貉子进行剖检,根据病貉的临床症状、病理剖检变化及其对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16SrDNAPCR鉴定、药物敏感试验,初步确诊为绿脓杆菌... 为确诊引起山东省潍坊市某貉子养殖场的主要细菌性疾病,对该养殖户送检的病死貉子进行剖检,根据病貉的临床症状、病理剖检变化及其对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16SrDNAPCR鉴定、药物敏感试验,初步确诊为绿脓杆菌感染。药物敏感试验结果表明,分离菌株对恩诺沙星、硫酸粘杆菌素、氟苯尼考中敏,对头孢噻呋、庆大霉素、替米考星、多西环素、林可霉素、阿莫西林耐药。 展开更多
关键词 绿脓杆菌 药敏试验 PCR鉴定
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蛋白质的糖基化作用及其在生物制药中的应用 被引量:14
8
作者 董炳梅 王金良 +5 位作者 张春玲 魏凤 吕素芳 祖立闯 汪洋 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期62-66,共5页
糖基化是生物体一种最为常见且最主要的蛋白质翻译后修饰方式,对蛋白质性状及其功能的影响具有重要的生物学意义。近年来,随着糖生物学与糖基化工程的发展,已有越来越多的药物应用于临床。文章概括了蛋白质糖基化修饰的种类及糖基化修... 糖基化是生物体一种最为常见且最主要的蛋白质翻译后修饰方式,对蛋白质性状及其功能的影响具有重要的生物学意义。近年来,随着糖生物学与糖基化工程的发展,已有越来越多的药物应用于临床。文章概括了蛋白质糖基化修饰的种类及糖基化修饰对蛋白质特性的影响;在此基础上,总结了近年来蛋白质糖基化工程在生物制药中的发展与应用。蛋白质糖基化工程作为一种新型的改良蛋白质性质的手段,必然会在蛋白质的改造中发挥越来越重要的作用。 展开更多
关键词 蛋白质 糖基化 生物制药
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微生物发酵饲料对肉牛生长、 瘤胃发酵和肉品质的影响研究 被引量:12
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作者 赵修报 付强 +3 位作者 张莎莎 付石军 刘吉山 程立坤 《中国饲料》 北大核心 2023年第1期148-152,共5页
为研究微生物发酵饲料对肉牛生长性能、瘤胃发酵特性和肉品质的影响,选取平均体重(352.00±12.31)kg西杂牛120头,随机分为5组,每组6个重复,每个重复4只,用微生物发酵饲料以0%、2.5%、5.0%、7.5%、10.0%5个水平进行替代牛日粮中主要... 为研究微生物发酵饲料对肉牛生长性能、瘤胃发酵特性和肉品质的影响,选取平均体重(352.00±12.31)kg西杂牛120头,随机分为5组,每组6个重复,每个重复4只,用微生物发酵饲料以0%、2.5%、5.0%、7.5%、10.0%5个水平进行替代牛日粮中主要蛋白饲料,饲喂90 d,并进行相关指标测定。结果显示:(1)添加微生物发酵饲料对肉牛平均日采食量(ADFI)无显著影响,但在5%水平时日增重(ADG)最高,较对照组升高15.3%(P<0.05)。(2)随微生物发酵饲料添加比例增加,试验组1、2、3、4 pH较对照组分别提高3.3%、6.7%、6.9%、9.5%(P<0.05),挥发性脂肪酸呈下降趋势(P<0.05),氨基氮变化不明显。(3)随着微生物发酵饲料添加量的增加,试验组2、3、4剪切力较对照组分别降低7.8%、1.9%、33.0%(P<0.01),试验组1、2、3、4胆固醇含量较对照组分别降低3.1%、1.9%、4.1%、14.8%(P<0.05)。试验结果表明,以一定比例的微生物发酵饲料替代部分精饲料,可以起到提高生长性能、改善肉品质的作用,但比例过高会降低瘤胃能量代谢,对生长性能产生负面影响。 展开更多
关键词 微生物发酵饲料 生长性能 瘤胃发酵 剪切力
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鸡白细胞介素-2分子生物学和疾病防治应用研究进展 被引量:6
10
作者 于新友 赵蕾 +1 位作者 王艳 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第8期81-84,共4页
鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,具有显著的免疫增强作用,不仅在T细胞、B细胞的生长与分化和NK细胞的激活等方面发挥重要作用,而且与其他细胞因子一起发挥免疫功能,是一种能影响机体免疫反应各个方面的调节因子... 鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,具有显著的免疫增强作用,不仅在T细胞、B细胞的生长与分化和NK细胞的激活等方面发挥重要作用,而且与其他细胞因子一起发挥免疫功能,是一种能影响机体免疫反应各个方面的调节因子。文章综述了鸡白细胞介素-2分子生物学和疾病防治应用研究进展。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素-2 细胞因子 分子生物学 疾病防治
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一株猪源链球菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量:4
11
作者 陈金龙 李书光 +5 位作者 张莎莎 张娜 于新友 孙翠平 庄金秋 沈志强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第7期74-77,共4页
从送检的一份疑似链球菌病病死猪病料中分离出1株细菌,通过对分离菌株进行细菌的培养特性、生化试验、玻片凝集试验及PCR分型鉴定,确定为2型猪链球菌,动物致病性试验表明,1×108 CFU/mL的剂量可致死小白鼠,对该分离菌株的毒力因子进... 从送检的一份疑似链球菌病病死猪病料中分离出1株细菌,通过对分离菌株进行细菌的培养特性、生化试验、玻片凝集试验及PCR分型鉴定,确定为2型猪链球菌,动物致病性试验表明,1×108 CFU/mL的剂量可致死小白鼠,对该分离菌株的毒力因子进行PCR检测发现,溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)和溶血素(sly)均为阳性。此菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。 展开更多
关键词 猪链球菌 分离 鉴定 生物学特性
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基于Overlap PCR方法进行猪伪狂犬病毒TK基因缺失载体的构建、鉴定及生物学分析 被引量:7
12
作者 毕研丽 郭广君 +2 位作者 吕素芳 魏凤 沈志强 《中国动物检疫》 CAS 2011年第2期40-43,共4页
构建伪狂犬病毒TK基因缺失载体,在BHK-21细胞中表达,为研究TK基因生物学活性及其基因工程疫苗研制提供科学依据。根据伪狂犬病病毒SA株TK基因序列,设计引物,通过OverlapPCR扩增到长约1814bp的TK基因,与PMD18-T载体连接,将鉴定为阳性的... 构建伪狂犬病毒TK基因缺失载体,在BHK-21细胞中表达,为研究TK基因生物学活性及其基因工程疫苗研制提供科学依据。根据伪狂犬病病毒SA株TK基因序列,设计引物,通过OverlapPCR扩增到长约1814bp的TK基因,与PMD18-T载体连接,将鉴定为阳性的重组质粒pMD-TK与表达载体pBluescriptSK(+)分别用限制性内切酶BamHⅠ、HindⅢ酶切后,定向亚克隆;重组表达质粒pBTK经PCR、酶切鉴定后,阳性质粒进行测序。利用脂质体介导阳性重组质粒pBTK转染BHK-21细胞,通过噬斑纯化获得获得重组病毒PRV/TK-。该重组病毒在体外传15代后仍具有良好的遗传稳定性,应用PCR技术可从体外反复传代的阳性细胞基因组中扩增到TK基因,其TCID50毒价是5.75。本实验为PRV基因功能的研究及PRV基因缺失苗的研究提供了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 TK基因 OverlapPCR 转移载体
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丁酸梭菌的生物学功能及其在养猪生产中的研究与应用进展 被引量:7
13
作者 祖立闯 李娇 +1 位作者 李峰 沈志强 《养猪》 2020年第1期17-20,共4页
丁酸梭菌是一种以丁酸、乳酸和乙酸为主要代谢产物的专性厌氧革兰氏阳性芽孢杆菌,具有耐高温、耐酸和耐多种抗生素等生物学特性,优点为安全、无残留、绿色环保、稳定性好等,且有改善动物肠道环境,提高营养物质消化吸收利用率,提高动物... 丁酸梭菌是一种以丁酸、乳酸和乙酸为主要代谢产物的专性厌氧革兰氏阳性芽孢杆菌,具有耐高温、耐酸和耐多种抗生素等生物学特性,优点为安全、无残留、绿色环保、稳定性好等,且有改善动物肠道环境,提高营养物质消化吸收利用率,提高动物机体免疫力和抗病力,抗氧化等多种生物学功能,是一种具有广泛开发潜力和开发前景的新型绿色饲料添加剂。文章就丁酸梭菌的形态特征与生物学特性、生物学功能及其在养猪生产中的研究与应用现状进行综述,为丁酸梭菌更好地推广应用于养猪生产提供参考。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 形态特征 生物学特性 生物学功能 养猪生产
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猪流行性腹泻病毒分子生物学检测方法研究进展 被引量:8
14
作者 李天芝 于新友 +2 位作者 梅建国 李峰 沈志强 《养猪》 2016年第5期81-84,共4页
文章综述了猪流行性腹泻病毒分子生物学检测方法,主要包括核酸探针、常规PCR方法、套式PCR方法、多重PCR方法、荧光定量PCR方法、环介导等温扩增等6种方法,对猪流行性腹泻防控有一定的参考价值。
关键词 猪流行性腹泻病毒 分子生物学 检测方法
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我国猪流感的流行现状及分子生物学诊断方法研究进展 被引量:8
15
作者 李天芝 于新友 +1 位作者 王金良 沈志强 《养猪》 2017年第1期125-128,共4页
猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性、高度接触性猪呼吸道传染病,给养猪业造成很大的危害,猪流感病毒也可感染人类,威胁人类的生命健康。文章综述了我国猪流感的流行现状及分子生物学诊断方法的研究进展情况,以期对猪流感的诊断和防控... 猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性、高度接触性猪呼吸道传染病,给养猪业造成很大的危害,猪流感病毒也可感染人类,威胁人类的生命健康。文章综述了我国猪流感的流行现状及分子生物学诊断方法的研究进展情况,以期对猪流感的诊断和防控工作提供参考。 展开更多
关键词 猪流感 流行现状 分子生物学 诊断
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我国猪圆环病毒的分类、流行现状及分子生物学检测方法研究进展 被引量:9
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作者 李天芝 于新友 李峰 《养猪》 2022年第2期124-128,共5页
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒(PCV)感染后引起的一类疾病,各日龄和品种猪均可发生,其中仔猪和母猪受到的危害严重。猪圆环病毒病发病率高,分布广泛,在世界主要养猪国家均有发生和流行,给我国养猪业造成了严重的经济损失。文章综述了我国... 猪圆环病毒病是由猪圆环病毒(PCV)感染后引起的一类疾病,各日龄和品种猪均可发生,其中仔猪和母猪受到的危害严重。猪圆环病毒病发病率高,分布广泛,在世界主要养猪国家均有发生和流行,给我国养猪业造成了严重的经济损失。文章综述了我国PCV的分类及流行现状,并对PCV分子生物学检测方法研究进展进行了综述,以期为猪场圆环病毒相关疾病的防控提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 分类 流行现状 分子生物学 检测
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分子生物学技术在猪瘟野毒与兔化弱毒鉴别诊断方法中的研究进展 被引量:8
17
作者 于新友 李天芝 +2 位作者 苗立中 唐娜 沈志强 《猪业科学》 2015年第1期76-78,共3页
综述了分子生物学技术在猪瘟野毒与兔化弱毒鉴别诊断的4种方法(RT-PCR方法、荧光定量RT-PCR方法、RT-PCR与RFLP相结合方法、环介导等温扩增方法)的研究进展,对猪瘟的净化和防控有一定的参考价值。
关键词 分子生物学技术 猪瘟野毒 兔化弱毒 鉴别诊断
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猪细小病毒分子生物学诊断技术及基因工程疫苗的研究进展 被引量:2
18
作者 李天芝 于新友 +1 位作者 谢金文 沈志强 《养猪》 2016年第3期125-128,共4页
文章论述了猪细小病毒分子生物学诊断方法,包括常规PCR方法、多重PCR方法、荧光定量PCR方法、环介导等温扩增技术、基因芯片等,并就其基因工程疫苗方面的研究进行了着重阐述。
关键词 猪细小病毒 分子生物学诊断 基因工程疫苗
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猪圆环病毒2型分子生物学检测方法的研究进展 被引量:2
19
作者 李天芝 于新友 沈志强 《养猪》 2015年第3期117-120,共4页
文章综述了猪圆环病毒2型分子生物学检测方法,主要包括常规PCR方法、套式PCR方法、多重PCR方法、PCR-RFLP方法、荧光定量PCR方法、环介导等温扩增等6种方法,对猪圆环病毒2型相关疾病防控有一定的参考价值。
关键词 猪圆环病毒2型 分子生物学 检测方法
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枯草芽孢杆菌的生物学功能及其在养猪生产中的应用研究进展 被引量:5
20
作者 于新友 李天芝 沈志强 《猪业科学》 2016年第4期44-46,共3页
枯草芽孢杆菌具有调节肠道微生态平衡、促进畜禽对营养物质的消化吸收和增强免疫等作用,目前已在畜禽生产中广泛应用,文章就枯草芽孢杆菌的生物学功能以及在养猪生产中的应用研究作一综述。
关键词 枯草芽孢杆菌 生物学功能 养猪 应用
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