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基于VP6蛋白的牛轮状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用 被引量：1
1
作者 刘广阔 邹敏 +5 位作者 吴发兴 于皓同 王凯茸 张锐铮 张琪 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期1-6,共6页
为了建立牛轮状病毒(BRV)血清抗体的检测方法,从病料中克隆牛轮状病毒VP6基因,构建其表达载体,利用原核表达技术表达重组VP6蛋白,建立牛轮状病毒血清抗体间接ELISA检测方法。结果显示,重组VP6蛋白大小为40 ku,以包涵体形式表达,Western ... 为了建立牛轮状病毒(BRV)血清抗体的检测方法,从病料中克隆牛轮状病毒VP6基因,构建其表达载体,利用原核表达技术表达重组VP6蛋白,建立牛轮状病毒血清抗体间接ELISA检测方法。结果显示,重组VP6蛋白大小为40 ku,以包涵体形式表达,Western blot证实重组VP6蛋白有良好的反应原性;以4μg/mL浓度的抗原包被酶标板,一抗血清50倍稀释,酶标二抗稀释10000倍稀释,为最佳工作条件,阴阳临界值为0.233,表明该方法具有良好的特异性和敏感性。建立的检测BRV抗体的间接ELISA可用于临床BRV感染的检测。 展开更多
关键词 牛轮状病毒 VP6蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附试验
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山羊源贝氏柯克斯体抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
2
作者 张锐铮 于皓同 +2 位作者 王凯茸 张琪 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期21-26,共6页
为建立山羊源贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)抗体间接ELISA检测方法,对贝氏柯克斯体的com1基因进行克隆及原核表达,以com1纯化蛋白作为抗原,建立间接ELISA检测方法,并对临床收集的血清样本进行检测。结果显示,重组蛋白大小为27 ku,经W... 为建立山羊源贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)抗体间接ELISA检测方法,对贝氏柯克斯体的com1基因进行克隆及原核表达,以com1纯化蛋白作为抗原,建立间接ELISA检测方法,并对临床收集的血清样本进行检测。结果显示,重组蛋白大小为27 ku,经Western blot鉴定com1蛋白反应原性良好;ELISA检测方法抗原包被量为4μg/mL,血清的稀释倍数为1∶100,酶标二抗稀释倍数为1∶2500,阴阳临界值为0.278。用该方法对流产衣原体、山羊支原体、牛支原体阳性血清进行检测,均为阴性;当C.burnetii阳性血清稀释至2048倍时检测结果仍为阳性;批内、批间变异系数均小于10%。用该方法对陕西省部分羊场收集到的307份血清样本进行检测,样本阳性率为9.12%。成功建立了一种检测贝氏柯克斯体抗体的间接ELISA检测方法,这为C.burnetii引起的Q热的实验室诊断和流行病学调查提供了技术支持。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 com1蛋白 酶联免疫吸附试验 抗体检测
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间接竞争ELISA检测蜂蜜中氧氟沙星残留 被引量：1
3
作者 杨兴东 魏慧雅 曲扬 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第23期240-247,共8页
为了建立间接竞争ELISA法检测氧氟沙星(Ofloxacin,OFLX)在蜂蜜中的残留,本研究采用活性酯法将OFLX与载体蛋白偶联,得到抗OFLX完全抗原(OFLX-BSA)和检测抗原(OFLX-OVA)。采用OFLX-BSA免疫BALB/c小鼠,之后用杂交瘤等技术制备抗OFLX单克隆... 为了建立间接竞争ELISA法检测氧氟沙星(Ofloxacin,OFLX)在蜂蜜中的残留,本研究采用活性酯法将OFLX与载体蛋白偶联,得到抗OFLX完全抗原(OFLX-BSA)和检测抗原(OFLX-OVA)。采用OFLX-BSA免疫BALB/c小鼠,之后用杂交瘤等技术制备抗OFLX单克隆抗体。通过优化反应条件,建立间接竞争ELISA方法,并对该法的准确度、精密度和特异性进行判定。结果显示OFLX与载体蛋白偶联成功;得到一株抗OFLX的杂交瘤细胞株(3D7),单克隆抗体的IC50值为1.17 ng/mL;该法在蜂蜜中的OFLX平均添加回收率为84.1%,其批间变异系数均大于批内的变异系数,与马波沙星的交叉反应率为52.9%,与其他竞争反应物没有交叉反应。本研究建立的间接竞争ELISA方法能够满足OFLX在蜂蜜中残留的测定需求。 展开更多
关键词 氧氟沙星 免疫原 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验(elisa) 蜂蜜
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新霉素ELISA检测方法的建立 被引量：9
4
作者 刘沙洲 桑小雪 +2 位作者 欧阳华学 雷绍荣 白林含 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第14期227-231,共5页
目的:比较直接和间接竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的优缺点,建立新霉素残留ELISA检测方法。方法:利用自制的新霉素多克隆抗体,采用直接竞争和间接竞争ELISA方法检测新霉素残留,并比较两种方法的优缺点。结... 目的:比较直接和间接竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的优缺点,建立新霉素残留ELISA检测方法。方法:利用自制的新霉素多克隆抗体,采用直接竞争和间接竞争ELISA方法检测新霉素残留,并比较两种方法的优缺点。结果:新霉素抗血清和庆大霉素的交叉反应率为2.04%,和卡那霉素的交叉反应率为0.02%,和氨苄青霉素、红霉素、四环素的交叉反应率均小于0.01%。初步测试新霉素间接竞争ELISA法的准确性和回收率。板内误差小于4%,板间误差小于11%,回收率为135.5%～191.3%。直接竞争和间接竞争ELISA方法的检测极限分别为28.58ng/mL和51.74ng/mL,达到了国家对新霉素规定的500μg/kg MRL检测限。结论:建立了直接竞争和间接ELISA吸附检测方法,条件优化更成功的间接竞争ELISA可用于开发新霉素检测试剂盒。 展开更多
关键词 新霉素 多克隆抗体 竞争酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay elisa) 方法建立
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马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅰ酶联免疫吸附测定(ELISA) 被引量：13
5
作者 沈建忠 钱传范 +1 位作者 杨汉春 江海洋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期172-179,共8页
本文用混合酸酐法和活化酯法合成４种马杜霉素结合抗原。用其中一种作免疫原，免疫家兔产生抗体；用其余三种作包被原，探讨不同包被原用于ＥＬＩＳＡ检测马杜霉素残留时，对其灵敏度（Ｉ５０）和方法回收率的影响。试验结果表明，马杜... 本文用混合酸酐法和活化酯法合成４种马杜霉素结合抗原。用其中一种作免疫原，免疫家兔产生抗体；用其余三种作包被原，探讨不同包被原用于ＥＬＩＳＡ检测马杜霉素残留时，对其灵敏度（Ｉ５０）和方法回收率的影响。试验结果表明，马杜霉素结合抗原免疫家兔制备的抗体对马杜霉素具有很高的特异性、亲合性和选择性。在间接竞争ＥＬＩＳＡ中，使用Ｍ－Ｃ６－ＯＶＡ（ＡＥ）、Ｍ－ＯＶＡ（ＭＡ）和Ｍ－ＯＶＡ（ＡＥ）作包被原时，马杜霉素标准工作曲线的Ｉ５０值分别为３２３、９７５和８８０ｎｇ／ｍｌ，这证明Ｍ－Ｃ６－ＯＶＡ（ＡＥ）作包被原能大大提高ＥＬＩＳＡ检测的灵敏度。添加回收率试验测得鸡各组织样本回收率为７７７％～１０４３％，变异系数为３８％～１８０％，检测极限为３０～８０μｇ／ｋｇ。 展开更多
关键词 马杜霉素 鸡组织 elisa 药物残留
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ELISA和GICA快速检测水产品中氯霉素残留的比较 被引量：20
6
作者 张晓辉 李余动 +3 位作者 孔蕾 周燕 黄家庆 杜建明 《浙江农业学报》 CSCD 2005年第4期216-218,共3页
比较了水产品中氯霉素残留的ELISA和GICA检测方法。经测定,GICA检测限为1.000μg/kg。GICA对ELISA的阴性符合率为94.7%,阳性符合率为92.3%,总符合率为92.5%。结果表明:GICA方法操作简单、快速、特异性强、重复性好,适合水产品中氯霉素... 比较了水产品中氯霉素残留的ELISA和GICA检测方法。经测定,GICA检测限为1.000μg/kg。GICA对ELISA的阴性符合率为94.7%,阳性符合率为92.3%,总符合率为92.5%。结果表明:GICA方法操作简单、快速、特异性强、重复性好,适合水产品中氯霉素残留的现场筛选。 展开更多
关键词 水产品 氯霉素残留 elisa GICA
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玉米赤霉醇酶标抗原的制备及其直接和间接竞争ELISA检测方法的建立与比较 被引量：6
7
作者 刘媛 刘贤进 +4 位作者 余向阳 张存政 张晓 刘蓉蓉 龚振明 《分析科学学报》 CAS CSCD 2008年第2期141-144,共4页
采用活性酯法将半抗原玉米赤霉醇-16-羧丙基醚与辣根过氧化物酶连接,制备了三种结合比的酶标抗原。通过紫外吸收法和直接非竞争ELISA法对酶标抗原的偶联结果和抗原性进行鉴定。最终选择结合比为1.3∶1的酶标抗原建立直接竞争ELISA检测... 采用活性酯法将半抗原玉米赤霉醇-16-羧丙基醚与辣根过氧化物酶连接,制备了三种结合比的酶标抗原。通过紫外吸收法和直接非竞争ELISA法对酶标抗原的偶联结果和抗原性进行鉴定。最终选择结合比为1.3∶1的酶标抗原建立直接竞争ELISA检测方法。并对建立的直接竞争ELISA(DC-ELISA)与间接竞争ELISA(IC-ELISA)方法在检出限、检测线性范围、检测时间和二抗的使用方面进行了比较。 展开更多
关键词 玉米赤霉醇 酶标抗原 酶联免疫吸附试验(elisa)
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双抗夹心ELISA检测食品中大肠杆菌O157:H7方法研究 被引量：31
8
作者 葛萃萃 钟青萍 +1 位作者 张旺 欧阳鑫 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第1期171-175,共5页
研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320;以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体,效价达1:25600。以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆... 研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320;以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体,效价达1:25600。以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法检测大肠杆菌O157:H7,正交试验分析表明,捕获抗体于37℃包被2h、不封闭、抗原与捕获抗体于37℃结合2h、检测抗体浓度为0.25mg/ml、与抗原于37℃结合1h为最优反应条件。该方法对纯培养菌液检出限为105CFU/ml,具有良好的敏感性及特异性。染菌样品经在EC增菌液中选择性培养后进行双抗夹心ELISA检测,接种量为0.1～1CFU/g(ml)的样品在培养12h后可检出阳性反应,1～10CFU/g(ml)的样品在培养8h后可检出阳性反应。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7:双抗夹心elisa 检测
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毒死蜱残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制 被引量：4
9
作者 魏松红 刘冰 +2 位作者 纪明山 谷祖敏 王英姿 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期246-249,共4页
在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1... 在多克隆抗体的基础上研制一种适用于检测样品中毒死蜱残留的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定。结果表明,研制的试剂盒最低检测限为0.5μg/L,线性检测范围为1.8～1000μg/L,供试样品检测结果的批内、批间变异系数均低于8%,回收率均高于85%。试剂盒在4℃或-20℃条件下至少可保存6个月。 展开更多
关键词 毒死蜱 残留 酶联免疫吸附分析 试剂盒
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牛组织中阿维菌素残留的ELISA研究 被引量：20
10
作者 李俊锁 钱传范 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期77-83,共7页
本文探讨了检测牛组织（血浆、肌肉和肝）中阿维菌素（ＡＶＭ）残留的间接竞争ＥＬＩＳＡ反应条件和样本前处理方法，并对添加样本进行了测定。竞争反应可耐受２０％（ｖ／ｖ）的甲醇。使用４″－Ｏ－（单）琥珀酰ＡＶＭ－ＯＶＡ和５－... 本文探讨了检测牛组织（血浆、肌肉和肝）中阿维菌素（ＡＶＭ）残留的间接竞争ＥＬＩＳＡ反应条件和样本前处理方法，并对添加样本进行了测定。竞争反应可耐受２０％（ｖ／ｖ）的甲醇。使用４″－Ｏ－（单）琥珀酰ＡＶＭ－ＯＶＡ和５－Ｏ－（单）琥珀酰ＡＶＭ－ＯＶＡ作包被原，ＡＶＭ标准液的Ｉ５０＝１．８～４．０ｎｇ／ｍＬ，检测极限为０．０２～０．２ｎｇ／ｍＬ。样本经甲醇一次提取和稀释后直接进行检测，各样本介质中ＡＶＭ的Ｉ５０＝３．６～３０．２ｎｇ／ｍＬ，样本检测极限为０．１～０．６μｇ／ｋｇ。在６．０～６０．０μｇ／ｋｇ添加浓度范围内，回收率（％）＝８７．９～１０８．８（９５．０±８．０），变异系数（ＣＶ．％）＝２．８～１６．９（１０．０±５．２）。本方法适宜对大批量样本进行快速检测。 展开更多
关键词 牛 阿维菌素 组织残留 酶联免疫吸附 残留
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马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅱ 免疫亲合色谱—酶联免疫吸附法(IAC—ELISA) 被引量：5
11
作者 沈建忠 钱传范 +1 位作者 江海洋 杨汉春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期548-553,共6页
本文首次报道ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜霉素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７ １６０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ，Ⅱ柱为３ ７５０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ） 。组织... 本文首次报道ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜霉素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７ １６０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ，Ⅱ柱为３ ７５０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ） 。组织样品用甲醇提取，经ＩＡＣ柱分离纯化，ＥＬＩＳＡ检测，即ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ 方法。本试验揭示，以组织样本提取纯化稀释液为介质制备的标准曲线（Ｉ５０ 为３３３ ～３７１ｎｇ·ｍｌ－ １ ，斜率为１９５ ～２２０ ，检测极限为１０ ～２８ｎｇ·ｇ－ １） ，其Ｉ５０ 值和斜率与以ＰＢＳＴ－ １０ ％ 甲醇为介质的标准曲线相符，实际ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ检测时，各组织的标准曲线可用后者代替，使操作大为简化、实用。各组织添加马杜霉素３００ ～１２０ ．０μｇ·ｋｇ － １ 水平下，测得样本回收率为７６４ ％ ～１０９ ．０ ％ ，变异系数为３８ ％ ～１６ ．４ ％ 。结果证明了该方法的可靠性。本文建立的ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ法是目前国内外唯一报道的最简便、灵敏的马杜霉素残留检测方法。 展开更多
关键词 马杜霉素 免疫亲合色谱 elisa 肉鸡 残留分析
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甲拌磷残留检测间接竞争ELISA试剂盒的研制 被引量：2
12
作者 魏松红 逄若霖 +4 位作者 王翀 纪明山 谷祖敏 祁之秋 王英姿 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期284-287,共4页
研制用于检测甲拌磷残留量的间接竞争ELISA试剂盒。甲拌磷包被抗原的最佳工作质量浓度为4mg/L,抗体的最佳稀释倍数为8000,甲拌磷多克隆抗体交叉反应率小于20%,甲拌磷抑制率回归曲线为y=18.846x+6.9949,在1～5000μg/L范围内呈线性关系,... 研制用于检测甲拌磷残留量的间接竞争ELISA试剂盒。甲拌磷包被抗原的最佳工作质量浓度为4mg/L,抗体的最佳稀释倍数为8000,甲拌磷多克隆抗体交叉反应率小于20%,甲拌磷抑制率回归曲线为y=18.846x+6.9949,在1～5000μg/L范围内呈线性关系,检测限为4.90μg/L,IC50为191.37μg/L。甲拌磷试剂盒的添加回收率均高于75%,供试样品检测结果的批内和批间变异系数均低于10%。试剂盒在4℃或-20℃下有效期为270d。 展开更多
关键词 甲拌磷 残留 酶联免疫吸附测定法 试剂盒
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鸡肝脏和肌肉组织中常山酮残留的ELISA检测 被引量：5
13
作者 吴宁鹏 杜向党 沈建忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期597-602,共6页
将常山酮进行人工改造,制备了半抗原常山酮琥珀酸衍生物（Hal-suc）.采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将半抗原与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联,制备免疫原和包被原.动物免疫6次后采血制备抗血清,以间接ELISA法测定血清效价... 将常山酮进行人工改造,制备了半抗原常山酮琥珀酸衍生物（Hal-suc）.采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将半抗原与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联,制备免疫原和包被原.动物免疫6次后采血制备抗血清,以间接ELISA法测定血清效价,测得抗血清的最佳工作浓度为1∶102 400.建立了常山酮在鸡肝脏和肌肉组织中检测的ELISA法,该方法在50、100、500 ng/g 的添加浓度水平下,在鸡肝脏和肌肉组织中测得的平均回收率范围分别为74.2%～96.8%和74.3%～90.0%,检测限分别为28和19 ng/g. 展开更多
关键词 常山酮 鸡肝脏 鸡肌肉 残留 酶联免疫吸附测定法
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基于多克隆抗体包被磁性纳米粒子的ELISA法检测西维因 被引量：3
14
作者 张灿 崔涵雨 +4 位作者 韩玉凤 王现平 何铭 陈波 刘源 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期296-300,共5页
建立一种基于抗体包被氨基化Fe3O4磁性纳米粒子,建立免疫磁珠酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法用于检测氨基甲酸酯农药西维因。结果表明:在最佳条件下,西维因质量浓度在1×10-3~10 mg/L范围内,建立的... 建立一种基于抗体包被氨基化Fe3O4磁性纳米粒子,建立免疫磁珠酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法用于检测氨基甲酸酯农药西维因。结果表明:在最佳条件下,西维因质量浓度在1×10-3~10 mg/L范围内,建立的免疫磁珠ELISA法具有较好的线性关系(y=8.87lnx+72.77,R2=0.994),抑制率最高可达90.6%;测得的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为0.077 mg/L,检出限(IC15)为1.48×10-3 mg/L。以质量浓度1 mg/L的西维因在相同条件下重复检测3次,相对标准偏差为1.67%。以大米和卷心菜为实际样品进行西维因加标回收率实验,通过免疫磁珠ELISA法测得的回收率为70.5%~123.1%,同时采用高效液相色谱法进行相关性验证,结果表明,2种方法检测结果的相关性较好(R2=0.91)。通过一系列分析表明,所建立的抗体包被磁性纳米粒子ELISA法可用于快速检测西维因。 展开更多
关键词 西维因 免疫磁珠 酶标记免疫分析 检测 相关性
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高灵敏间接竞争ELISA检测羊乳样本中的牛乳成分 被引量：3
15
作者 王士峰 张世伟 +3 位作者 赖心田 冯荣虎 伍聪 杨国武 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期41-43,46,共4页
建立可检测羊乳中掺伪牛乳的间接竞争ELISA方法。通过用牛β-酪蛋白免疫小鼠,制备可特异识别牛乳酪蛋白的单克隆抗体3B9。基于此抗体建立的ELISA的IC50值为92.8 ng/m L牛奶蛋白,理论最低检测限0.35 ng/m L,相对标准偏差小于12%。该方法... 建立可检测羊乳中掺伪牛乳的间接竞争ELISA方法。通过用牛β-酪蛋白免疫小鼠,制备可特异识别牛乳酪蛋白的单克隆抗体3B9。基于此抗体建立的ELISA的IC50值为92.8 ng/m L牛奶蛋白,理论最低检测限0.35 ng/m L,相对标准偏差小于12%。该方法也适用于检测高温高压处理的乳制品,加之操作简单高效,适合大规模高通量样品筛查及羊乳样本中牛奶蛋白半定量分析。 展开更多
关键词 羊乳 掺假 牛奶 单克隆抗体 酶联免疫分析 elisa
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酶联免疫法(ELISA)测定瓶装黄酒中黄曲霉毒素B 被引量：8
16
作者 吉小凤 陈笑芸 魏巍 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第11期2006-2010,共5页
采用酶联免疫法对瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1含量进行测定,并对该方法的线性、灵敏度、回收率和重现性进行验证,同时对如何预防瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1污染进行讨论。黄曲霉毒素B1标准品在0.1～2.0μg·L-1范围内线性良好,y=-0.4679x＋... 采用酶联免疫法对瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1含量进行测定,并对该方法的线性、灵敏度、回收率和重现性进行验证,同时对如何预防瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1污染进行讨论。黄曲霉毒素B1标准品在0.1～2.0μg·L-1范围内线性良好,y=-0.4679x＋0.3132,R2=0.998 2,该方法对黄曲霉毒素B1的最低检出浓度为0.05μg·kg-1,不同浓度添加回收试验所得回收率为90.2%～106.0%,重复性好,精密度为3.5%。通过对26个不同产品特性黄酒样品中黄曲霉毒素B1的测定,发现所有样品均有检出,但黄曲霉毒素B1的含量均小于2.0μg·kg-1。酶联免疫检测方法研究结果表明,该方法测定快速,定量准确,重现性好,可高效率地定量检测大量市售黄酒样品中黄曲霉毒素B1的含量。 展开更多
关键词 酶联免疫法 黄曲霉毒素B1 黄酒
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肉及肉制品中莱克多巴胺的ELISA检测方法的建立 被引量：7
17
作者 郑海松 陈雪娇 +4 位作者 杨小娇 余晓峰 孙娟娟 李云飞 李刚 《肉类研究》 2011年第10期26-28,共3页
建立一种肉及其制品中莱克多巴胺的酶联免疫分析方法。对莱克多巴胺残留量进行选择性(交叉反应)、特异性与检测限以及回收率和精密度测试。结果显示,选择酶联免疫法来检测样品中的莱克多巴胺准确性较好,其对莱克多巴胺结构类似物的交叉... 建立一种肉及其制品中莱克多巴胺的酶联免疫分析方法。对莱克多巴胺残留量进行选择性(交叉反应)、特异性与检测限以及回收率和精密度测试。结果显示,选择酶联免疫法来检测样品中的莱克多巴胺准确性较好,其对莱克多巴胺结构类似物的交叉反应率都小于1%,出口猪肉罐头和牛肉中的检测限(LOD)分别为(0.28±0.30)μg/kg和(0.26±0.21)μg/kg,样品平均回收率在82.9%～91.1%之间,相对标准偏差为4.3%～8.7%,经高效液相色谱(HPLC)确证假阳性率小于等于2.0%,表明酶联免疫分析定量法可快速、准确实现对食品中莱克多巴胺残留量的快速筛选。 展开更多
关键词 酶联免疫分析(elisa) 莱克多巴胺 食品 快速检测
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非洲马瘟VP7蛋白多克隆抗体的制备及IgM捕获ELISA检测方法的建立 被引量：9
18
作者 郑小龙 朱来华 +6 位作者 王群 艾军 邓明俊 肖西志 梁成珠 姜帆 于业锋 《中国动物检疫》 CAS 2014年第5期70-73,共4页
为建立早期快速检测非洲马瘟抗体的IgM捕获ELISA(MAC-ELISA)方法,本试验利用大肠杆菌表达出具有良好抗原性的VP7蛋白,并制备该蛋白的多克隆抗体,通过优化抗原浓度、血清稀释度及酶标抗体稀释度等,建立了检测非洲马瘟的MAC-ELISA方法,并... 为建立早期快速检测非洲马瘟抗体的IgM捕获ELISA(MAC-ELISA)方法,本试验利用大肠杆菌表达出具有良好抗原性的VP7蛋白,并制备该蛋白的多克隆抗体,通过优化抗原浓度、血清稀释度及酶标抗体稀释度等,建立了检测非洲马瘟的MAC-ELISA方法,并进行了初步应用。结果表明,利用重组表达的VP7蛋白成功建立了检测非洲马瘟的MAC-ELISA方法。 展开更多
关键词 非洲马瘟 IgM捕获elisa(MAC—elisa) VP7蛋白
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固相抗体直接竞争ELISA法测定氯黄隆在土壤中的残留动态 被引量：4
19
作者 刘曙照 袁树忠 +1 位作者 徐暄 钱传范 《农药学学报》 CAS CSCD 2000年第2期57-62,共6页
采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析... 采用包被抗体直接竞争 EL ISA法测定了氯黄隆在盆土中的残留动态和农田土壤中氯黄隆的残留量。结果表明 :EL ISA法测定土壤中氯黄隆的检测限 <0 .1ng/ g,标准添加回收率为 85.4 %～ 118% ,变异系数为 8.95%～ 16 .14% ,符合残留分析的要求。在本实验条件下 ,氯黄隆在土壤中的半衰期为 2 2～ 2 6 d,6 0 d降解 80 %以上。麦茬大田连续两年使用氯黄隆2 2 .5g/ hm2 、4 5g/ hm2 ,第一年麦收时中性沙质土壤和弱碱性沙壤土中氯黄隆的残留量分别为0 .2 4、0 .56 ng/ g和 0 .30、0 .96 ng/ g,第二年分别为 0 .2 8、0 .6 7ng/ g和 0 .38、1.0 9ng/ g,与平行进行的高效液相色谱法、生物测定法测定结果基本一致。 展开更多
关键词 测定 氯黄隆 除草剂 土壤 残留 固相抗体直接竞争elisa法
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进出口动物中新霉素ELISA检测方法的建立 被引量：3
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作者 孙明君 邱芳 +1 位作者 张金玲 郑小龙 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第12期3163-3169,共7页
应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA 快速检测技术,并对建立的方... 应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA 快速检测技术,并对建立的方法进行了回收率和特异性试验。结果表明,建立的检测方法包被人工合成抗原的最适稀释度为1∶200,抗体的最佳稀释度为1∶2000,半数抑制浓度（IC50）为6.99 ng/mL；该方法的最低检测限达40 ng/mL,与庆大霉素、卡那霉素、链霉素、托普霉素、阿米卡星、双氢链霉素的交叉反应率均小于0.1%,平均加标回收率83.77%。标准曲线在1.5-40 ng/mL 范围内是线性的,相关系数为0.987,标准曲线方程为y=-37.66x＋94.592；与常规液相检测方法相比操作简单、快速。本研究建立了一种快速、高效、特异的新霉素ELISA 检测方法。 展开更多
关键词 进出口食用动物 新霉素 酶联免疫吸附试验 检测方法
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