为了满足乳制品中食源性致病菌精确、高效和高通量检测需求,文章以典型食源性致病菌大肠埃希氏菌O157、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌和沙门氏菌作为目的菌,建立1种灵敏稳定的多重芯片式数字PCR(Multiplex digital chip PCR)...为了满足乳制品中食源性致病菌精确、高效和高通量检测需求,文章以典型食源性致病菌大肠埃希氏菌O157、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌和沙门氏菌作为目的菌,建立1种灵敏稳定的多重芯片式数字PCR(Multiplex digital chip PCR)反应体系。针对4种致病菌的靶向基因,设计特异性引物,优化多重反应引物组合和反应条件,并验证其特异性和灵敏度。结果表明,该四重反应体系具有良好的特异性且未出现交叉反应。体系对4种菌株最低检出限分别达0.38、1.03、0.69 copies/μL和0.24 copies/μL,与单重反应体系检测灵敏度相当,未发生混合引物抑制反应。方法对模拟阳性样品、生乳和市售乳制品检测结果证明了其在乳原料及乳制品质量安全控制中的应用前景,文章构建的四重反应体系可为乳制品的检测与监管提供技术支持。展开更多
建立一种能排除高浓度乳酸菌本底干扰的发酵用乳酸菌菌粉中污染菌总数的检测方法。实验采用不同计数琼脂培养基和不同检验方法测定6种乳酸菌质控样和4种市售发酵用乳酸菌菌粉中乳酸菌的生长情况,确定最优检测用培养基和检验方法,并以4...建立一种能排除高浓度乳酸菌本底干扰的发酵用乳酸菌菌粉中污染菌总数的检测方法。实验采用不同计数琼脂培养基和不同检验方法测定6种乳酸菌质控样和4种市售发酵用乳酸菌菌粉中乳酸菌的生长情况,确定最优检测用培养基和检验方法,并以4种人工污染的乳酸菌菌粉为试样进行方法有效性验证。结果表明:乳酸菌菌粉稀释样经微孔滤膜抽滤法和砂芯漏斗过滤处理后,结合不含糖的无碳源菌落计数琼脂(plate count medium without carbon source,PCCS)培养,可在有效抑制菌粉中乳酸菌生长的同时对污染菌进行特异性计数,检测下限低至10CFU/g。该方法具有良好的检测灵敏度,可用于发酵用乳酸菌菌粉中污染菌的快速、准确计数,有效提高菌粉生产过程及终产品的质量管控。展开更多
文摘建立一种能排除高浓度乳酸菌本底干扰的发酵用乳酸菌菌粉中污染菌总数的检测方法。实验采用不同计数琼脂培养基和不同检验方法测定6种乳酸菌质控样和4种市售发酵用乳酸菌菌粉中乳酸菌的生长情况,确定最优检测用培养基和检验方法,并以4种人工污染的乳酸菌菌粉为试样进行方法有效性验证。结果表明:乳酸菌菌粉稀释样经微孔滤膜抽滤法和砂芯漏斗过滤处理后,结合不含糖的无碳源菌落计数琼脂(plate count medium without carbon source,PCCS)培养,可在有效抑制菌粉中乳酸菌生长的同时对污染菌进行特异性计数,检测下限低至10CFU/g。该方法具有良好的检测灵敏度,可用于发酵用乳酸菌菌粉中污染菌的快速、准确计数,有效提高菌粉生产过程及终产品的质量管控。
