鸡肠炎沙门菌毒力蛋白SipD生物信息学分析及原核表达

1

作者 原亮 韩晓玺 +7 位作者 巩颖超 樊夏楠 郝蓓莉 郝双双 李昌文 常轶聪 李睿 刘芳萍 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2998-3007,共10页

【目的】预测肠炎沙门菌(Salmonella Enteritidis, SE)SipD蛋白的潜在生物学功能,并表达纯化该蛋白,为探索SipD蛋白作为抗沙门菌纳米抗体的候选抗原提供理论依据。【方法】利用DNAStar软件对GenBank中公布的不同血清型沙门菌株SipD蛋白... 【目的】预测肠炎沙门菌(Salmonella Enteritidis, SE)SipD蛋白的潜在生物学功能,并表达纯化该蛋白,为探索SipD蛋白作为抗沙门菌纳米抗体的候选抗原提供理论依据。【方法】利用DNAStar软件对GenBank中公布的不同血清型沙门菌株SipD蛋白氨基酸序列进行相似性比对,并通过在线软件对SipD蛋白进行生物信息学分析。根据GenBank中SipD基因序列设计引物,以鸡肠炎沙门菌标准菌株(ATCC 13076)为模板,PCR扩增SipD基因,构建pET-32a(+)-SipD重组质粒,并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。应用IPTG诱导重组SipD蛋白的表达,并利用Ni^(2+)亲和层析法纯化。应用SDS-PAGE和Western blotting检测SipD蛋白的表达情况。【结果】SipD蛋白在不同血清型沙门菌之间高度保守;SipD蛋白分子式为C_(1619)H_(2573)N_(441)O_(540)S_(8),无跨膜区,为膜外蛋白,不存在信号肽,该蛋白的第1~343位氨基酸具有来自超家族侵袭质粒抗原IpaD的保守结构域;SipD蛋白二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角、无规则卷曲占比分别为59.18%、6.41%、3.21%和31.20%;SipD蛋白与B细胞结合的抗原表位有12个。SipD基因长1 029 bp,在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中以可溶性蛋白的形式表达;经纯化、透析、浓缩后蛋白浓度为8.6 mg/mL。SDS-PAGE和Western blotting分析发现,SipD蛋白纯度较高,可用于免疫羊驼制备纳米抗体。【结论】SipD蛋白为膜外蛋白,具有较多抗原结合位点;经表达纯化得到纯度较高的SipD重组蛋白,为进一步制备靶向鸡肠炎沙门菌SipD蛋白的纳米抗体提供材料。 展开更多

关键词 鸡 肠炎沙门菌 SipD蛋白 生物信息学 原核表达

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鸭疫里氏杆菌LC1和CX1株的分离鉴定及致病性分析

2

作者 谢碧林 林志敏 +7 位作者 林彬彬 徐以娟 林锋强 闫露 伍慧妮 李翠婷 周海欧 李兆龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期4196-4203,共8页

旨在对福建莆田某养殖场疑似感染鸭传染性浆膜炎患病番鸭病料进行菌株的分离、纯化、鉴定和致病性分析。采集10日龄患病番鸭的脑、肝组织进行菌株分离纯化、16S rDNA PCR鉴定和血清型鉴定,并检测分离纯化菌株的致病性。结果得到2株11型... 旨在对福建莆田某养殖场疑似感染鸭传染性浆膜炎患病番鸭病料进行菌株的分离、纯化、鉴定和致病性分析。采集10日龄患病番鸭的脑、肝组织进行菌株分离纯化、16S rDNA PCR鉴定和血清型鉴定,并检测分离纯化菌株的致病性。结果得到2株11型鸭疫里氏杆菌,分别将其命名为LC1和CX1。对2株分离株进行16S rDNA序列测序,开展遗传进化分析和MLST分型,发现LC1和CX1分离株16S rDNA遗传进化上与鸭疫里氏杆菌福建分离株RAf115和上海分离株Yb2处在同一进化分支上,相似性为99.9%。测定其耐药性发现,分离株对β-内酰胺类、氯霉素类及四环素敏感,对大环内酯类和氨基糖苷类等抗菌素不敏感。进一步检测该分离株对雏番鸭致病性,结果发现两株菌株(1.3×10^(6)CFU·mL^(-1))的致死率为100%,且病死鸭表现典型心包炎、肝周炎、气囊炎和脾肿大的鸭疫里氏杆菌病。病理结果发现,致死鸭脾红白髓界线消失,呈现大量坏死灶。此外,两分离株致死鸭的心肌纤维呈撕裂状病变。综上,本研究分离并鉴定2株11型鸭疫里氏杆菌LC1和CX1,MLST分型分别为ST111、ST114,为鸭疫里氏杆菌病的防控及后续研究提供参考依据。 展开更多

关键词 鸭疫里氏杆菌 LC1 CX1 遗传进化分析 致病性

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通辽部分地区鸭源大肠杆菌耐药性检测及多重耐药菌株YA-1全基因组测序分析

3

作者 王梓 孙淼 +6 位作者 王永强 孟令浩 耿超 石金川 陈伟 邱军 刘锴 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2585-2596,共12页

【目的】大肠杆菌作为家禽最常见细菌性病原之一,其耐药性的不断增强已引起广泛关注。试验旨在了解通辽地区部分鸭场大肠杆菌的耐药性及耐药基因分布,为该地区鸭源大肠杆菌耐药性及耐药基因的研究提供参考。【方法】经16S rRNA测序、生... 【目的】大肠杆菌作为家禽最常见细菌性病原之一,其耐药性的不断增强已引起广泛关注。试验旨在了解通辽地区部分鸭场大肠杆菌的耐药性及耐药基因分布,为该地区鸭源大肠杆菌耐药性及耐药基因的研究提供参考。【方法】经16S rRNA测序、生化试验和小鼠致病性试验对送检的通辽市各旗县15份病死鸭肠道样品进行病原菌分离纯化,对分离菌株进行药敏试验及耐药基因的PCR检测,并选取多重耐药菌株进行全基因组测序。【结果】所分离的10株鸭源大肠杆菌均具有不同程度耐药性,对链霉素、环丙沙星、恩诺沙星等药物的耐药率在80%及以上,耐药基因aphA1、strB和qnrS的检出率最高,达到100%。多重耐药菌株YA-1全基因组测序证实,该菌株染色体大小为4 844 827 bp,携带3个完整的质粒,大小分别为144 776 bp(pTLYA-1)、113 584 bp(pTLYA-2)和77 544 bp(pTLYA-3)。分离菌株携带arr-3、aadA16、sul1等70个耐药基因,其中pTLYA-1中携arr-3、dfrA27、aadA16等8个可移动耐药基因,pTLYA-3中携带floR、tetA、sul2等5个可移动耐药基因,pTLYA-2中未发现耐药基因。【结论】由通辽地区部分鸭场分离的鸭源大肠杆菌存在多重耐药性,耐药水平较高,aphA1、strB和qnrS耐药基因普遍流行。 展开更多

关键词 鸭 大肠杆菌 耐药性 耐药基因 全基因组测序

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貂源绿脓杆菌分离株的鉴定、血清学分型及药敏试验 被引量：15

4

作者 杨海燕 王颖 +3 位作者 张传美 秦志华 张洪亮 单虎 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第7期127-131,共5页

为了解山东部分地区水貂绿脓杆菌的感染状况及分离菌的耐药情况,为临床用药和治疗提供依据和参考,对从患病水貂病料中分离得到的15个分离菌株进行了生化鉴定、PCR鉴定、血清学分型及药敏试验。生化试验和PCR鉴定结果表明,所获得的15株... 为了解山东部分地区水貂绿脓杆菌的感染状况及分离菌的耐药情况,为临床用药和治疗提供依据和参考,对从患病水貂病料中分离得到的15个分离菌株进行了生化鉴定、PCR鉴定、血清学分型及药敏试验。生化试验和PCR鉴定结果表明,所获得的15株分离菌均为绿脓杆菌;血清型分析结果表明15个分离菌株分属G型、B型、E型3种血清型,其中G型为主要流行血清型,占分离菌株的80%(12/15)。药敏试验结果显示,水貂绿脓杆菌分离株对所测各种抗菌药物耐药程度不同,其中对头孢呋肟、四环素、复方新诺明、羧苄青霉素4种药物耐药性最强,耐药率为100%,多数菌株表现为0抑菌圈;对头孢哌酮、头孢曲松2种药物敏感性降低,已有部分菌株产生了耐药性,耐药率分别为6.67%和26.67%;大多数菌株对环丙沙星敏感,无耐药性产生,但敏感性不高,中敏菌株比率为46.67%;对丁胺卡那霉素、庆大霉素、头孢他啶等3种药物敏感性高,无耐药菌株。 展开更多

关键词 貂 绿脓杆菌 鉴定 血清型 药敏试验

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魏氏梭菌病诊断方法研究进展 被引量：31

5

作者 李云霄 金鑫 +2 位作者 张营 单雪梅 于丹 《动物医学进展》 CSCD 2007年第7期88-93,共6页

魏氏梭菌病是由魏氏梭菌引起的,可感染多种动物,以导致犊牛肠毒血症、绵羊羔痢疾、仔猪坏死性肠炎以及兔肠炎等为主要特征的一种重要的人兽共患传染病。该菌通常感染2月龄~10月龄且膘情较好的牛、羊,在其消化道产生大量原毒素,经胰蛋白... 魏氏梭菌病是由魏氏梭菌引起的,可感染多种动物,以导致犊牛肠毒血症、绵羊羔痢疾、仔猪坏死性肠炎以及兔肠炎等为主要特征的一种重要的人兽共患传染病。该菌通常感染2月龄~10月龄且膘情较好的牛、羊,在其消化道产生大量原毒素,经胰蛋白酶激活变为毒素,从而进入血液,引发的疾病发生非常突然,与家畜“猝死症”有密切联系。病理变化以全身实质器官出血为突出特征,反刍动物以瓣胃、肠管最为明显。目前,已成功研制出浓缩氢氧化铝灭活苗、类毒素疫苗来控制此病。文章综述了近年来针对魏氏梭菌分型,病原、毒素及抗毒素的免疫学和分子生物学等方面诊断技术研究进展。 展开更多

关键词 魏氏梭菌病 魏氏梭菌毒素 魏氏梭菌分型 诊断技术

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我国鸭疫里氏杆菌病流行概述 被引量：23

6

作者 吴彩艳 程淑琴 +8 位作者 张建峰 李娟 林栩慧 董嘉文 吕敏娜 廖申权 戚南山 孙铭飞 刘雅红 《动物医学进展》 北大核心 2017年第6期86-90,共5页

鸭疫里氏杆菌因其血清型多且复杂,抗药性严重,其已成为危害我国养鸭业的一种主要疾病。为进一步提高对鸭疫里氏杆菌病的防控水平,论文就该病的流行病学、诊断方法及疫苗研制等方面的研究进展进行综述,以期为指导临床安全合理用药及制定... 鸭疫里氏杆菌因其血清型多且复杂,抗药性严重,其已成为危害我国养鸭业的一种主要疾病。为进一步提高对鸭疫里氏杆菌病的防控水平,论文就该病的流行病学、诊断方法及疫苗研制等方面的研究进展进行综述,以期为指导临床安全合理用药及制定综合防控措施提供参考。 展开更多

关键词 鸭疫里氏杆菌病 流行病学 诊断方法 疫苗研制

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B型副鸡禽杆菌安徽株的分离与鉴定 被引量：14

7

作者 路迎迎 路明华 +3 位作者 陈小玲 张培君 龚玉梅 王宏俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期122-125,共4页

2012年12月,安徽某些蛋鸡养殖场出现大量鼻炎症状的病鸡,主要表现为眼结膜发炎,眼睑肿胀、流泪,一侧或两则颜面肿胀,产蛋鸡产蛋量明显下降。为探索该病病因及制定有效防治措施,对病鸡样品进行了细菌学检验。通过细菌分离、PCR、平板凝... 2012年12月,安徽某些蛋鸡养殖场出现大量鼻炎症状的病鸡,主要表现为眼结膜发炎,眼睑肿胀、流泪,一侧或两则颜面肿胀,产蛋鸡产蛋量明显下降。为探索该病病因及制定有效防治措施,对病鸡样品进行了细菌学检验。通过细菌分离、PCR、平板凝集及血清型检测等方法,鉴定出4株副鸡禽杆菌,该分离株感染试验鸡能复制出与临床表现一致的病例。经实验室检验确认,引起该病的病原体是B型副鸡禽杆菌。 展开更多

关键词 副鸡禽杆菌 B型 分离 鉴定

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乳酸菌发酵中药制剂防制鸡球虫病条件的优化及应用 被引量：9

8

作者 秦波 林显华 +3 位作者 王丽荣 孙明杰 崔斌 陈雷 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第11期3093-3098,共6页

本试验旨在摸索乳酸菌发酵抗鸡球虫中药制剂的最佳制备条件,研究其对鸡球虫病的防制效果。首先对乳酸菌发酵中药制剂的最佳菌株、接菌量、时间、温度、pH条件进行摸索,制得乳酸菌发酵中药制剂,然后选取150只AA+肉鸡进行效果试验。试验... 本试验旨在摸索乳酸菌发酵抗鸡球虫中药制剂的最佳制备条件,研究其对鸡球虫病的防制效果。首先对乳酸菌发酵中药制剂的最佳菌株、接菌量、时间、温度、pH条件进行摸索,制得乳酸菌发酵中药制剂,然后选取150只AA+肉鸡进行效果试验。试验随机分为对照组、感染组、乳酸菌发酵组、西药组和纯中药组,21日龄时计算各试验组鸡生长性能及免疫细胞因子IgG、IL-12、IFN-γ、IL-10的含量。结果显示,3.0%戊糖片球菌PP培养于浓度1.0g/mL的中药培养基,在pH 6.0、37℃的温度下培养12h,戊糖片球菌PP的活性最高,生长良好;且乳酸菌发酵组鸡的平均日增重显著高于感染组(P<0.05),高于纯中药组及西药组,但差异不显著(P>0.05),与对照组增重效果相当(P>0.05);其料重比(F/G)显著低于感染组(P<0.05),低于纯中药组、西药组,但差异不显著(P>0.05);其IL-12、IFN-γ的表达均显著高于感染组(P<0.05),高于纯中药组和西药组,但差异不显著(P>0.05);其IL-10、IgG显著高于感染组(P<0.05),稍高于纯中药组及西药组(P>0.05)。结果表明经优化的乳酸菌发酵中药制剂可提高感染球虫鸡的生长性能,且能增强机体免疫水平。 展开更多

关键词 乳酸菌发酵中药 鸡球虫病 生长性能 免疫水平

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单增李斯特菌inlB基因缺失株的构建及其生物学特性 被引量：7

9

作者 魏丽 邓兴梅 +3 位作者 蒋建军 剡根强 马勋 王鹏雁 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第10期19-24,共6页

为探究单增李斯特菌inlB基因缺失株的生物学特性,利用同源重组技术成功构建了inlB基因突变株(LM90-△inlB)。对突变株进行了溶血试验、细菌计数小鼠肝、脾和脑载菌试验测定、体外耐酸碱生长培养试验及鼠脑微血管内皮细胞侵袭、黏附、增... 为探究单增李斯特菌inlB基因缺失株的生物学特性,利用同源重组技术成功构建了inlB基因突变株(LM90-△inlB)。对突变株进行了溶血试验、细菌计数小鼠肝、脾和脑载菌试验测定、体外耐酸碱生长培养试验及鼠脑微血管内皮细胞侵袭、黏附、增殖试验。结果显示,突变株溶血活性无变化;小鼠肝脏载菌量突变株低于亲本株,但差异不显著,脾脏载菌量无差异;突变株的毒力显著降低,对小鼠半数致死剂量比野生型菌株有明显升高(P<0.05);在体外耐酸碱生长能力培养中,inlB突变株耐酸性没有改变,而耐碱能力强于亲本株;细胞黏附侵袭及增殖试验表明突变株明显低于亲本株(P<0.05)。说明inlB基因对LM90的毒力具有一定的调控作用,结果对于阐明LM毒力因子的致病机理提供了科学依据。 展开更多

关键词 单增李斯特菌 inlB基因 缺失株 同源重组 生物学特性

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吉林省规模化种鸡场沙门菌血清型鉴定与毒力基因及耐药性检测 被引量：6

10

作者 崔鹤馨 王楠 +4 位作者 呼延含蓉 李男 胡博 田鑫 田来明 《动物医学进展》 北大核心 2020年第11期58-61,共4页

为了解吉林省规模化种鸡场沙门菌血清型、毒力基因及耐药性流行情况,2019年采集种鸡肛拭子、死胚、病死雏鸡等病料组织1024份,采用常规细菌分离鉴定方法和PCR方法鉴定得到148株沙门菌。采用Kauffmann-White法、PCR法、K-B药敏纸片法分... 为了解吉林省规模化种鸡场沙门菌血清型、毒力基因及耐药性流行情况,2019年采集种鸡肛拭子、死胚、病死雏鸡等病料组织1024份,采用常规细菌分离鉴定方法和PCR方法鉴定得到148株沙门菌。采用Kauffmann-White法、PCR法、K-B药敏纸片法分别检测沙门菌血清型、毒力基因及耐药性。结果显示,分离的148株沙门菌属于11种血清型,以鸡白痢沙门菌(18.9%)、肠炎沙门菌(17.7%)和禽伤寒沙门菌(16.2%)为流行优势血清型;148株沙门菌毒力质粒基因spvA、spvB、spvC检出率在73.6%~83.1%之间,毒力岛基因mogA、sse L、mgtC的检测率在91.9%~96.6%之间;分离的148株沙门菌对阿莫西林、氨苄西林、新霉素等8种药物的耐药率为52.7%~97.8%,其他药物的耐药率为13.0%~21.6%。说明从规模化种鸡场分离的148株沙门菌血清型复杂、携带多种毒力基因,对常用药物产生很强的耐药性。 展开更多

关键词 沙门菌 血清型 毒力基因 耐药性 鸡

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獭兔源铜绿假单胞菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：6

11

作者 孙鑫鹏 高善颂 韩先杰 《动物医学进展》 北大核心 2016年第8期128-131,共4页

为了确定某獭兔养殖场獭兔发病的主要病原菌,分析该病原菌的耐药性,本试验对青岛市某獭兔养殖场送检的病死兔进行病理剖检,并从肺脏中分离得到1株细菌,随后进行分离菌形态观察、生化试验、细菌16S rRNA基因测序。该株分离菌为革兰阴性杆... 为了确定某獭兔养殖场獭兔发病的主要病原菌,分析该病原菌的耐药性,本试验对青岛市某獭兔养殖场送检的病死兔进行病理剖检,并从肺脏中分离得到1株细菌,随后进行分离菌形态观察、生化试验、细菌16S rRNA基因测序。该株分离菌为革兰阴性杆菌,博检革兰阴性细菌鉴定系统的生化鉴定结果为铜绿假单胞菌,细菌的16S rRNA基因序列经同源性比较,与铜绿假单胞菌同源性为100%。药敏试验结果表明该株分离菌对多种头孢类、喹诺酮类药物高度敏感。细菌分离鉴定和药敏试验结果为临床用药治疗该病提供参考依据。 展开更多

关键词 獭兔 铜绿假单胞菌 分离鉴定 药敏试验

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水貂源绿脓杆菌的分离鉴定及致病性试验 被引量：8

12

作者 戴秀美 张永兵 +2 位作者 惠涌泉 王秋菊 常维山 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第8期126-129,共4页

为确诊引起某养貂场的主要细菌性疾病,对山东省诸城市某水貂养殖户送检的5只病貂进行剖检,根据病貂的临床症状、病理剖检变化及对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16SrRNA PCR鉴定、药物敏感试验、致病性试验,确诊为绿... 为确诊引起某养貂场的主要细菌性疾病,对山东省诸城市某水貂养殖户送检的5只病貂进行剖检,根据病貂的临床症状、病理剖检变化及对分离纯化的细菌进行形态特征观察、生化试验、细菌16SrRNA PCR鉴定、药物敏感试验、致病性试验,确诊为绿脓杆菌感染。药物敏感试验结果表明,分离菌株对环丙沙星、左氧氟沙星高度敏感,对多黏菌素、强力霉素、头孢噻肟中度敏感,对替米考星、复方新诺明、甲氧苄啶、土霉素、痢菌净等耐药,分离菌株对小鼠有很强的致病性,半数致死量为3.2×107cfu/mL。 展开更多

关键词 绿脓杆菌 分离鉴定 药敏试验 致病性 水貂

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大肠埃希菌与沙门菌纸基微流控联合检测试纸在沙门菌检测中的应用 被引量：3

13

作者 郑晓风 郑晓琴 +3 位作者 石莉 刘英玉 姚刚 张晓红 《动物医学进展》 北大核心 2018年第9期45-49,共5页

沙门菌是主要的食源性致病菌之一,实现食品生产一线中沙门菌的快速检测,是保证食品安全的关键。论文以市场畜禽肉为研究对象,对大肠埃希菌与沙门菌纸基微流控联合检测试纸(Escherichia coli and Salmonella microfluidic paper-based an... 沙门菌是主要的食源性致病菌之一,实现食品生产一线中沙门菌的快速检测,是保证食品安全的关键。论文以市场畜禽肉为研究对象,对大肠埃希菌与沙门菌纸基微流控联合检测试纸(Escherichia coli and Salmonella microfluidic paper-based analytical devices,E.coli+S.en-μPADs)临床应用准确性和便捷性进行效果评估,并用市售食品沙门菌快速检测试纸验证E.coli+S.en-μPADs的实用性。通过采集肉样及加工用具拭子,用E.coli+S.en-μPADs进行检测,并与市售沙门菌快速检测试纸进行比对试验。结果显示,E.coli+S.en-μPADs增菌培养到报告结果21.5h。E.coli+S.en-μPADs和市售沙门菌快速检测试纸检测都可对样品完成检测,对农贸市场畜禽肉检测中阳性符合率较高,达到100%,但在农贸市场畜禽肉加工用具阳性检测符合率为93.3%。说明E.coli+S.en-μPADs检测试纸具有结果准确,节约样品,检测省时等优势,可在畜产品生产和质量安全控制一线进行初筛。 展开更多

关键词 沙门菌 快速检测试纸 效果比较 食品安全

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猪胸膜肺炎放线杆菌四川株的分离鉴定及猪体内APXⅣA毒素基因的PCR检测 被引量：3

14

作者 陈建华 王红宁 +1 位作者 黄勇 余协中 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第1期49-52,共4页

从四川省某猪场分离到1株细菌,经培养特性、形态观察、生化试验、PCR检测及动物回归试验等鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。PCR检测毒素基因APXⅣA在体内的分布,从活猪血液中检测到APXⅣA毒素基因片段。感染猪自然死亡后,从不同脏器的检出率... 从四川省某猪场分离到1株细菌,经培养特性、形态观察、生化试验、PCR检测及动物回归试验等鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。PCR检测毒素基因APXⅣA在体内的分布,从活猪血液中检测到APXⅣA毒素基因片段。感染猪自然死亡后,从不同脏器的检出率来看,肺和扁桃体APXⅣA基因检出率最高,其次为心脏、心血、气管分泌物、肠系膜淋巴结,肾脏、脾脏未检出APXⅣA基因。 展开更多

关键词 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 聚合酶链式反应 APXⅣA 检测

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副猪嗜血杆菌OMP P5间接ELISA抗体检测方法优化 被引量：2

15

作者 臧莹安 黄彩梅 +3 位作者 李婉雁 李淼 宋帅 李春玲 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第9期6-9,共4页

利用副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P5基因表达并纯化复性后蛋白作为包被蛋白,通过对最佳加样作用时间的确定和最佳酶标二抗反应时间等条件的探索优化,建立针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(OMPP5)的间接ELISA抗体检测方法,通过对进行和未进行HPS免... 利用副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P5基因表达并纯化复性后蛋白作为包被蛋白,通过对最佳加样作用时间的确定和最佳酶标二抗反应时间等条件的探索优化,建立针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(OMPP5)的间接ELISA抗体检测方法,通过对进行和未进行HPS免疫的健康猪血清的检测,证实了建立的间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强、反应快速准确等特点。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 酶联免疫吸附试验

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鸡源致病性奇异变形杆菌的分离鉴定与遗传进化分析 被引量：16

16

作者 徐睿 李颜桃 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期2550-2558,共9页

为了解鸡源奇异变形杆菌的耐药情况、致病力和遗传特征,本试验从凉山地区分离得到2株细菌(YLF1、WS),通过培养特征、镜检特征和16SrRNA序列测定对分离菌进行鉴定及致病性试验;采用(K-B)法检测分离菌对14种常用抗生素(包括β-内酰胺类、... 为了解鸡源奇异变形杆菌的耐药情况、致病力和遗传特征,本试验从凉山地区分离得到2株细菌(YLF1、WS),通过培养特征、镜检特征和16SrRNA序列测定对分离菌进行鉴定及致病性试验;采用(K-B)法检测分离菌对14种常用抗生素(包括β-内酰胺类、头孢烯类、氨基糖苷类、四环素类、氟喹诺酮类、大环内酯类)的敏感性;并与GenBank中公布的21种不同来源的变形杆菌16SrRNA基因序列进行遗传进化分析。结果表明,YLF1、WS菌株均具有迁徙性和β-溶血生长特征,镜检为革兰氏阴性长短不一的杆菌或球菌,经16SrRNA基因鉴定与GenBank中奇异变形杆菌同源性均在99%以上,YLF1、WS菌株确定为奇异变形杆菌,均表现为多重耐药,耐药率分别为78.6%(11/14)和71.4%(10/14);雏鸡致死率均为80%;YLF1、WS菌株与日本人体分离株、中国新疆黄牛分离株和中国广东土壤分离株同源性最高,达99.9%;与来自中国河南、中国新疆及印度的鸡源奇异变形杆菌同源性较高(98.9%~99.3%),遗传关系密切。表明凉山地区鸡群中存在奇异变形杆菌感染,分离株有较高的致病力和较强的耐药性,也提示分离菌可能来源于环境、感染鸡或其他动物,同时存在人畜共患的潜在危险。 展开更多

关键词 鸡 奇异变形杆菌 分离鉴定 遗传进化分析

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单核细胞增生性李斯特氏菌及其检验 被引量：13

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作者 梁锐萍 黄素珍 胡慧强 《动物科学与动物医学》 2004年第11期47-49,共3页

单核细胞增生性李斯特氏菌是近年来又重新抬头出现的病原微生物,已在世界许多港口被检测到,并造成了一定的经济损失,被认为是影响畜禽和人类健康的重要病原微生物之一。本文就单核细胞增生性李斯特氏菌的生物学特性、流行病学、致病性... 单核细胞增生性李斯特氏菌是近年来又重新抬头出现的病原微生物,已在世界许多港口被检测到,并造成了一定的经济损失,被认为是影响畜禽和人类健康的重要病原微生物之一。本文就单核细胞增生性李斯特氏菌的生物学特性、流行病学、致病性及检验等方面进行了系统的综述,为控制此病原微生物的传播和蔓延提供了重要的理论和实践依据。 展开更多

关键词 单核细胞增生性李斯特氏菌 病原微生物 流行病学 检验 影响 致病性 综述 畜禽 生物学特性 人类健康

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西宁地区宠物犬源肺炎克雷伯菌血清型鉴定、致病性及耐药性检测 被引量：7

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作者 解秀梅 童富珍 《动物医学进展》 北大核心 2021年第7期131-134,共4页

为了研究西宁地区宠物犬源肺炎克雷伯菌血清型鉴定、致病性及耐药性等生物学特性,采集患有呼吸道疾病宠物犬的咽拭子、鼻拭子及痰液等病料组织127份,用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定、PCR等方法进行肺炎克雷伯菌鉴定,采用人工感... 为了研究西宁地区宠物犬源肺炎克雷伯菌血清型鉴定、致病性及耐药性等生物学特性,采集患有呼吸道疾病宠物犬的咽拭子、鼻拭子及痰液等病料组织127份,用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定、PCR等方法进行肺炎克雷伯菌鉴定,采用人工感染小鼠试验、PCR法及K-B药敏纸片法分别检测其致病性、血清型及耐药性。结果显示,从采集的127份样品分离得到62株致病性肺炎克雷伯菌,分离的62株致病性肺炎克雷伯菌有4种血清型,以K5(37.1%)和K1(19.4%)血清型为主要流行的血清型;对阿莫西林、氨苄西林、庆大霉素、新霉素、氟苯尼考、强力霉素、大观霉素、磺胺二甲氧嘧啶8种药物耐药率在61.%以上,对其他药物的耐药率在9.7%~35.5%之间。研究结果可为西宁地区宠物犬源肺炎克雷伯菌病的防控及合理用药提供参考依据。 展开更多

关键词 宠物犬 肺炎克雷伯菌 致病性 血清型 耐药性

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小鼠品系、性别及体重对猪丹毒活疫苗(G4T10株)安全性评价的影响

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作者 任小侠 赵俊杰 +4 位作者 彭国瑞 程君生 吴思捷 姚文生 王团结 《动物医学进展》 北大核心 2021年第12期50-53,共4页

猪丹毒活疫苗(G4T10株)用小鼠进行安全性检验时存在结果不稳定的问题,通过对小鼠品系(C57BL/6N、ICR、KM、Balb/c)、性别及体重等因素的系统比较,研究其对商品化疫苗安全性检验结果的影响。结果发现,不同品系小鼠对猪丹毒活疫苗(G4T10株... 猪丹毒活疫苗(G4T10株)用小鼠进行安全性检验时存在结果不稳定的问题,通过对小鼠品系(C57BL/6N、ICR、KM、Balb/c)、性别及体重等因素的系统比较,研究其对商品化疫苗安全性检验结果的影响。结果发现,不同品系小鼠对猪丹毒活疫苗(G4T10株)的安全性检验结果产生影响,使用C57BL/6N小鼠相比其他品系小鼠结果稳定且符合质量标准要求;性别因素对其安全性检验结果无显著影响;ICR小鼠随着体重增加,安全性检验中死亡率降低,但是仍然不符合质量标准要求。研究结果推荐使用C57BL/6N小鼠进行猪丹毒活疫苗(G4T10株)安全性检验,为下一步质量标准修订提供参考了依据。 展开更多

关键词 猪丹毒 G4T10株 小鼠品系 性别 体重 安全性检验

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1型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：3

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作者 杨依霏 罗青平 +4 位作者 张蓉蓉 艾地云 廖永洪 邵华斌 程国富 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期13-18,共6页

以1型鸭疫里氏杆菌(RA)全基因组保守区域ompA基因的重组表达产物为包被抗原,建立了检测RA血清抗体的间接ELISA方法。原核表达的重组ompA蛋白经纯化后作为包被物,以方阵滴定法确定抗原最佳包被浓度为1.5μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶10... 以1型鸭疫里氏杆菌(RA)全基因组保守区域ompA基因的重组表达产物为包被抗原,建立了检测RA血清抗体的间接ELISA方法。原核表达的重组ompA蛋白经纯化后作为包被物,以方阵滴定法确定抗原最佳包被浓度为1.5μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100。与普通的微量凝集试验相比较,该方法灵敏度高于凝集试验约16倍～128倍。与鸭源大肠埃希菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭链球菌、鸭源呼肠病毒、鸭肝炎病毒和鸭瘟病毒感染鸭血清均无交叉反应,表明该方法特异性好。利用该方法检测了雏鸭免疫RA灭活油乳剂疫苗之后血清抗体水平。 展开更多

关键词 鸭疫里氏杆菌 重组ompA蛋白 ELISA

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