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跨越式滚环等温扩增试剂盒检测沙门氏菌的研究
1
作者
杨倩
张欣
+3 位作者
张金库
耿凤珍
王明玉
李艳玲
《食品安全导刊》
2024年第5期109-112,共4页
沙门氏菌可引起食源性疾病,严重危害食品安全和人类健康。因此,开发新的检测方法尤为重要。本研究基于自主研发的新型核酸扩增方法--跨越式滚环等温扩增,研制了检测沙门氏菌的试剂盒,并对该试剂盒相关性能进行评估。结果显示,试剂盒检...
沙门氏菌可引起食源性疾病,严重危害食品安全和人类健康。因此,开发新的检测方法尤为重要。本研究基于自主研发的新型核酸扩增方法--跨越式滚环等温扩增,研制了检测沙门氏菌的试剂盒,并对该试剂盒相关性能进行评估。结果显示,试剂盒检测沙门氏菌的特异性良好,灵敏度为4.1×10^(1)CFU·mL^(-1),有效期可达90 d,表明该试剂盒可靠、灵敏、稳定,可满足食品中沙门氏菌快速检测的需求。
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关键词
沙门氏菌
跨越式滚环等温扩增
检测试剂盒
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职称材料
基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌
被引量：
5
2
作者
刘健慧
张先舟
+5 位作者
张蕴哲
李兰茹
王红静
高洁
耿凤珍
檀建新
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期325-333,共9页
将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增...
将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌(Salmonella)的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x+2.8723(R^(2)=0.9925),线性范围为17 fg/μL~1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。
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关键词
G-四链体
聚合酶链式反应
滚环扩增技术
沙门氏菌
荧光信号检测
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职称材料
G-四联体与聚合酶链式反应联用可视化检测沙门氏菌
被引量：
2
3
作者
刘健慧
耿凤珍
+4 位作者
张先舟
高浩
李聪
高洁
檀建新
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第22期331-338,共8页
建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-...
建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-四联体的双链DNA,变性后与氯高铁血红素结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶(DNAzyme),并催化H_(2)O_(2)与2,2’-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑琳-6-磺酸)二胺盐由无色变为绿色,实现G-四联体与PCR联用对沙门氏菌的可视化检测。在优化的检测体系下,沙门氏菌基因组的质量浓度对数与421 nm处的吸光度具有良好的线性关系,其回归方程为y=0.1299x+0.2179,R^(2)=0.9945,线性范围0.07~771.6 ng/μL,灵敏度为0.07 ng/μL。特异性分析表明:此方法适用于沙门氏菌属的检测,可成功应用于人工污染沙门氏菌牛奶的检测,检出限为1.2×10^(2) CFU/mL。通过检测30种市售样品,发现其结果与国标检测方法结果一致。本研究为食源性致病菌的检测提供了新的策略。
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关键词
G-四联体
聚合酶链式反应扩增
沙门氏菌
可视化检测
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职称材料
题名
跨越式滚环等温扩增试剂盒检测沙门氏菌的研究
1
作者
杨倩
张欣
张金库
耿凤珍
王明玉
李艳玲
机构
河北大学公共卫生学院
保定市第一中心医院公共卫生处
河北省分子病理与肿瘤早期诊断重点实验室
河北大学附属医院检验科
河北大学附属医院药学部
保定市疾病预防控制中心
出处
《食品安全导刊》
2024年第5期109-112,共4页
基金
河北省高层次人才资助项目(C20231100)
河北省高等学校科学技术研究项目(QN2022073)
+3 种基金
河北大学校长基金(XZJJ202314)
河北大学医学学科培育项目重点项目(2022A06)
河北大学高层次人才科研启动项目(521100222024)
河北大学大学生创新训练计划项目(DC2024235)。
文摘
沙门氏菌可引起食源性疾病,严重危害食品安全和人类健康。因此,开发新的检测方法尤为重要。本研究基于自主研发的新型核酸扩增方法--跨越式滚环等温扩增,研制了检测沙门氏菌的试剂盒,并对该试剂盒相关性能进行评估。结果显示,试剂盒检测沙门氏菌的特异性良好,灵敏度为4.1×10^(1)CFU·mL^(-1),有效期可达90 d,表明该试剂盒可靠、灵敏、稳定,可满足食品中沙门氏菌快速检测的需求。
关键词
沙门氏菌
跨越式滚环等温扩增
检测试剂盒
Keywords
Salmonella
saltatory rolling circle amplification
detection kit
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌
被引量：
5
2
作者
刘健慧
张先舟
张蕴哲
李兰茹
王红静
高洁
耿凤珍
檀建新
机构
河北农业大学食品科技学院
河北旅游职业学院
河北大学附属医院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期325-333,共9页
基金
河北省自然科学基金重大项目(C2019204342)
河北省科技支撑重大项目(16275505D)
河北农业大学食品加工学科群资助项目(2020-06)。
文摘
将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌(Salmonella)的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x+2.8723(R^(2)=0.9925),线性范围为17 fg/μL~1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。
关键词
G-四链体
聚合酶链式反应
滚环扩增技术
沙门氏菌
荧光信号检测
Keywords
G-quadruplet
polymerase chain reaction
rolling circle amplification
Salmonella
fluorescence signal detection
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
G-四联体与聚合酶链式反应联用可视化检测沙门氏菌
被引量：
2
3
作者
刘健慧
耿凤珍
张先舟
高浩
李聪
高洁
檀建新
机构
河北农业大学食品科技学院
河北大学附属医院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第22期331-338,共8页
基金
河北省自然基金重大项目(C2019204342)
河北省科技支撑重大项目(16275505D)
河北农业大学食品加工学科群项目(2020-06)。
文摘
建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-四联体的双链DNA,变性后与氯高铁血红素结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶(DNAzyme),并催化H_(2)O_(2)与2,2’-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑琳-6-磺酸)二胺盐由无色变为绿色,实现G-四联体与PCR联用对沙门氏菌的可视化检测。在优化的检测体系下,沙门氏菌基因组的质量浓度对数与421 nm处的吸光度具有良好的线性关系,其回归方程为y=0.1299x+0.2179,R^(2)=0.9945,线性范围0.07~771.6 ng/μL,灵敏度为0.07 ng/μL。特异性分析表明:此方法适用于沙门氏菌属的检测,可成功应用于人工污染沙门氏菌牛奶的检测,检出限为1.2×10^(2) CFU/mL。通过检测30种市售样品,发现其结果与国标检测方法结果一致。本研究为食源性致病菌的检测提供了新的策略。
关键词
G-四联体
聚合酶链式反应扩增
沙门氏菌
可视化检测
Keywords
G-quadruplex
polymerase chain reaction
Salmonella enteriditis
visual detection
分类号
TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
跨越式滚环等温扩增试剂盒检测沙门氏菌的研究
杨倩
张欣
张金库
耿凤珍
王明玉
李艳玲
《食品安全导刊》
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌
刘健慧
张先舟
张蕴哲
李兰茹
王红静
高洁
耿凤珍
檀建新
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
G-四联体与聚合酶链式反应联用可视化检测沙门氏菌
刘健慧
耿凤珍
张先舟
高浩
李聪
高洁
檀建新
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
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职称材料
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