弓形虫PCR检测试剂盒的组装和初步应用 被引量：9

1

作者 任科研 李琳 +3 位作者 苑淑贤 尹荣兰 杨金生 姚新华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期92-94,共3页

研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能... 研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能扩增出弓形虫特异性基因MIC3片段,与猪球虫、贾第虫、猪旋毛虫和隐孢子虫无交叉反应;该检测方法最低能够检测到10个弓形虫速殖子的DNA,不同批次的试剂盒对同一样品检测和同一批次对不同样品检测,有较高的重复性和稳定性,且常温下可保存1年以上,临床应用效果显著。该检测试剂盒对弓形虫病早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。 展开更多

关键词 弓形虫 PCR检测试剂盒 组装 应用

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小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒组装和初步应用 被引量：2

2

作者 任科研 姚新华 +2 位作者 苑淑贤 李琳 邵洪泽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期14-16,共3页

本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进... 本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进行临床扩大试验。该二联PCR诊断试剂盒能扩增出预期的小鹅瘟375bp核酸片段和鹅病毒性肠炎223bp核酸片段,与鸭瘟病毒、鹅副黏病毒无交叉反应;最低能检测到小鹅瘟病毒104 ELD50/mL,雏鹅新型病毒性肠炎病毒2.5×10-1ELD50;不同批次的试剂盒对同一样品检测结果一致;常温下至少可保存5个月;临床应用效果显著。该二联PCR检测试剂盒能够对小鹅瘟和雏鹅病毒性肠炎早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。 展开更多

关键词 小鹅瘟 雏鹅新型病毒性肠炎 PCR检测试剂盒 研制 应用

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堆型艾美耳球虫cSZ1基因的克隆与分析 被引量：1

3

作者 任科研 苑淑贤 +2 位作者 李琳 姚新华 苑冬梅 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第26期16124-16126,共3页

[目的]分析堆型艾美尔球虫cSZ1基因序列,为研制球虫疫苗提供候选抗原。[方法]根据堆型艾美尔球虫基因序列,设计合成引物,RT-PCR扩增堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因并测序。[结果]与GenBank中发表的堆型艾美尔球虫cSZ1基因序列相比,堆型... [目的]分析堆型艾美尔球虫cSZ1基因序列,为研制球虫疫苗提供候选抗原。[方法]根据堆型艾美尔球虫基因序列,设计合成引物,RT-PCR扩增堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因并测序。[结果]与GenBank中发表的堆型艾美尔球虫cSZ1基因序列相比,堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因发生了5个核苷酸变异,两者的核苷酸序列同源性为99.47%,两者编码区的核苷酸序列同源性为99.61%。堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因ORF内有2个变异位点。其中,A185G变异导致了所编码氨基酸由缬氨酸变为异亮氨酸。[结论]cSZ1基因编码蛋白可以作为球虫疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 堆型艾美耳球虫 cSZ1基因 克隆 序列

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弓形虫疫苗的研究概况及前景 被引量：4

4

作者 任科研 苑淑贤 +3 位作者 李琳 毛文智 苑冬梅 姚新华 《国外畜牧学（猪与禽）》 2011年第2期87-88,共2页

弓形虫是重要的机会性致病原虫,广泛寄生于人体及动物的组织细胞内,引起严重的人兽共患病。呈世界性分布,人体感染率较高的有美国、古巴、法国、英国、新加坡、东非和巴西等。我国各省（区、市）均有人体弓形虫感染报告。20世纪末,我国... 弓形虫是重要的机会性致病原虫,广泛寄生于人体及动物的组织细胞内,引起严重的人兽共患病。呈世界性分布,人体感染率较高的有美国、古巴、法国、英国、新加坡、东非和巴西等。我国各省（区、市）均有人体弓形虫感染报告。20世纪末,我国人群弓形虫感染率为8%～15%,人体致病分为先天性弓形虫病和获得性弓形虫病,先天性弓形虫病可导致孕妇流产、早产、畸胎和死产,在受染成活的婴儿中有85%在20岁以前会出现视网膜、 展开更多

关键词 弓形虫感染 疫苗 弓形虫病 人兽共患病 感染率 先天性 病原虫 细胞内

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猪弓形虫PCR检测方法研究及初步应用 被引量：4

5

作者 任科研 姚新华 +1 位作者 苑淑贤 杨金生 《中国畜禽种业》 2011年第8期105-106,共2页

以微线粒体MIC3基因作为弓形虫特异的遗传标记,建立了猪弓形虫特异PCR检测方法。经过试验摸索出猪弓形虫PCR检测的最佳反应条件,对敏感性和特异性进行研究,该方法能特异性地扩增出弓形虫基因组中相应片段,与微小隐孢子虫,贾第虫、旋毛... 以微线粒体MIC3基因作为弓形虫特异的遗传标记,建立了猪弓形虫特异PCR检测方法。经过试验摸索出猪弓形虫PCR检测的最佳反应条件,对敏感性和特异性进行研究,该方法能特异性地扩增出弓形虫基因组中相应片段,与微小隐孢子虫,贾第虫、旋毛虫和球虫等相关寄生虫基因组DNA无交叉反应;最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA。该方法的各项指标达到了弓形虫的检测要求。 展开更多

关键词 猪弓形虫 PCR检测 方法研究 应用

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一例猪伪狂犬病的诊治

6

作者 任科研 邵洪泽 +2 位作者 刘永钢 苑淑贤 许志林 《国外畜牧学（猪与禽）》 2012年第7期68-70,共3页

1发病情况 吉林某家新办猪场，场址选择在山边，不设围墙，鼠患相当猖獗．．猪场有母猪200头，公猪10头，采用本交繁殖，种猪引进未采取任何检疫措施，饲养水平一般，所有猪都接种过猪瘟疫苗、猪肺疫与猪丹毒二联莳、猪链球菌等．

关键词 猪伪狂犬病 诊治 发病情况 场址选择 检疫措施 种猪引进 饲养水平 猪瘟疫苗

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弓形虫疫苗研究进展 被引量：10

7

作者 吴彬 曹利利 +3 位作者 姚新华 任科研 苑淑贤 赵权 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第1期102-106,共5页

弓形虫是细胞内寄生的一种原虫,弓形虫病是由弓形虫引起的一种重要人兽共患寄生虫病,弓形虫疫苗作为防控弓形虫病的重要措施是目前研究的热点。弓形虫进入机体后以细胞免疫为主,使得疫苗可以发挥最大功用。疫苗的免疫效果与候选抗原和... 弓形虫是细胞内寄生的一种原虫,弓形虫病是由弓形虫引起的一种重要人兽共患寄生虫病,弓形虫疫苗作为防控弓形虫病的重要措施是目前研究的热点。弓形虫进入机体后以细胞免疫为主,使得疫苗可以发挥最大功用。疫苗的免疫效果与候选抗原和佐剂的使用密切相关,不同类型的抗原和佐剂用于疫苗中能够产生不同的免疫效果。目前,弓形虫疫苗的候选抗原主要以虫体特异组分蛋白和新型表位基因为主,佐剂也从传统的弗氏佐剂拓展到了霍乱毒素、透明质酸酶和CpG-ODN等。综合考虑各方面因素进行疫苗研制,将成为生产具有理想保护性弓形虫疫苗的研究方向。 展开更多

关键词 弓形虫 疫苗 细胞免疫 抗原 佐剂

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柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因的克隆与序列分析 被引量：5

8

作者 曹利利 姚新华 +2 位作者 侯洪烈 苑淑贤 任科研 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期115-120,共6页

根据已发表的柔嫩艾美耳球虫(Houghton株)基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,将扩增的片段连入pMD18T载体,筛选阳性克隆进行测序和序列分析。结果表明,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,... 根据已发表的柔嫩艾美耳球虫(Houghton株)基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,将扩增的片段连入pMD18T载体,筛选阳性克隆进行测序和序列分析。结果表明,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,测得ORF全长813bp;与GenBank中收录的Houghton株柔嫩艾美耳球虫的SAG2基因序列相比,有4个碱基发生变异,两者的核苷酸序列同源性为99.50%;柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因的推导氨基酸序列同源性为99.63%,其中,A185G变异导致了编码氨基酸由谷氨酸变为甘氨酸(E62G),A247T变异导致了编码氨基酸由蛋氨酸变为亮氨酸(M83L),而其他核苷酸的突变为无义突变;SAG2抗原的N端和C端疏水性较强,并且N端前23个氨基酸为跨膜信号肽区,而中间有许多亲水性区域,且显示很强的抗原性。柔嫩艾美耳球虫长春株与Houghton株的SAG2基因编码蛋白相似性很高,具有很强的抗原性,可以作为球虫疫苗的候选抗原来进一步研究。 展开更多

关键词 柔嫩艾美耳球虫长春株 SAG2基因 克隆 序列分析

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柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达 被引量：6

9

作者 曹利利 姚新华 +4 位作者 郭衍冰 王英贺 任科研 魏峰 苑淑贤 《动物医学进展》 北大核心 2015年第9期13-17,共5页

为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-... 为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV361-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础。 展开更多

关键词 柔嫩艾美耳球虫 SAG2基因 卡介苗 表达

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猪传染性胃肠炎诊断技术的研究进展 被引量：4

10

作者 杨金生 刘云志 +2 位作者 柴方红 黄海楠 任科研 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第5期195-198,共4页

猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起猪病毒性腹泻的一种重要病原微生物。近年来,其检测技术取得了迅速发展。文章就该病诊断技术的研究进展作一综述,并对其检测新策略进行了展望。

关键词 猪传染性胃肠炎 诊断技术 研究进展

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小鹅瘟马源高免血清的制备及应用 被引量：2

11

作者 李琳 邵洪泽 +3 位作者 任科研 毛文智 许志林 姚新华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第9期115-118,共4页

采用JLDA株小鹅瘟抗原,高免马匹后经采血精制可获得滴度为1∶64～1∶128的抗小鹅瘟高免血浆。通过胃蛋白酶消化-硫酸铵盐析的工艺,得到小鹅瘟马源高免血清。按0.5 mL/羽剂量共预防雏鹅52.48万羽,按1 mL/羽～3 mL/羽剂量共治疗感染雏鹅5... 采用JLDA株小鹅瘟抗原,高免马匹后经采血精制可获得滴度为1∶64～1∶128的抗小鹅瘟高免血浆。通过胃蛋白酶消化-硫酸铵盐析的工艺,得到小鹅瘟马源高免血清。按0.5 mL/羽剂量共预防雏鹅52.48万羽,按1 mL/羽～3 mL/羽剂量共治疗感染雏鹅5.66万羽,证实该抗血清效价高,对雏鹅的预防保护率为95.58%,对感染雏鹅的治愈率为92.87%,表明对小鹅瘟防治安全高效。马采血量大,成本低,同时有效地避免了同源动物间其他疫病的感染和强毒的散播,较之用鹅作为血清来源动物经济和社会效益显著。 展开更多

关键词 小鹅瘟 鹅细小病毒 马源高免血清 制备 应用

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陈旧寄生虫标本整理试验 被引量：3

12

作者 孙维东 姚新华 +3 位作者 苑淑贤 杨金生 任科研 苑冬梅 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第1期144-146,共3页

经六步法全方位整理陈旧寄生虫瓶装标本17种规格,1138件。全貌焕然一新,技术价值陡增,为标本室建立近50年来标本全息最好时期。新资料、新数据、新照片存入电脑管理。其中试验筛选的玻璃胶新材料封闭标本瓶已近5年,仍保持牢固严密、不... 经六步法全方位整理陈旧寄生虫瓶装标本17种规格,1138件。全貌焕然一新,技术价值陡增,为标本室建立近50年来标本全息最好时期。新资料、新数据、新照片存入电脑管理。其中试验筛选的玻璃胶新材料封闭标本瓶已近5年,仍保持牢固严密、不透气、不漏液、不裂缝良好状态。解决了几十年来存在的标本瓶封闭不严、保存液长年挥发,造成标本干瘪变形的损坏和挥发的甲醛对人身健康危害的难题,为长期沉寂的标本封闭技术的一次创新。 展开更多

关键词 寄生虫标本 整理试验 玻璃胶

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复方吡喹酮注射液防治羊脑多头蚴病的试验研究 被引量：6

13

作者 姚新华 苑淑贤 +1 位作者 杨金生 任科研 《中国兽药杂志》 2005年第10期31-33,共3页

为了获得复方吡喹酮注射液治疗羊脑多头蚴病的最佳治疗剂量,本试验应用复方吡喹酮注射液30、50、80 mg/kg BW三个剂量组对患羊脑多头蚴病的绵羊进行治疗,设80 mg/kgBW剂量的丙硫咪唑作为药物对照组。试验结果表明,30 mg/kg BW剂量组治... 为了获得复方吡喹酮注射液治疗羊脑多头蚴病的最佳治疗剂量,本试验应用复方吡喹酮注射液30、50、80 mg/kg BW三个剂量组对患羊脑多头蚴病的绵羊进行治疗,设80 mg/kgBW剂量的丙硫咪唑作为药物对照组。试验结果表明,30 mg/kg BW剂量组治愈率较低,为68.97%,不能达到治疗目的;50和80 mg/kg BW剂量对羊脑多头蚴均有很强的驱杀作用,对病羊的治愈率分别为91.84%和92.85%,但两组间差异不显著(P>0.05);高、中剂量组(80、50mg/kg BW)与低剂量组、药物对照组比较差异极显著(P<0.01)。50 mg/kg BW剂量为防治羊脑多头蚴病的最佳治疗剂量。 展开更多

关键词 复方吡喹酮注射液 羊 脑多头蚴病 疗效

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牛结核病疫苗的研究进展 被引量：1

14

作者 杨金生 刘云志 +1 位作者 黄海楠 任科研 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第8期212-214,共3页

牛结核病是一种危害严重的、人兽共患的、慢性消耗性传染病,实施免疫接种是大多数国家控制牛结核病流行的重要措施。在过去十年中,人们应用分子生物学技术来研制更为有效的结核病疫苗,大量的候选疫苗用于牛的测试,但效果不一,它们共同... 牛结核病是一种危害严重的、人兽共患的、慢性消耗性传染病,实施免疫接种是大多数国家控制牛结核病流行的重要措施。在过去十年中,人们应用分子生物学技术来研制更为有效的结核病疫苗,大量的候选疫苗用于牛的测试,但效果不一,它们共同的也是致命的缺点是免疫保护力低。文章就牛结核病疫苗的研究近况进行了综述。 展开更多

关键词 牛结核病 疫苗 研究进展

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浅谈影响鸡蛋蛋壳颜色的因素 被引量：7

15

作者 杨金生 刘云志 +2 位作者 黄海楠 任科研 柴方红 《中国畜禽种业》 2012年第8期124-125,共2页

在我国居民消费鸡蛋中蛋色是一个重要的购买指标。在我国蛋鸡养殖中,红壳蛋鸡养殖量占整个蛋鸡养殖量的85％以上。鸡蛋的蛋色对鸡蛋的销售影响很大，因此，研究蛋色形成的机理和影响因素对蛋鸡产业有重要的意义。

关键词 蛋壳颜色 鸡蛋 蛋鸡养殖 居民消费 影响因素 色形

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柔嫩艾美耳球虫长春株的抗药性试验研究 被引量：3

16

作者 姚新华 苑淑贤 +1 位作者 任科研 杨金生 《中国畜禽种业》 2011年第11期149-151,共3页

对柔嫩艾美耳球虫长春株的抗药性进行试验研究。用最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率、相对卵囊产量和抗球虫指数4项指标进行综合判定,观察柔嫩艾美耳球虫长春分离株对氯苯胍、克球粉、地克珠利、马杜拉霉素、氨丙啉、盐霉素、莫能... 对柔嫩艾美耳球虫长春株的抗药性进行试验研究。用最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率、相对卵囊产量和抗球虫指数4项指标进行综合判定,观察柔嫩艾美耳球虫长春分离株对氯苯胍、克球粉、地克珠利、马杜拉霉素、氨丙啉、盐霉素、莫能菌素和常山酮的抗药性。表明:柔嫩艾美耳球虫长春分离株对地克珠利和马杜拉霉素敏感,对莫能菌素轻度耐药,对克球粉和常山酮中度耐药,对氯苯胍、氨丙啉和盐霉素重度耐药。本地区防治柔嫩艾美耳球虫可合理使用地克珠利、马杜拉霉素和莫能菌素,对克球粉、常山酮慎用,氯苯胍、氨丙啉和盐霉素暂停使用。 展开更多

关键词 柔嫩艾美耳球虫 长春株 抗药性 试验研究

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雏鹅新型病毒性肠炎PCR方法的建立及应用 被引量：1

17

作者 毛文智 苑淑贤 +4 位作者 李琳 任科研 杨金生 邵洪泽 姚新华 《国外畜牧学（猪与禽）》 2010年第6期77-78,共2页

根据雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)保守基因序列,设计合成一对引物并且进行PCR检测,扩增出预期的223 bp条带。该方法能在雏鹅新型病毒性肠炎病毒BC07株中扩增到特异性片段,而鹅细小病毒、鸭瘟病毒、鹅副黏病毒的扩增结果均为阴性;敏感... 根据雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)保守基因序列,设计合成一对引物并且进行PCR检测,扩增出预期的223 bp条带。该方法能在雏鹅新型病毒性肠炎病毒BC07株中扩增到特异性片段,而鹅细小病毒、鸭瘟病毒、鹅副黏病毒的扩增结果均为阴性;敏感性试验表明该方法最低检出限量为2.5×10^(-1)EID_(50)。表明所建立的PCR方法具有敏感性高、特异性强的特点。可以用来检测雏鹅新型病毒性肠炎。 展开更多

关键词 雏鹅新型病毒性肠炎 PCR 应用

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小鹅瘟-鹅副黏病毒病二联油乳剂灭活疫苗的研究

18

作者 李琳 姚新华 +3 位作者 邵洪泽 尹荣兰 任科研 许志林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第8期189-194,共6页

为了有效防制小鹅瘟和鹅副黏病毒病对雏鹅的危害,分别选用免疫原性良好的小鹅瘟JLDA株和鹅副黏病毒JLSY株制作抗原液,应用PALL浓缩技术进行浓缩,保证灭活病毒抗原含量足,比例均衡。选取10号白油佐剂,按油相与水相比1∶1配制成复相制备... 为了有效防制小鹅瘟和鹅副黏病毒病对雏鹅的危害,分别选用免疫原性良好的小鹅瘟JLDA株和鹅副黏病毒JLSY株制作抗原液,应用PALL浓缩技术进行浓缩,保证灭活病毒抗原含量足,比例均衡。选取10号白油佐剂,按油相与水相比1∶1配制成复相制备二联灭活苗,黏稠度低。结果显示,对鹅的免疫效力不低于相应单苗,两种病毒之间没有交互抑制作用,且二联灭活苗安全性能好,疫苗吸收良好。种、雏鹅产生抗体快,免疫种、雏鹅,具有产生免疫力早,保护期长等特点,于2～8℃至少保存12个月。 展开更多

关键词 小鹅瘟 鹅副黏病毒 二联灭活疫苗

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鹅病毒性肠炎BC07株病毒的分离与鉴定

19

作者 毛文智 邵洪泽 +1 位作者 任科研 姚新华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第2期230-231,共2页

对采自白城市的疑似鹅病毒性肠炎的病死雏鹅病料,经过病毒分离培养、中和试验、动物回归试验和PCR检测,证明所分离的病毒确为鹅病毒性肠炎病毒。

关键词 鹅病毒性肠炎 分离 鉴定 PCR

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一例犬瘟热的诊治

20

作者 杨金生 刘云志 +2 位作者 黄海楠 任科研 柴方红 《中国畜禽种业》 2012年第2期116-116,共1页

犬瘟热,俗称狗瘟,是一种主要危害幼犬的严重犬类疾病,其病原体是犬瘟热病毒。病犬以呈现双相热型、鼻炎、严重的消化道障碍和呼吸道炎症等为特征,少数病例可发生脑炎。1临床症状2011年6月,长春市某家庭两只宠物犬出现体温升高,持续1～3... 犬瘟热,俗称狗瘟,是一种主要危害幼犬的严重犬类疾病,其病原体是犬瘟热病毒。病犬以呈现双相热型、鼻炎、严重的消化道障碍和呼吸道炎症等为特征,少数病例可发生脑炎。1临床症状2011年6月,长春市某家庭两只宠物犬出现体温升高,持续1～3天,然后消退,似感冒痊愈的特征。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 诊治 呼吸道炎症 临床症状 病原体 消化道 温升高 宠物犬

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